Halten Sie zunächst den Körper einer Ratte ruhig und strecken Sie ihr Hinterbein aus. Tupfen Sie die Injektionsstelle mit Alkohol ab. Führen Sie dann eine Ein-Milliliter-Spritze ein, die mit einer 26-Gauge-Nadel an der Basis der Hautfalte zwischen Daumen und Finger ausgestattet ist.
Ziehen Sie am Spritzenkolben, um die Nadel abzusaugen. Entfernen Sie die Nadel und positionieren Sie sie bei Bedarf neu. Injizieren Sie 0,5 Milliliter 0,9% Natriumchlorid mit oder ohne Scopolaminhydrobromid in einer einzigen gleichmäßigen Bewegung.
Um den Tränensekretionstest durchzuführen, schneiden Sie zuerst die Hälfte eines Filterpapierstreifens entlang der Mittellinie ab. Schneiden Sie den Kopf des Streifens ab, um ihn glatt zu machen. Legen Sie den Filterpapierstreifen auf das äußere Drittel des Bindehautsacks des unteren Augenlids der Ratte.
Klemmen Sie den Filterpapierstreifen nach fünf Minuten mit einer Pinzette in ein Mikrozentrifugenröhrchen. Platzieren Sie eine Markierung an der Wand des Rohrs, um das Tränenvolumen aufzuzeichnen. Um die Hornhaut des Rattenauges zu färben, tropfen Sie 0,5 Mikroliter 0,5% Fluorescein-Natriumlösung in den unteren Bindehautsack jedes Auges.
Beobachten Sie die Hornhaut nach drei Minuten unter blauem Licht. Nehmen Sie die bulbäre Bindehaut aus den Augen einer eingeschläferten Ratte. Entfernen Sie die Hornhaut von der rechten Seite jeder Ratte und fixieren Sie sie sofort in 4% Paraformaldehyd.
Schneiden Sie die cephale Epidermis aus dem Unterhautgewebe entlang der Linie heraus, die das Ohr und den äußeren Augenwinkel verbindet. Erweitern Sie dann den Schnitt zu beiden Seiten und isolieren Sie die gelbliche Extraorbitaldrüse. Als nächstes entfernen Sie das Fell der Ratte vollständig und trennen die zusätzliche Orbitaldrüse mit 0,9%iger Natriumchloridlösung.
Die Tränensekretion der Scopolamin-Gruppe war signifikant reduziert. Scopolamin verursachte keine Hornhautepitheldefekte, was durch das Fehlen einer Hornhautfärbung belegt wird. Das Hornhautepithel der Scopolamin-Gruppen war relativ dünner als das der Kontrollgruppe.
Die 7,5-Gruppe zeigte auch eine lose intrazelluläre Verbindung und vakuläre Struktur in der Basalschicht. Die Kontrollgruppen hatten signifikant dickere Hornhautepithele. Scopolamin schien entzündliche Veränderungen in den Tränendrüsen zu verursachen, was auf eine funktionelle Tränendrüsenschädigung hindeutet.
In den Gruppen 2.5 und fünf wurde eine reduzierte schleimige Substanz mit freier Lymphozyteninfiltration beobachtet. Zusätzlich zeigte Gruppe 7.5 eine unregelmäßige Anordnung der Zellen mit unregelmäßig geformten Epithelzellen. Scopolamin verursachte auch morphologische Veränderungen in der Bindehaut.
