DNA-蛋白质交联及其翻译后修饰的定量检测

嗯，我的研究重点是DNA损伤修复。特别是，由拓扑异构酶抑制剂，PARP抑制剂和醛诱导的DNA损伤的修复。我试图说明细胞修复这些药物诱导的DNA蛋白质交联的分子机制。

DNA蛋白交联修复的最新进展包括鉴定DNA蛋白交联的新修复途径以及调节这些修复途径的移植后修饰机制。酶测定的体内复合物和DNA加合物回收测定的快速方法是测量DNA蛋白质交联的最常用方法，某些DNA蛋白质交联，例如拓扑异构酶一DNA蛋白质交联，可以使用特异性抗体通过免疫荧光进行检测。最大的挑战之一是研究翻译后修饰在DNA蛋白质交联修复中的作用。

由于翻译后修饰剂偶联的DNA蛋白交联度非常低，因此富集和检测其丰度一直非常具有挑战性。该协议提供了检测去泛素化，SUMO化和ADP-核糖基化DNA蛋白质交联定量的详细信息，使研究人员能够研究这些修饰在修复来自不同来源的DNA蛋白质交联中的动力学和形成。用于检测DNA蛋白质交联的其他方案不包含描述检测其翻译后修饰的步骤。

虽然该协议提供了诸如药物浓度和诱导修饰的持续时间和分离和检测修饰的方法以及稳定修饰的方法等详细信息。因此，在DNA蛋白质交联的修复中已经发现了几种移植后的修饰。他们如何协调修复在很大程度上仍然未知。

因此，这些修改之间的相互作用值得进一步研究。