(1) intradermale Verabreichung

1. Die intradermale Injektionen sind wässrige-basierte Verbindungen. Die Lösungen müssen physiologisch gepuffert werden, um einen neutralen pH-Wert haben zur Vermeidung von Gewebsnekrosen an der Injektionsstelle.
2. Die Nadel-Größenbereich ist 25-30 gauge, die kleinstmögliche.
3. Der Dosisbereich Pro Injektionsstelle ist 50-100 µL. Gatterschalters übermäßige Mengen Nekrosen an der Injektionsstelle oder Leckage der Verbindung von der Seite wegen des Drucks führen können.
4. Für die genaue Platzierung der Nadel in die intradermale Raum ist es notwendig, um Mäuse und Ratten zu betäuben. Inhalation Anästhesie ermöglicht eine schnelle Einarbeitung und Erholung; injizierbare Anästhesie hat jedoch den Vorteil der Bereitstellung von ausreichend Zeit für die Vorbereitung des Bereichs und Durchführung der Injektion. ¹
5. Entfernen Sie die Haare an der Einstichstelle durch den Einsatz einer Enthaarungscreme oder durch das Rasieren der Gegend.
6. Entfernen Sie restliche Enthaarungscreme und Haar Schmutz gründlich.
7. Ein aktuelles Antiseptikum, z. B. eine Jodlösung, Chlorhexidin-Lösung oder Alkohol anwenden.
8. Verwaltungsverfahren
   1. Spannen Sie die Haut straff zwischen Daumen und Zeigefinger. Dies sorgt für Stabilität auf die Haut bei der Positionierung der Nadelöhrs.
   2. Legen Sie die Nadel Fase oben auf der Haut.
   3. Sanft legen Sie die Nadel in die Haut zwischen der Epidermis und der Dermis. Die Nadel direkt hinter die abgeflachte Kante voraus.
   4. Die Substanz langsam zu injizieren. Injektion der Verbindung schafft eine Blase oder kleine Blase, in der Haut.
   5. Pause nach der Injektion, lassen Sie die Haut zu dehnen und anpassen, bevor die Nadel zurückziehen.
9. Vorsichtsmaßnahmen
   1. Es ist nicht notwendig, den Kolben zurückziehen.
   2. Wenn die Nadel in den subkutanen Raum eingesetzt wird, ist keine Blase gebildet. Injektion zu tief führt eine subkutane Injektion.
   3. Vermeiden Sie beflecken oder Abwischen der Gegend, wie, dass die Verbindung zum Austreten aus der Injektionsstelle verursachen können.
   4. Wenn Sie mehrere Injektionen durchführen, Raum sie so, dass die Blebs nicht überschneiden.

Abbildung 1. Intradermale Injektion bei Mäusen.

(2) intranasale Verabreichung

1. Ausrüstung
   1. Verwenden Sie eine Micropipetting-Einheit-Pipette kalibriert werden kann, um eine genaue Volumen liefern.
   2. Einweg-Pipettenspitzen sollte verwendet werden, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden. TB-Spritzen, stumpfe Nadeln und Schläuche können auch für die Dosierung verwendet werden.
   3. Insgesamt Injektionsvolumina für Ratten sollte nicht mehr als 40-100 µL und sollte in 6 bis 10 µL Tropfen gegeben werden. Bei Mäusen ist die maximale Gesamtmenge 24 µL, in 3 bis 4 µL Tropfen gegeben.
2. Verwaltung in bewusste Tiere
   1. Manuelle Zurückhaltung bei bewussten Tieren erfordert, dass der Kopf relativ unbeweglich, so dass die Pipettenspitze oder stumpfen Nadel nahe genug, um die Nasenlöcher, die Verbindung zu liefern platziert werden kann, aber nicht so nah, poke oder zerreißt das Nasengewebe.
   2. Zurückhalten Sie des Tieres und halten Sie ihn in eine vertikale Position.
   3. Legen Sie einen kleinen Tropfen einer Flüssigkeit bei der nasalen Eröffnung zusammengesetzte. Das Tier sollte das Tröpfchen einatmen.
   4. Verwalten Sie ein zusätzliches Volumen, Nasenlöcher abwechselnd, bis das gesamte Volumen gegeben hat.
   5. Wenn größere Mengen zu verwalten, ist es wichtig, nicht die Brust während Zurückhaltung verengen. Brust-Kompression behindert die Fähigkeit des Tieres, ausreichend tiefe Atemzüge, die Flüssigkeit in die Bronchien und Lungen zu ziehen.

Abbildung 2. Intranasale Verabreichung in bewusste Mäuse.

3. Verwaltung im Unbewussten Tiere
   1. Inhalation Anästhetika ermöglicht ein immobilisierten Tier während der Ansatz und die Lieferung der Verbindung. Dies verhindert, dass das Tier beißen die Dosierausrüstung, den Verlust der Verbindung durch Rucken des Kopfes und der Verletzung von Nasengewebe, Augen oder Haut des Tieres. Das Tier ist auch weniger wahrscheinlich, snort und sprühen Sie die Verbindung aus den Nasenlöchern auf Verwaltung.
   2. Legen Sie das Tier in die Rückenlage. Die Position des Kopfes hat Einfluss auf die Platzierung der Lösung in die Nasenlöcher. Es hat sich gezeigt, dass die ideale Position für die CNS Lieferung mit dem Tier Rückenlage; Dies ermöglicht eine bessere Absorption. ²
   3. Verwalten Sie die Hälfte der Verbindung direkt in eine Seite der nasalen Öffnung, mit Inhalation timing. Schalten Sie das Tier über.
   4. Wie oben beschrieben, Verwalten der anderen Hälfte des Volumens in die nasale Öffnung.

Abbildung 3. Intranasale Verabreichung im Unbewussten Mäuse.

3.Intrakranielle Verabreichung bei neugeborenen Mäusen und Ratten

1. Mäuse oder Ratten müssen für intrakranielle Injektionen betäubt.

Tabelle 1. Nadelstärke, Nadel Länge und maximaler Lautstärke der intrakraniellen Verwaltung gemäß Alter von Mäusen und Ratten. ⁴

2. Ausrüstung
   1. Bestimmen der richtigen Nadelstärke und maximale Lautstärke der Verwaltung gemäß Tabelle 1.
   2. Bereiten Sie einen Nadelschutz vor das Tier zu betäuben.
      Hinweis: Die Injektion Tiefe der Nadel wird durch den Einsatz einer Wache gesteuert, die mit die Nadelschutzkappe erstellt wird.
      1. Um die Wache zu erstellen, wird eine Nadel gegen die Nadelschutzkappe gemessen, und eine Marke befindet sich auf der Kappe um anzugeben, wo zu schneiden. Der Schnitt sollte erfolgen, so dass 2 bis 5 mm der Nadel werden ausgesetzt, wenn die Kappe auf den Nadel ersetzt wird.
      2. Die Länge der freiliegenden Nadel muss lang genug sein, dringen in die Haut und Schädel, und die gewünschte Tiefe in das Gehirn zu erreichen.
      3. Die Nadellängen benötigt für Mäuse und Ratten sind in Tabelle 1aufgeführt.
   3. Eine Wärmequelle ist erforderlich, um Unterkühlung in die Welpen zu verhindern. Es gibt verschiedene Arten: ein elektrisches Heizkissen auf Low, eine zirkulierende Wasser Decke oder eine wiederverwendbare chemische Reaktion Wärme Beutel gesetzt.
3. Zurückhaltung
   1. Maus und Ratte Welpen benötigen 10 Tage alt oder jünger nicht Anästhesie für dieses Verfahren. Zügeln sie manuell durch sie nur hinter dem Kopf halten und ziehen die Haut kaudal, leichten Druck über die Schultern.
   2. Welpen mehr als 10 Tage alt mit Isofluran Inhalation zu betäuben. Legen Sie eine Induktion Kammer auf eine Präzision Vaporizer oder eine Glasglocke mit einem Wattebausch, getränkt mit Isofluran. Sobald der Welpe immobilisiert ist, wirkt die Narkose für ca. 40 Sekunden die bietet genügend Zeit für die Injektion.
4. Injektionstechnik
   1. Ziehen Sie den Stoff in die Spritze und halten Sie die Kappe/Nadel-Führung über die Nadel.
   2. Das Injektionsvolumen empfohlen, da das maximale Volumen pro Neugeborenen Maus oder Ratte 100 µL beträgt und das Absetzer oder ältere Mäuse für bis zu 300 µL ist.
   3. Stechen Sie in der Hirnrinde des Neugeborenen zu injizieren die Nadel 5 mm hinter dem Auge, ca. 3 mm von der Mittellinie des Schädels.
   4. Die Absetzer Maus Injektionsstelle ist etwa auf halbem Weg zwischen dem Auge und Ohr und direkt an der Mittellinie.

Abbildung 4. Intrakranielle Verwaltung in einem Maus-Welpen.