Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

关节疾病和 TMD 是一组大约 30 种影响关节肌肉和周围组织疼痛的人类疾病，是迄今为止 TMD 患者住院的主要原因。由于对疼痛机制了解不足，目前尚无有效的 TMD 疼痛治疗方法。为了研究疼痛机制，我们开发了一个痛苦的 TMD 小鼠模型，然后是疼痛行为分析。

由于行为分析的内在可变性，人工疼痛研究中的疼痛评估是一个相当大的挑战。此外，不同的实验室使用，不同的方案来评估疼痛，使得在不同研究之间进行交叉引用具有挑战性。在这篇 JOE 文章中，我们描述了一种火焰、细丝和背力测定的可视化版本，用于主要人工疼痛。

这些协议为直接实施提供了详细的方法，并结合了全面评估 TMJ 疼痛的方法。它们可用于评估各种口腔疼痛情况下的疼痛行为，例如自体疼痛、TMJ 笔、肌肉笔和神经病笔。要开始将麻醉的小鼠放置在手术平台上，请准备无菌胰岛素注射器或 31 号针头，用于将 CFA 注射到颞下颌关节中。

用聚乙烯管制成的护套盖住针头，只留出两毫米的针尖突出，以防止深入插入。接下来，触诊颧弓以定位颞下颌关节或 TMJ 注射部位。然后将针头插入注射部位，该部位位于颧弓后端下方。

将 10 微升 CFA 缓慢注入 TMJ 胶囊中，等待至少 5 秒，然后逐渐拔针。首先，通过关节内注射 CFA 建立炎症性 TMJ 疼痛小鼠模型。一旦鼠标完全恢复，在测试前将约束管放在行为室的小鼠笼中至少一小时，以使鼠标适应测试环境。

然后打开兼容的软件进行强制测量，打开 N-B-I-T-R-S-D-V 2.6 0.3 程序。现在选择适当的通信选项。选择有人值守模式 UDP，然后选择正确的本地 IP 并通过单击搜索来搜索设备 IP 和端口。

显示目标 IP 和目标端口后，单击 open（打开）。通过单击 Y 范围内的 10 设置 Y 轴，然后单击设置。最后，点击 Acquisition。

接下来，仅为蓝色图表选择通道 1，并关闭未连接到设备的其他通道。点击 play 开始记录咬合力。现在将鼠标放入 50 毫升塑料管中，该塑料管经过修改以松散地约束鼠标，并将咬板移向小鼠的嘴巴。

记录每次自主咬合两分钟。然后单击暂停停止录制并单击保存。现在将 Excel 文件第二列中的数据从最大值到最小值进行排名，选择咬合力振幅的前五个值进行进一步分析。

从程序中记录通道 1 的值，并将其减去或添加到咬合力幅值的前五个值中。要从该测定中获得咬合力的相对值，取这五个值的平均值来确定一只小鼠的平均相对咬合力。与 PBS 组相比，CFA 处理的小鼠在注射后第 1 天表现出相对咬合力的显着降低，随着时间的推移逐渐恢复，CFA 处理的小鼠在第 1 天咬合力变化百分比显着降低，并在第 12 天有恢复的趋势。

首先，将金属丝网笼放入小鼠笼中，并在测试程序前让小鼠在行为室中适应至少一小时。然后打开电子 von Fray 测试机。要测量头部退出阈值，请按 maximum 并将单位设置为 500 克，这是机器设置的任意单位。

将该值设置为零可立即开始录制。将鼠标放入金属丝网笼中。将 von Fray 细丝垂直于颞下颌关节区域。

记录从细丝施加的力值或触发反应的刺激强度（以克为单位），作为第一个测试。然后将屏幕上的 force 值设置为零并等待 10 秒钟，同时鼠标保持在笼内。再次开始应用细丝并记录值 CFA 处理的小鼠在第一天的头部退出阈值与基线相比显着降低，然后部分恢复。

随着时间的推移，CFA 处理小鼠在第 1 天头部退出阈值的百分比变化显着降低，并在第 12 天观察到改善。