הרכבה והפעלה של במת קירור כדי לשתק C. elegans על צלחות התרבות שלהם

אנו מפתחים גישה פשוטה שיכולה לשתק את כל אוכלוסיית Caenorhabditis elegans ישירות על צלחות גידול. אסטרטגיה זו מאיצה באופן משמעותי ניסויים הקשורים להדמיה. אימוביליזציה של נתרן אזיד המשמשת בדרך כלל להדמיה ברזולוציה גבוהה של אוכלוסיית C.elegans היא עתירת עבודה, ודורשת הרכבה וטיפול פרטניים של בעלי חיים.

שיטה זו יכולה גם להפחית את תוחלת החיים של בעלי החיים ואת הכדאיות, מה שיכול לבלבל נתונים. שיטת הקירור המסורתית השתמשה בטמפרטורות נמוכות יחסית של שתיים עד ארבע מעלות צלזיוס של מיקרו-נוזל מועסק, הדורש הכשרה מקיפה למשתמש. מצאנו שעם שלב הקירור, הטמפרטורות החמות כמו שש מעלות צלזיוס, משתקות בעלי חיים בצורה חזקה יותר לצורך דימות של סיבובים גבוהים.

קירור אימוביליזציה של C.elegans אינו בשימוש נרחב אך כאשר משתמשים בו, הוא משולב בדרך כלל עם מיקרופלואידיקה מורכבת הדורשת אימון משתמש משמעותי. בשל החסרון של מתודולוגיית האימוביליזציה הטיפוסית, שיפור ניידות הקירור והנגישות שלנו מאפשר תפוקה גבוהה והדמיה ברזולוציה גבוהה יותר לחוקרים. בהשוואה להרכבה והרדמה עתירות עבודה של בעלי חיים בודדים, גישת הקירור שלנו יכולה לשתק באופן הפיך אוכלוסיות גדולות של C.elegans, ולבטל 98% מזמן העיבוד.

המחסור בחומרי הרדמה כימיים גם מצמצם את החשיפה המזיקה לבעלי חיים ולחוקרים. שלב קירור מאפשר תפוקה גבוהה והדמיה ברזולוציה גבוהה ישירות על לוחות הגידול. הפשטות של תכנון זה מאפשרת לחוקרים אחרים לבנות בקלות מכשירים משלהם ולשלב אותם במערכים הקיימים שלהם, כדי לחולל מהפכה בהיקף ובקצב של מחקריהם הביולוגיים.

המעבדה שלנו תתאים את שלב הקירור לתצורות מיקרוסקופ שונות. עיצובים שונים יעבדו עם מיקרוסקופים הפוכים, מיקרוסקופים זקופים מורכבים, כמו גם פלטפורמות הדמיה שונות.