Überprüfen Sie nach Abschluss der primären Sterbehilfe den Verlust der Schmerzantwort durch Einklemmen des Fußes. Lege den Frosch auf den Rücken. Lege jedes Glied fest.
Schneiden Sie durch die Mittellinie der Haut und schneiden Sie dann seitlich, um zwei Hautlappen zu erhalten. Fassen Sie die Linea alba mit einer Pinzette und ziehen Sie sie von der Zölomhöhle weg. Durchtrennen Sie die Muskulatur.
Schneiden oder stecken Sie alle Laschen aus dem Weg. Schneiden Sie die Coracoideusknochen mit Hilfe einer Dissektionsschere durch und entfernen Sie überschüssiges Gewebe, um einen besseren Zugang zum Herzen zu erhalten. Als nächstes schieben Sie den Magen des präparierten Xenopus vorsichtig an die Spitze des linken Leberlappens.
Fassen Sie vorsichtig eine Lungenspitze mit einer Gewebezange und ziehen Sie sie aus der Zölomhöhle heraus, dann stecken Sie die Lunge durch die Spitze fest. Ziehen Sie den dünnen Herzbeutel mit einer Gewebezange fest. Perforieren Sie den Herzbeutel mit der Spitze einer Iridektomieschere vorsichtig, ohne das darunter liegende Gewebe zu durchtrennen.
Ziehen Sie den Herzbeutel von den Herzkammern ab. Fassen Sie die Ventrikelspitze vorsichtig mit einer Pinzette. Ohne die Herzkammer zu perforieren, führen Sie die Nadel durch den Verschluss der Pinzette in die Herzkammer ein.
Klemmen Sie die Gewebepinzette mit einem Nadelhalter oder Hämostaten fest. Starten Sie den Durchfluss der Pumpe bei etwa fünf Millilitern pro Minute. Dadurch werden die Herzkammern und der Truncus Arterien angeschwollen.
Benutze eine Schere, um eine Kerbe in die rechte Ohrmuschel zu machen. Setzen Sie den Pumpenfluss fort, bis die Magengefäße blanchiert sind. Lanze die linke Herzohrmuschel.
Erhöhen Sie die Fördermenge der Pumpe auf 10 Milliliter pro Minute. Spülen Sie mit einer Transferpipette die Zölomhöhle und das Perfusionsmedium. Wenn sich die Organe während des Spülens verschieben, verschieben Sie sie vorsichtig zurück, um die Sichtbarkeit von Magen und Lunge zu erhalten.
Um die Visualisierung des aus dem Herzen fließenden Perfusats zu erleichtern, können die Ohrmuscheln weiter reduziert werden. Lassen Sie die Nadel an Ort und Stelle, bis die Magengefäße und die Lunge blass geworden sind und das aus dem Herzen fließende Perfusat klar erscheint. Eine erfolgreiche Durchblutung wurde in allen Geweben mit Ausnahme der Leber beobachtet, wodurch sie deutlich leichter und weniger mit Blut gesättigt waren.
Dies ist am deutlichsten bei Albinos zu sehen.
