早期斑马鱼胚胎的光片显微镜成像和安装策略

尽管沿左右轴存在内部不对称性，但在大多数高等生物中，骨骼和肌肉等外部结构以对称方式发育。使用斑马鱼胚胎，我们将高分辨率实时成像、定量分析和理论建模相结合，以研究对称性建立的原理。该领域在很大程度上依赖于各种显微镜技术，以高时空分辨率对发育中的胚胎进行成像，然后对获得的图像进行定量分析。

不同形式的显微镜具有独特的优势。然而，最近，光片和实时超分辨率显微镜显着推进了我们对胚胎发育动态过程的看法。传统的共聚焦和多光子显微镜通常会导致光漂白和光毒性，此外，在对活胚胎成像时，视野有限。

多视图光片显微镜解决了这些问题，允许更长的观察时间和样品旋转。然而，使用这种技术进行成像的样品制备和封片仍然存在挑战。成功的成像过程的一个主要限制是适当地安装和定位样品。

在这里，我们描述了安装早期斑马鱼胚胎以在多视图光片显微镜中成像的策略，以及获取和重建多视图图像的一般程序。