Induktion und Phänotypisierung der akuten Rechtsherzinsuffizienz in einem Großtiermodell der chronischen thromboembolischen pulmonalen Hypertonie

Zusammenfassung

Wir stellen ein Protokoll vor, um eine akute Rechtsherzinsuffizienz in einem großen Tiermodell mit chronischer pulmonaler Hypertonie zu induzieren und zu phänotypisieren. Dieses Modell kann verwendet werden, um therapeutische Interventionen zu testen, Rechtsherzmetriken zu entwickeln oder das Verständnis der Pathophysiologie der akuten Rechtsherzinsuffizienz zu verbessern.

Zusammenfassung

Die Entwicklung einer akuten Rechtsherzinsuffizienz (ARHF) im Zusammenhang mit chronischer pulmonaler Hypertonie (PH) ist mit schlechten kurzfristigen Ergebnissen verbunden. Die morphologische und funktionelle Phänotypisierung des rechten Ventrikels ist im Rahmen der hämodynamischen Kompromittierung bei Patienten mit ARHF von besonderer Bedeutung. Hier beschreiben wir eine Methode zur Induktion von ARHF in einem zuvor beschriebenen Großtiermodell des chronischen PH und zum Phänotyp der rechtsventrikulären Funktion unter Verwendung der Goldstandardmethode (dh Druckvolumen-PV-Schleifen) und mit einer nicht-invasiven klinisch verfügbaren Methode (dh Echokardiographie). Chronischer pH-Wert wird bei Schweinen zunächst durch die Ligatur der linken Lungenarterie und die Embolie des rechten Unterlappens mit biologischem Klebstoff einmal wöchentlich für 5 Wochen induziert. Nach 16 Wochen wird ARHF durch sukzessive Volumenbelastung mit Kochsalzlösung induziert, gefolgt von einer iterativen Lungenembolie, bis das Verhältnis des systolischen Lungendrucks zum systemischen Druck 0,9 erreicht oder bis der systolische systemische Druck unter 90 mmHg sinkt. Die Hämodynamik wird mit der Dobutamininfusion (von 2,5 μg/kg/min bis 7,5 μg/kg/min) wiederhergestellt. PV-Schleifen und Echokardiographie werden während jeder Bedingung durchgeführt. Jede Bedingung benötigt etwa 40 Minuten für Induktion, hämodynamische Stabilisierung und Datenerfassung. Von 9 Tieren starben 2 unmittelbar nach einer Lungenembolie und 7 absolvierten das Protokoll, das die Lernkurve des Modells veranschaulicht. Das Modell induzierte einen 3-fachen Anstieg des mittleren Lungenarteriendrucks. Die PV-Loop-Analyse zeigte, dass die ventrikulo-arterielle Kopplung nach Volumenbelastung erhalten blieb, nach akuter Lungenembolie abnahm und mit Dobutamin wiederhergestellt wurde. Echokardiographische Aufnahmen ermöglichten es, rechtsventrikuläre Parameter der Morphologie und Funktion mit guter Qualität zu quantifizieren. Wir identifizierten rechtsventrikuläre ischämische Läsionen im Modell. Das Modell kann verwendet werden, um verschiedene Behandlungen zu vergleichen oder nicht-invasive Parameter der rechtsventrikulären Morphologie und Funktion im Kontext von ARHF zu validieren.

Einleitung

Akute Rechtsherzinsuffizienz (ARHF) wurde kürzlich als ein schnell fortschreitendes Syndrom mit systemischer Stauung definiert, das sich aus einer gestörten rechtsventrikulären (RV) Füllung und / oder einer verminderten RV-Flussleistung ^ergibt1. ARHF kann bei verschiedenen Erkrankungen wie linksseitiger Herzinsuffizienz, akuter Lungenembolie, akutem Myokardinfarkt oder pulmonaler Hypertonie (PH) auftreten. Im Falle von PH ist der Beginn der ARHF mit einem 40%igen Risiko für eine kurzfristige Mortalität oder eine dringende Lungentransplantation ^{verbunden2,3,4}. Hier beschreiben wir, wie man ein großes Tiermodell von ARHF im Setting der chronischen pulmonalen Hypertonie erstellt und wie man den rechten Ventrikel mittels Echokardiographie und Druck-Volumen-Schleifen bewertet.

Zu den pathophysiologischen Merkmalen von ARHF gehören RV-Drucküberlastung, Volumenüberlastung, eine Abnahme der RV-Leistung, eine Erhöhung des zentralvenösen Drucks und / oder eine Abnahme des systemischen Drucks. Bei chronischer PH kommt es zu einer anfänglichen Zunahme der RV-Kontraktilität, die es ermöglicht, das Herzzeitvolumen trotz der Zunahme des pulmonalen Gefäßwiderstands zu erhalten. Daher kann der rechte Ventrikel im Rahmen von ARHF bei chronischem PH nahezu isosystemische Drücke erzeugen, insbesondere unter inotroper Unterstützung. Zusammengenommen führen ARHF bei chronischem PH und hämodynamische Wiederherstellung mit Inotropen zur Entwicklung akuter RV-ischämischer Läsionen, wie kürzlich in unserem Großtiermodell5 beschrieben. Der Anstieg der Inotrope erzeugt einen erhöhten energetischen Bedarf, der ischämische Läsionen weiter entwickeln und schließlich zur Entwicklung von Endorganfunktionsstörungen und schlechten klinischen Ergebnissen führen kann. Es gibt jedoch keinen Konsens darüber, wie Patienten mit ARHF auf PH behandelt werden sollen, hauptsächlich in Bezug auf Flüssigkeitsmanagement, Inotrope und die Rolle der extrakorporalen Kreislaufunterstützung. Folglich kann ein großes Tiermodell für akute Rechtsherzinsuffizienz dazu beitragen, präklinische Daten zum klinischen Management von ARHF bereitzustellen.

Als ersten Schritt zur Quantifizierung des Ansprechens auf die Therapie werden einfache und reproduzierbare Methoden zum Phänotyp des rechten Ventrikels benötigt. Bis heute gibt es keinen Konsens darüber, wie die Morphologie und Funktion von Patienten mit ARHF besser phänotypisiert werden kann. Die Goldstandardmethode zur Bewertung der RV-Kontraktilität (d.h. der intrinsischen Kontraktionsfähigkeit) und der ventrikulo-arteriellen Kopplung (d.h. der durch ventrikuläre Nachlast normalisierte Kontraktilität; ein Index der ventrikulären Anpassung) ist die Analyse von Druck-Volumen-Schleifen (PV). Diese Methode ist zweimal invasiv, da sie eine Katheterisierung des rechten Herzens und eine vorübergehende Verringerung der RV-Vorbelastung mit einem Ballon erfordert, der in die untere Hohlvene eingeführt wird. In der klinischen Praxis werden nicht-invasive und wiederholbare Methoden zur Beurteilung des rechten Ventrikels benötigt. Die kardiale Magnetresonanz (CMR) gilt als Goldstandard für die nicht-invasive Beurteilung des rechten Ventrikels. Bei Patienten mit ARHF unter chronischer PH, die auf der Intensivstation (ICU) behandelt werden, kann die Anwendung von CMR aufgrund des instabilen hämodynamischen Zustands des Patienten eingeschränkt sein; Darüber hinaus können wiederholte CMR-Auswertungen mehrmals täglich, auch nachts, aufgrund ihrer Kosten und begrenzten Verfügbarkeit eingeschränkt sein. Umgekehrt ermöglicht die Echokardiographie nicht-invasive, reproduzierbare und kostengünstige RV-Morphologie und Funktionsbewertungen bei Intensivpatienten.

Großtiermodelle sind ideal, um präklinische Studien durchzuführen, die sich auf die Beziehung zwischen invasiven hämodynamischen Parametern und nicht-invasiven Parametern konzentrieren. Die Anatomie des großen weißen Schweins ist dem Menschen nahe. Folglich sind die meisten der beim Menschen beschriebenen echokardiographischen Parameter bei Schweinen quantifizierbar. Zwischen Menschlichem und Schweineherz bestehen einige geringfügige Unterschiede, die bei echokardiographischen Studien berücksichtigt werden müssen. Schweine zeigen eine konstitutionelle Dextrokardie und eine leicht gegen den Uhrzeigersinn gerichtete Rotation der Herzachse. Dadurch wird die apikale 4-Kammer-Ansicht zu einer apikalen 5-Kammer-Ansicht und das Akustikfenster befindet sich unterhalb des Xiphoid-Blinddarms. Darüber hinaus befinden sich auf der rechten Seite des Brustbeins parasternale Achsansichten mit langen und kurzen Achsen.

Hier beschreiben wir eine neuartige Methode, um ARHF in einem großen Tiermodell des chronisch thromboembolischen PH zu induzieren und die Hämodynamik unter Verwendung von Dobutamin wiederherzustellen. Wir berichten auch über RV-ischämische Läsionen, die im Modell innerhalb von 2-3 Stunden nach hämodynamischer Wiederherstellung mit Dobutamin vorhanden sind. Darüber hinaus beschreiben wir, wie RV-PV-Schleifen und echokardiographische RV-Parameter bei jeder Bedingung erfasst werden können, um Einblicke in die dynamischen Veränderungen in der Morphologie und Funktion von RV zu erhalten. Da zuvor das Großtiermodell des chronisch thromboembolischen PH und die PV-Loop-Methoden beschrieben ^wurden6, werden diese Abschnitte kurz beschrieben. Außerdem berichteten wir über Ergebnisse von echokardiographischen Auswertungen, die in Schweinemodellen als potenziell schwierig angesehen werden. Wir werden die Methoden erklären, um eine wiederholte Echokardiographie im Modell zu erreichen.

Das in dieser Studie berichtete Modell von ARHF zur chronischen PH kann verwendet werden, um verschiedene therapeutische Strategien zu vergleichen. Die Methoden der RV-Phänotypisierung können in anderen großen Tiermodellen verwendet werden, die klinisch relevante Situationen wie akute Lungenembolie7, RV-Myokardinfarkt8, akutes Atemnotsyndrom9 oder Rechtsherzinsuffizienz im Zusammenhang mit linksventrikulärem ^Versagen10 oder linksventrikulärer mechanischer ^{Kreislaufunterstützung11 nachahmen}.

Protokoll

Die Studie entsprach den Grundsätzen der Labortierpflege gemäß der National Society for Medical Research und wurde vom lokalen Ethikkomitee für Tierversuche im Hospital Marie Lannelongue genehmigt.

1. Chronische thromboembolische PH

1. Induzieren Sie chronische thromboembolische PH wie zuvor ^{beschrieben6,12}.
2. Kurz gesagt, induzieren Sie ein Modell der chronischen thromboembolischen pH-Werte bei etwa 20 kg großen weißen Schweinen (sus scrofa). Führen Sie eine Ligatur der ligatur der linken Lungenarterie durch eine linke Thorakotomie in Woche 0 durch (geschlossenes Perikard); und wöchentlich eine Embolisation der rechten Lungenarterie des unteren Lappens (0,2 ml bis 0,4 ml pro Woche) mit einer Mischlösung durchführen, die aus 1 ml Weichteilkleber einschließlich N-Butyl-2-cyanoacrylat und 2 ml Lipidkontrastfarbstoff (Lipiodol) für 5 Wochen besteht.
3. Führen Sie eine Xyphoïdeektomie in Woche 0 zum Zeitpunkt der Ligatur der linken Lungenarterie durch, um die Durchführbarkeit der Echokardiographie zu verbessern. Führen Sie dazu einen 4 cm langen Längsschnitt vor dem Xiphoid-Prozess durch. Entfernen Sie den Xyphoid-Prozess mit einem Diathermiemesser. Schließen Sie den subkutanen Plan und die Haut mit einer laufenden Naht.
4. Führen Sie in Woche 10 eine zusätzliche Lungenembolie im rechten Unterlappen durch, indem Sie das gleiche Protokoll verwenden, das oben beschrieben wurde (Schritt 1.2).
5. Führen Sie das ARHF-Induktionsmodell (Abschnitt 6) 6 Wochen nach der letzten rechten unteren Lappenembolisation (Woche 16) durch, um akute Rechtsherzläsionen zu vermeiden, die durch akute Lungenembolien induziert werden.
   HINWEIS: Ein anderes großes Tiermodell der Rechtsherzinsuffizienz kann verwendet werden, oder andere pathologische Zustände können im chronisch-thromboembolischen PH-Modell induziert werden.

2. Tierhaltung und Katheterplatzierung

1. Führen Sie eine Vollnarkose wie zuvor beschrieben ^durch6.
   1. Lassen Sie das Tier kurz 12 h fasten. Führen Sie dann eine intramuskuläre Injektion von Ketaminhydrochlorid (30 mg/kg) zur Prämedikation durch. Führen Sie einen intravenösen Bolus von Fentanyl (0,005 mg/kg), Propofol (2 mg/kg) und Cisatracurium (0,3 mg/kg) intravenös durch eine Ohrvene durch und intubieren Sie das Schwein nicht selektiv mit einer 7 französischen Sonde.
   2. Aufrechterhaltung der Vollnarkose mit inhalativem 2% Isofluran, kontinuierliche Infusion von Fentanyl (0,004 mg/kg) und Propofol (3 mg/kg).
2. Positionieren Sie das Schwein nach der Einleitung der Vollnarkose mit den Vorderbeinen auf dem Rücken in einer leicht gespreizten Position, um eine parasternale echokardiographische Erfassung zu ermöglichen (Abschnitt 3).
3. Platzieren Sie die Geräteelektroden vor dem Einsetzen der sterilen Felder an Armen und Beinen (Echokardiograph, Workstation für hämodynamische Aufnahmen).
4. Legen Sie nach der Seldinger ^Methode13 eine 8-französische Scheide in die Vena jugularis.
   1. Führen Sie einen 18 G (1,3 mm x 48 mm) IV-Katheter in die Jugularvene ein.
      1. Führen Sie eine perkutane Punktion an der Mittellinie 2 cm über dem Manubrium mit einer 45°-Ausrichtung durch.
      2. Nachdem Sie einen venösen Reflux erhalten haben, führen Sie einen Führungsdraht in den Katheter ein (0,035 Zoll / 0,089 mm, 180 cm, abgewinkelt).
      3. Überprüfen Sie die korrekte Platzierung des Führungsdrahtes in der oberen Hohlvene mit Durchleuchtung und entsorgen Sie die 8-französische Scheide auf dem Führungsdraht in die obere Hohlvene.
         HINWEIS: Der Führungsdraht wird richtig platziert, wenn er entlang des rechten Randes der Wirbelsäule durch die untere Hohlvene verläuft.
5. Führen Sie eine Teilung der rechten Femurgefäße durch, um einen flüssigkeitsgefüllten Katheter in die rechte Oberschenkelarterie zur kontinuierlichen systemischen Drucküberwachung einzuführen, und einen Ballondilatationskatheter in die vena cava inferior durch die Oberschenkelvene wie folgt.
   1. Führen Sie einen 4 cm langen Querschnitt an der Leistengegend durch.
   2. Legen Sie einen Beckman-Retraktor auf und teilen Sie die vordere Seite der Oberschenkelvene und der Oberschenkelarterie mit einer Debackey-Pinzette und einer Metzenbaum-Schere.
   3. Legen Sie einen 20 G-Katheter unter direkter visueller Kontrolle in die Oberschenkelarterie und verbinden Sie ihn mit einem mit Flüssigkeit gefüllten Katheter an einen Einwegwandler, um eine kontinuierliche systemische Blutdrucküberwachung zu erhalten.
      HINWEIS: Der mittlere Blutdruck sollte kontinuierlich über 60 mmHg liegen.
   4. Verwenden Sie einen 18 G Katheter, um einen Führungsdraht (0,035 Zoll / 0,089 mm, 180 cm, abgewinkelt) durch die untere Hohlvene in die Oberschenkelvene unter fluoroskopischer Kontrolle einzuführen.
   5. Führen Sie einen Ballondilatationskatheter auf dem Führungsdraht durch die untere Hohlvene auf intraperikarder Ebene unter fluoroskopischer Kontrolle ein.
6. Führen Sie die fluoroskopische Kontrolle mit einem C-Bogen unter Verwendung einer anteroposterioren Ansicht durch. Platzieren Sie die sichtbaren Markierungen des Ballons unmittelbar über dem Zwerchfellniveau unter fluoroskopischer Kontrolle. Entfernen Sie den Führungsdraht, wenn der Ballon platziert wird.
7. Nähen Sie eine Handtasche mit einer 5.0 Polypropylen-Monofilamentnaht um den venösen Dilatationsballonkatheter, um Blutungen aus der Oberschenkelvene zu vermeiden.

3. Echokardiographie

1. Führen Sie die Echokardiographie direkt nach der Tierpositionierung und der Katheterplatzierung (Abschnitt 2) bei Tieren durch, die noch unter Vollnarkose und mechanischer Beatmung stehen.
2. Erfassen Sie jede echokardiographische Ansicht im Cine-Loop-Format für mindestens 3 Herzzyklen während der endexspiratorischen Apnoe.
3. Erfassen Sie alle Ansichten in den Modi 2-Dimension und Tissue Doppler.
4. Erwerben Sie die apikale 5-Kammer-Ansicht unter dem Xiphoid-Prozess.
5. Erfassen Sie die parasternalen Kurz- und Langachsenansichten auf der rechten Seite des Brustbeins.
6. Erfassen Sie die Valvularströmung mit kontinuierlichen und gepulsten Dopplermodi.
7. Erfassen Sie Gewebe-Doppler-Signale des lateralen Trikuspidalannulus und des lateralen und septalen Mitralannulus.
   HINWEIS: Verwenden Sie die neuesten Richtlinien für die echokardiographische Beurteilung beim Menschen für echokardiographische Erfassungen und ^{Interpretationen14}.

4. Katheterisierung des rechten Herzens

1. Durchführung der Rechtsherzkatheteruntersuchung nach dem Herzecho (Abschnitt 3) und vor der Druck-Volumen-Schleifenerfassung (Abschnitt 5)
2. Verbinden Sie den Swan-Ganz-Katheter mit dem Einwegwandler.
3. Führen Sie den Swan-Ganz-Katheter in die juguläre 8-French-Hülle ein, die zuvor in die Jugularvene eingeführt wurde (Abschnitt 2.4), und erwerben Sie den mittleren rechten Vorhof-, rechtsventrikulären und pulmonalen Arteriendruck. Legen Sie den Katheter bei Bedarf unter Fluoroskopie.
   HINWEIS: Überprüfen Sie, ob flüssigkeitsgefüllte Katheter gut mit Kochsalzlösung gereinigt sind, und entfernen Sie Luftblasen, um eine Drucksignaldämpfung zu vermeiden.
4. Nachdem Sie den Swan-Ganz-Katheter in die Lungenarterie gelegt haben, messen Sie das Herzzeitvolumen mit der Thermodilutionsmethode, wie in den Anweisungen des Herstellers erläutert; Messen Sie gleichzeitig die Herzfrequenz für die Berechnung des Schlagvolumens.
   1. Stellen Sie sicher, dass die Kochsalzlösung bei 4 °C liegt, um eine Überschätzung des Herzzeitvolumens zu vermeiden.
   2. Schließen Sie den Einwegwandler an die PV-Loop-Arbeitsstation an, um die Drücke von flüssigkeitsgefüllten Kathetern live zu erfassen.

5. Erfassung des Druckvolumenkreislaufs mit der Leitfähigkeitsmethode

HINWEIS: Dieser Abschnitt wurde bereits ^{veröffentlicht15}.

1. Führen Sie den Leitfähigkeitskatheter unter fluoroskopischer Kontrolle in den rechten Ventrikel ein.
   1. Überprüfen Sie das Qualitätssignal mithilfe der " live"-Erfassung von Druck-Volumen-Schleifen.
2. Aktivieren Sie geeignete Elektroden, um ein optimales Signal zu erhalten (d. H. PV-Schleifen gegen den Uhrzeigersinn mit physiologischer Form).
3. Verfolgen Sie die Druck- und Volumenkalibrierungsschritte des Workflows gemäß den Anweisungen des Herstellers (Blutleitfähigkeit, Parallelvolumen, Hubvolumenkalibrierung = Alpha-Kalibrierung).
   HINWEIS: Schlaganfall extern mit dem Swan-Ganz-Katheter kann für jede Bedingung wiederholt werden; während die anderen Kalibrierschritte nur einmal durchgeführt werden können.
4. Erwerben Sie PV-Loop-Familien in stationären Zuständen und während der akuten Vorlastreduktion (d. H. Akute Okklusion der unteren Hohlvene) während der endexspiratorischen Apnoe.
5. Führen Sie mindestens 3 Akquisitionen pro Bedingung durch (stetige + IVC-Okklusion).

6. Induktion der akuten Rechtsherzinsuffizienz durch Volumen- und Drucküberlastung (Abbildung 1).

1. Induzieren Sie eine Volumenüberlastung mit einer 3-stufigen Kochsalzinfusion (ca. 2 h).
   1. Beginnen Sie die erste Infusion von 15 ml/kg Kochsalzlösung mit einem frei fließenden Infusionsausgang.
   2. Führen Sie die Messungen (Rechter Herzkatheterismus, PV-Schleifen und echokardiographische) 5 min nach der hämodynamischen Stabilisierung nach dem Ende jeder Infusion durch.
   3. Beginnen Sie unmittelbar nach Dem Ende der Messungen mit der zweiten Volumeninfusion von 15 ml/kg.
   4. Beginnen Sie unmittelbar nach Dem Ende der Messungen mit der dritten Volumeninfusion von 30 ml/kg Kochsalzlösung.
      VORSICHT: Die Volumenbelastung kann je nach verwendetem Tiermodell zu einer hämodynamischen Kompromittierung oder einem Lungenödem führen. In diesem Modell zeigte die Volumenbelastung eine adaptive Reaktion, die durch eine Erhöhung des Herzzeitvolumens, einen stabilen rechten Vorhofdruck und eine erhaltene ventrikulo-arterielle Kopplung gekennzeichnet ist.
      HINWEIS: Die Volumenbelastung kann bei schlechter respiratorischer oder hämodynamischer Toleranz gestoppt werden.
2. Induzieren Sie eine Drucküberlastung mit iterativer Lungenembolie.
   1. Führen Sie einen 5 französischen angiographischen Katheter durch die Jugularscheide unter fluoroskopischer Kontrolle in die rechte Lungenarterie des Unterlappens ein.
   2. Embolisieren Sie die rechte Lungenarterie des unteren Lappens mit einem Bolus von 0,15 ml einer gemischten Lösung, die aus 1 ml Weichteilkleber einschließlich N-Butyl-2-Cyanacrylat und 2 ml lipidischem Kontrastfarbstoff besteht. Waschen Sie den Katheter mit 10 ml Kochsalzlösung aus.
   3. Bewerten Sie das hämodynamische Ansprechen 2 Minuten nach der Embolisation unter Verwendung des systemischen Drucks und des Lungenarteriendrucks.
   4. Wiederholen Sie Embolien von 0,15 ml alle 2 Minuten, bis ein hämodynamischer Kompromiss erreicht ist (d. h. systolischer Systemdruck <90 mmHg oder systolischer Lungendruck über dem systolischen systemischen Druckverhältnis >0,9).
      VORSICHT: Eine Lungenembolie kann zu schweren hämodynamischen Beeinträchtigungen führen, die manchmal irreversibel sind und zum sofortigen Tod führen. Bevor Sie mit dem Embolisationsschritt beginnen, seien Sie bereit, mit der hämodynamischen Unterstützung zu beginnen (Dobutamin-Protokoll oder Adrenalin im Falle eines Kreislaufstillstands). Seien Sie bereit, PV-Schleifen und echokardiographische Überwachung zu starten. Da dieser Schritt mit einer schweren hämodynamischen Beeinträchtigung verbunden sein kann, kann eine Rechtsherzkatheterisierung mit dem Swan-Ganz-Katheter vermieden werden, um früher mit der Dobutaminunterstützung zu beginnen.

7. Induzieren Sie die Wiederherstellung der systemischen Hämodynamik mit Dobutamin

1. Nachdem Sie einen hämodynamischen Kompromiss erreicht und PV-Schleifen und echokardiographische Akquisitionen durchgeführt haben, beginnen Sie mit der Dobutamininfusion bei 2,5 μg/kg/min.
   HINWEIS: Andere Medikamente oder Behandlungen können zu diesem Zeitpunkt begonnen werden.
2. Warten Sie 10 bis 15 Minuten auf die hämodynamische Stabilisierung.
3. Führen Sie Rechtsherzkatheterisierungen, PV-Schleifen und echokardiographische Aufnahmen durch.
4. Erhöhen Sie die Dosis der Dobutamin-Infusion auf 5 μg/kg/min.
5. Warten Sie 15 Minuten auf die hämodynamische Stabilisierung und wiederholte Akquisitionen.
6. Wiederholen Sie die Katheterisierung des rechten Herzens, PV-Schleifen und echokardiographische Aufnahmen.
7. Erhöhen Sie die Dosis der Dobutamin-Infusion auf 7,5 μg/kg/min.
   HINWEIS: Andere Dosen, Medikamente oder Behandlungen können eingeleitet werden.

8. Euthanasie und Herzgewebeentnahme

1. Führen Sie am Ende des Protokolls eine mittlere Sternotomie mit einer oszillierenden Säge durch.
2. Öffnen Sie das Perikard und injizieren Sie eine tödliche Kaliumchloridlösung (0,2 g/kg).
3. Ernte das Herz; Proben der rechten und linken ventrikulären Freiwand für pathologische und molekulare Auswertungen auswählen.
   ANMERKUNG: Die Methoden für die pathologischen Beurteilungen des rechten Ventrikels und für die Statistik wurden zuvor ^berichtet5.

Ergebnisse

Machbarkeit
Wir beschreiben die Ergebnisse von 9 aufeinanderfolgenden Verfahren der ARHF-Induktion in einem zuvor berichteten CTEPH-Modell für ^Großtiere5. Die Dauer des Protokolls betrug etwa 6 Stunden, einschließlich Anästhesieinduktion, Installation, Gefäßzugang / Katheterplatzierungen, Induktion von Volumen- / Drucküberlastung und hämodynamischer Wiederherstellung, Datenerfassung und Euthanasie. Jede hämodynamische Erkrankung benöti...

Diskussion

Wir beschreiben eine Methode, um wichtige pathophysiologische Merkmale von ARHF an chronischem PH in einem großen Tiermodell zu modellieren, einschließlich Volumen- und Drucküberlastung und hämodynamischer Wiederherstellung mit Dobutamin. Wir berichteten auch, wie man hämodynamische und bildgebende Daten erfasst, um die dynamischen Veränderungen des rechten Ventrikels bei jedem während des Protokolls erzeugten Zustand zu phänotypisieren. Diese Methoden können Hintergrunddaten liefern, um zukünftige Forschungspr...

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Radiofocus Introducer II	Terumo	RS+B80K10MQ	catheter sheath
Equalizer, Occlusion Ballon Catheter	Boston Scientific	M001171080	ballon for inferior vena cava occlusion
Guidewire	Terumo	GR3506	0.035; angled
Vigilance monitor	Edwards	VGS2V	Swan-Ganz associated monitor
Swan-Ganz	Edwards	131F7	Swan-Ganz catheter 7 F; usable lenghth 110 cm
Echocardiograph; Model: Vivid 9	General Electrics	GAD000810 and H45561FG	Echocardiograph
Probe for echo, M5S-D	General Electrics	M5S-D	Cardiac ultrasound transducer
MPVS-ultra Foundation system	Millar	PL3516B49	Pressure-volume loop unit; includes a powerLab16/35, MPVS-Ultra PV Unit, bioamp and bridge amp and cables
Ventricath 507	Millar	VENTRI-CATH-507	conductance catheter
Lipiodol ultra-fluid	Guerbet	306 216-0	lipidic contrast dye
BD Insyte Autoguard	Becton, Dickinson and Company	381847	IV catheter
Arcadic Varic	Siemens	A91SC-21000-1T-1-7700	C-arm
Prolene 5.0	Ethicon	F1830	polypropilene monofil