1. Vorbereitung der Plazenta <ol><li> Die Plazenta sollte aus dem Kreißsaal so früh wie möglich erworben werden nach der Lieferung an die Bildung von Blutgerinnseln, Austrocknung und allgemeine Verschlechterung des Gewebes zu minimieren. </li><li> Es sollte darauf geachtet werden, dass die Plazenta nicht auf Formalin oder andere Fixiermittel ausgesetzt werden. </li><li> Standard BSL2 Vorsichtsmaßnahmen für menschliches Gewebe sollte beibehalten werden und Personal sollte eine Maske zu tragen, Kittel, Handschuhe und Überschuhe. </li><li> Legen Sie die Plazenta in einer großen Plastik-oder Metallbehälter, die vorgeschnittene Löcher für die Entwässerung der Flüssigkeit ermöglichen hat. Diese Schale sollte innerhalb eines größeren Schüssel aus Edelstahl angebracht werden, um das Auslaufen zu verhindern. </li><li> Waschen Sie die Plazenta mit warmen Kochsalzlösung. </li><li> Zur besseren Visualisierung der Plazenta, verwenden Metzenbaum Schere verbrauchsteuerpflichtige der inter-twin Fruchtwasser Membranen zu achten, dass die Plazenta selbst zu verletzen. Leave a ½ cm Manschette des inter-Doppelspeichen-Membran statt. (Abbildung 1A). </li></ol> 2. Katheterisierung der Plazentagefäße <ol><li> Identifizieren Sie die Kabel der jeweiligen Zwillinge. Die Geburtshelfer der Regel identifizieren jeder Zwilling durch die Anzahl der Klemmen auf jeder Schnur gelegt. Achten Sie darauf, um zu bestätigen, die mitgelieferte der Präsentation twin (Zwilling A). </li><li> Einer nach dem anderen, zu verfolgen, die Schnur ist, die Transekt jedes Kabel direkt unterhalb der Klemmen (Abbildung 1B). Gently Milch gerinnen aus den Gefäßen (Abbildung 1C). An der Schnittkante des Kabels wird es eine Vene und mindestens einen, meistens zwei, Arterien werden. Arterien sind durch ihre relativ kleineren Durchmesser (im Vergleich zu der Vene) und die umliegenden Muskeln Manschette (Abbildung 1D) identifiziert. </li><li> Verwenden Sie ein Standard-radialen, arteriellen Linie Führungsdraht, 0,46 mm Durchmesser und 80 cm lang (Arrow, Reading PA, USA), mit einer weichen Spitze, um den Zugriff auf eine arterielle Öffnung an der Schnittkante des Twin A-Kabel (Abbildung 1E) zu gewinnen. </li><li> Der Führungsdraht sollte ein Minimum von 3 cm in den Behälter gelegt werden. Sanfte Zähler Spannung auf die nonvascular Teil der Schnittkante des Kabels mit einem Kelly Klemme erleichtert Weiterentwicklung des Drahtes. Minor Drehen des Kabels an den gewundenen Gefässen begradigen kann mit Draht Weiterentwicklung zu helfen. Es ist darauf zu falschen Passagen zu vermeiden. </li><li> Mit der Seldinger-Technik, thread ein 20 cm langes 0,6-1,19 mm Innendurchmesser Polyethylenkatheter (Intramedic, Batavia IL, USA) mit einem unverblümt abgeschrägten distalen Ende über den Draht in die Arterie (Abb. 1F). Vorsicht ist geboten, um den Draht zu vertreiben, während Vorschieben des Katheters werden. Entfernen Sie den Draht nach Katheter mindestens 3 cm in den Behälter sitzt. </li><li> Alternativ haben einige Gruppen erfolgreich ohne Verwendung eines Führungsdrahtes und direkte Kanülierung der Nabelgefässe mit Umbilikalarterie Katheter hatte. Obwohl diese Technik funktioniert gut in unsere Hände die Verwendung eines Führungsdrahtes hat die Zeit, die uns um den Vorgang abzuschließen gesunken. </li><li> Bringen Sie eine 18 G stumpfe Spitze Nadel (BD Biosciences, Franlik Lakes, NJ, USA) mit dem proximalen Ende des Schlauchs. Korrekte Platzierung des Katheters durch die Injektion einer geringen Menge Kochsalzlösung in das Gefäß und beobachtet Clearing von distalen Arterien. Sanfte Finger streicht über die Schiffe während der Injektion Kochsalzlösung kann helfen, Erleichterung der Bewegung der verbleibenden Blutgerinnsel. </li><li> Sorgfältig wiederholen Sie die Schritte 2,3 bis 2,6 für die Vene twin A mit Aufmerksamkeit zu vermeiden, verdrängen den arteriellen Katheter. </li><li> Tie ein Stück Nabelschnur Band 1 cm distal der Schnittkante auf der ganzen Kabel und Katheter. Stellen Sie sicher, eine gute Abdichtung zu vermeiden, zurück fließen. </li><li> Wiederholen Sie Schritt von 2,3 bis 2,9 für das Kabel von Zwilling B (die Nicht-Präsentation mit zwei Einzelbetten), so dass es Katheter in eine Nabelschnur Arterie und Vene jedes Zweibettzimmer mit Nabelschnur-Band und die beiden Kreisläufe gesichert haben mit Kochsalzlösung (Abbildung 2) infundiert worden. </li></ol> 3. Die Injektion von Farbstoff in die Plazentagefäße <ol><li> Pathology Farbstoff-, Barium-Suspensionen, Gelatine oder andere zähflüssige Farbstoffen kann die Plazenta Gefäßsystem zu visualisieren. Wählen Sie vier kontrastierenden Farben, mit denen die Arterien und Venen der Zwillinge A und B. Die Farben für die Arterie und Vene für jeden Zwilling leicht erkennbar sollte zu injizieren ist. Oberflächliche Anastomosen sollten nachweisbar Farbstoff Mischen und die Bildung von einem anderen (blended) leicht nachweisbar Farbe. </li><li> Verwenden Sie eine 3ml Spritze zur Hand zu injizieren die Arterie von Zwilling A mit Farbstoff bei niedrigem Druck. Vorsichtig mit einem oder zwei Fingern reißen die Gefäße in Richtung der Farbstoff fließen, um sicherzustellen, Füllung des gesamten Gefäßsystems Baum. Wenn eine oberflächliche Gefäßanastomose identifiziert ist, kann die manuelle Okklusion der Fütterung Gefäß eingesetzt, damit der Rest der höheren Widerstand Gefäßbett zu füllen (Abbildung 3A). </li><li> Verwenden Sie eine separate 3ml Spritze zur Hand zu injizieren die Arterie von Zwilling B (Abbildung 3B). </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 3,2 und 3,3 für das venöse Injektionen. </li><li> Wenn Farbstoff Leckagen von einem verletzten Gefäß-, Reparatur sollte mit einer feinen Naht und eine Nadel Fahrer durchgeführt werden. Achten Sie darauf, Naht ligieren die ganze Vessel. </li><li> Mit einer hochauflösenden digitalen Kamera ein Bild nehmen nach jeder Injektion. Nachdem alle Injektionen abgeschlossen sind, entfernen Sie die Probe aus dem Becken, statt gegen einen farbneutralen Hintergrund und re-Bild (Abbildung 4). Dokumentieren Sie die Anzahl und Art der Verbindungen zwischen den Zwillingen Auflagen gesehen. </li></ol> 4. Repräsentative Ergebnisse: Arterie zu Arterie anastomosiert (AA) haben gezeigt, dass sein &quot;Schutzhaft&quot;, wie sie mit einer signifikanten Reduzierung des Risikos von TTTS und mit besseren Ergebnissen für beide Zwillinge 5 zugeordnet sind. Abbildung 4 zeigt eine eingespritzte MC Doppel-Plazenta. Ein AA war prospektiv in utero Doppler-Ultraschall ermittelt. Dieser Befund wurde durch das Mischen von twin A arteriellen (gelb) und zwei B arteriellen (blau) Farbstoff in eine kommunizierende arteriellen Struktur (grün, Pfeil) bestätigt. Ein AV-Anastomose mit Arterie aus den Partnerstädten A (gelb) und Vene aus Doppel B (orange) ist ebenfalls nachgewiesen (Pfeilspitze). Abbildung 5 und 6 zeigen Fotos von zwei anderen plazentaren Proben wir injiziert. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig1.jpg" alt="Abbildung 1"/> Abbildung 1. (A) Die Amnionmembran wird vorsichtig aus dem fetalen Oberfläche der gemeinsamen MC Plazenta mit Metzenbaum Schere entfernt. (B) eine saubere Kante der Nabelschnur von twin A durch proximale Durchtrennung mit Metzenbaum Schere ausgesetzt ist. (C) Clot gemolken wird von der Schnur durch manuelle Kompression. (D) Die Nabelarterien (Pfeilspitzen) und Vene (Pfeil) von twin A identifiziert werden. (E) Nach Platzierung eines Kelly Klammer auf der avaskulären Teil der Schnittfläche des Kabels für Traktion, ein Führungsdraht in der A. umbilicalis des platziert Zwilling A und sanft rückte durch die gewundenen Gefäß. (F) Ein kleiner Katheter wird dann über den Führungsdraht in das Gefäßlumen mit der Seldinger-Technik fortgeschritten. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig2.jpg" alt="Abbildung 2"/> Abbildung 2. Katheter sind in einer Nabelarterie und in die Nabelvene der Zwillinge gelegt. Diese Katheter sind in Ort mit Nabelschnur-Band Bande um das gesamte Kabel gesichert. Die richtige Positionierung der einzelnen Katheter wurde bestätigt und intraluminale Thromben wurden durch die Injektion von Kochsalzlösung erwärmt wurde gelöscht. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig3.jpg" alt="Abbildung 3"/> Abbildung 3. (A) Die arterielle Durchblutung des Twin A ist mit einem gelben Farbstoff injiziert. Kontrast deutlich Pässe über das Gefäßsystem Äquator in die arterielle Zirkulation von twin B. (B) den arteriellen Kreislauf des Twin-B ist mit blauen Farbstoff injiziert. Die Beimischung des gelben Farbstoff und blauen Farbstoff Ergebnisse in grünen Farbstoff in der gezeigt AA Anastomose (Pfeil). <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig4.jpg" alt="Abbildung 4"/> Abbildung 4. Die Vene twin A (rot) und die Vene von Zwilling B (orange) wurden injiziert. Die AA-Anastomose (Pfeil) und ein AV-Anastomose, mit Flow aus der Twin A in Richtung Twin B gerichtet sind (Pfeilspitze) abgegrenzt. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig5.jpg" alt="Abbildung 5"/> Abbildung 5. Beispiel für MC twin Plazenta, die Laser-Therapie nach der Geburt Injektion erhielten. Der Spender Zwillings Arterie und Vene sind in gelb und grün bzw.. Der Empfänger Arterie und Vene sind in blau und orange bzw.. Kein Rest-Verbindungen zwischen den Auflagen festgestellt wurden. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig6.jpg" alt="Abbildung 6"/> Abbildung 6. Beispiel für MC twin Plazenta nach der Injektion. Die linksseitige Zwillings Arterie und Vene sind gelb bzw. rot. Die rechtsseitige Zwillings Arterie und Vene sind in blau und orange bzw.. Ein AA (Pfeilspitze) und VV (Pfeil) sind sichtbar auf der Plazenta Oberfläche.

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	<li>Rand, L., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complicated+monochorionic+twin+pregnancies:+updates+in+fetal+diagnosis+and+treatment.">Complicated monochorionic twin pregnancies: updates in fetal diagnosis and treatment.</a> Clin Perinatol. 36, 417-430 (2009).</li><li>Sebire, N., Talbert, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twin-to-twin+transfusion+syndrome+results+from+dynamic+asymmetrical+reduction+in+placental+anastomoses:+a+hypothesis.">Twin-to-twin transfusion syndrome results from dynamic asymmetrical reduction in placental anastomoses: a hypothesis.</a> in Placenta. , (2001).</li><li>Machin, G. A., Keith, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> An atlas of multiple pregnancy: biology and pathology. , (1999).</li><li>Machin, G. A., Feldstein, V. A., van Gemert, M. J., Keith, L. G., Hecher, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doppler+sonographic+demonstration+of+arterio-venous+anastomosis+in+monochorionic+twin+gestation.">Doppler sonographic demonstration of arterio-venous anastomosis in monochorionic twin gestation.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 16, 214-217 (2000).</li><li>Denbow, M. L., Cox, P., Taylor, M., Hammal, D. M., Fisk, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+angioarchitecture+in+monochorionic+twin+pregnancies:+Relationship+to+fetal+growth,+fetofetal+transfusion+syndrome,+and+pregnancy+outcome.">Placental angioarchitecture in monochorionic twin pregnancies: Relationship to fetal growth, fetofetal transfusion syndrome, and pregnancy outcome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 182, 417-426 (2000).</li><li>Taylor, M. J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doppler+detection+of+arterio-arterial+anastomoses+in+monochorionic+twins:+feasibility+and+clinical+application.">Doppler detection of arterio-arterial anastomoses in monochorionic twins: feasibility and clinical application.</a> Human Reproduction. 15, 1632-1636 (2000).</li><li>Berm&#250;dez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+types+and+twin-twin+transfusion+syndrome.">Placental types and twin-twin transfusion syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 187, 489-494 (2002).</li><li>Lewi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intertwin+anastomoses+in+monochorionic+placentas+after+fetoscopic+laser+coagulation+for+twin-to-twin+transfusion+syndrome:+is+there+more+than+meets+the+eye.">Intertwin anastomoses in monochorionic placentas after fetoscopic laser coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: is there more than meets the eye.</a> Am J Obstet Gynecol. 194, 790-795 (2006).</li><li>Wee, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+deep+arterio-venous+anastomoses+within+monochorionic+placentae+by+vascular+casting.">Characterisation of deep arterio-venous anastomoses within monochorionic placentae by vascular casting.</a> Placenta. 26, 19-24 (2005).</li><li>Paepe, M. E. D. e., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demonstration+of+placental+vascular+anatomy+in+monochorionic+twin+gestations.">Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations.</a> Pediatr Dev Pathol. 5, 37-44 (2002).</li></ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Vascular Zuordnung von MC twin Plazenten von Farbstoff-Injektion ist eine wertvolle Verfahren zur Beurteilung von komplizierten, klinisch behandelten Fälle und für die weitere Verbesserung unseres Verständnisses von MC Partnerschaften. Koordination mit der geburtshilflichen Team zügige Übernahme eines intakten Plazenta-Probe zu gewährleisten ist entscheidend. Austrocknung oder längerer Lagerung des Gewebes vor der Injektion kann zu Gefäßverletzung und Extravasation von Farbstoff führen. Fixation der Plazenta m...

<table border="1"><tbody><tr><th> Name des Reagenzes </th><th> Firma </th><th> Katalog-Nummer </th><th> Kommentare (optional) </th></tr><tr><td> Perforierte Plastikschüssel </td><td> QuickMedical Medical Equipment und Zubehör </td><td> Polarware PA75 </td><td> Perforationen können mit einem Bohrer gemacht werden </td></tr><tr><td> Schüssel aus Edelstahl </td><td> Narang Medical Limited </td><td> HH517 </td><td></td></tr><tr><td> Physiologischer Kochsalzlösung </td><td> Fischer </td><td> 50983204 </td><td></td></tr><tr><td> 0,6-1,9 mm ID Polyethylenschlauch </td><td> Intramedic </td><td> 7436 </td><td></td></tr><tr><td> Arterielle Linie Führungsdraht (0,46 mm) </td><td> Arrow International </td><td> PW-18080 </td><td> Soft-Spitze </td></tr><tr><td> 18 G Blunt Needles </td><td> BD Biosciences </td><td> 305180 </td><td></td></tr><tr><td> Umbilical Band </td><td> QC Versorgung </td><td> 140895 </td><td></td></tr><tr><td> Metzenbaum Schere </td><td> Cole-Parmer </td><td> EW-10921-04 </td><td></td></tr><tr><td> Kelly Klemme </td><td> Cole Parmer </td><td> EW-10918-20 </td><td></td></tr><tr><td> 3 ml Spritze </td><td> Covidien </td><td> 1180300555 </td><td></td></tr><tr><td> Pathology Dye </td><td> Bradley Produkte </td><td> 7365-x </td><td></td></tr><tr><td> Digital Camera </td><td> Panasonic </td><td> Lumix TZ50- </td><td></td></tr></tbody></table>

guide wire assisted catheterization and colored dye injection for vascular mapping of monochorionic twin placentas

Monochoriale (MC) Zwillingsschwangerschaften sind mit einer deutlich höheren Morbidität und Mortalität als dichorialen Zwillinge verbunden. Etwa 50% der MC Zwillingsschwangerschaften Komplikationen entwickeln, die sich aus der gemeinsamen Plazenta und die damit verbundenen Gefäßveränderungen 1. Schwere twin-to-twin-Syndrom (FFTS) wird berichtet, dass etwa 20% dieser Komplikationen 2,3 Konto. Inter-twin vaskulären Verbindungen kommen in fast allen MC Plazenten und sind auf die Prognose und Ergebnis dieser Hochrisiko-Zwillingsschwangerschaften verbunden. Die Anzahl, Größe und Art der Anschlüsse in der Entwicklung von TTTS und andere MC Doppel-Bedingungen in Verbindung gebracht. Drei Arten von inter-twin vaskulären Verbindungen auftreten: 1) Arterie zu Vene-Verbindungen (AVS), in dem ein Zweig Arterie Durchführung sauerstoffarmes Blut von einem Zwilling Kurse an der fetalen Oberfläche der Plazenta und taucht ein in eine Plazenta Keimblatt. Das Blut fließt über eine tiefe intraparenchymal Kapillarnetz in einen drainierenden Vene, die an der fetalen Oberfläche der Plazenta hervorgeht und bringt sauerstoffreiches Blut in Richtung des anderen Zwillings. Es ist unidirektional flow aus der Partnerstadt Versorgung der zuführenden Arterie gegen die Twin Erhalt der ableitende Vene, 2) Arterie zu Arterie Verbindungen (AA) in die eine Niederlassung Arterie aus jedem Zwilling trifft direkt auf die oberflächlichen Plazenta Oberfläche was zu einem Gefäß mit pulsatile bidirektionale fließen, und 3) Vene zu Vene-Verbindungen (VVS), in dem ein Zweig Vene aus jedem Zwilling trifft direkt auf die oberflächlichen Plazenta Oberfläche ermöglicht Niederdruck bidirektionalen Fluss. In utero geburtshilflichen Sonographie mit gezielter Doppler Verhör wurde verwendet, um das Vorhandensein von AV identifizieren und AA Anschlüsse 4. Pränatal erkannt AAs, die von Geburt Plazenta Injektion Studien haben bestätigt, haben gezeigt, dass mit einer verbesserten Prognose für beide Zwillinge 5 zugeordnet werden. Darüber hinaus ist fetoscopic Laserablation von inter-twin vaskulären Verbindungen auf die fetale Oberfläche der gemeinsamen Plazenta nun die bevorzugte Behandlung für die frühe, schwere TTTS. Postnatale Plazenta Injektion Studien liefern eine wertvolle Methode, um die Genauigkeit der pränatalen Doppler-Ultraschall Ergebnisse und die Wirksamkeit von fetalen Lasertherapie 6 bestätigen. Mit Farbstoffen getrennt hand-Injektion in den arteriellen und venösen Kreisläufe der Zwillinge, die Technik-Highlights und umreißt AVs, AAS, und VVS. Diese endgültige Beweis MC Plazenta Gefäßanatomie kann dann mit Doppler-Ultraschall Erkenntnisse und neonatale Ergebnis korreliert werden, um unser Verständnis der Pathophysiologie der MC Partnerschaften und deren Folgeerscheinungen zu verbessern. Hier zeigen wir unsere Plazenta Injektionstechnik.

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Guide Wire Assisted Catheterization and Colored Dye Injection for Vascular Mapping of Monochorionic Twin Placentas

Vascular Kartierung monochorialen (MC) twin Plazenten nach der Geburt stellt ein Mittel für ausführliche Demonstration der vaskulären Verbindungen zwischen den Zwillingen Auflagen. Ungleichgewicht dieser Verbindungen wird angenommen, dass eine zentrale Rolle in der Entwicklung von Komplikationen der MC Partnerschaften einschließlich Doppel-to-twin Transfusion Syndrom spielen.

Führungsdraht Assisted Katheterisierung und Farbstoff Injection for Vascular Mapping von Monochoriale Twin Plazenten

Monochorionic (MC) twin pregnancies are associated with significantly higher morbidity and mortality rates than dichorionic twins. Approximately 50% of MC ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

14.8K Aufrufe.  University of California, San Francisco. Vascular Kartierung monochorialen (MC) twin Plazenten nach der Geburt stellt ein Mittel für ausführliche Demonstration der vaskulären Verbindungen zwischen den Zwillingen Auflagen. Ungleichgewicht dieser Verbindungen wird angenommen, dass eine zentrale Rolle in der Entwicklung von Komplikationen der MC Partnerschaften einschließlich Doppel-to-twin Transfusion Syndrom spielen.

Serie: Guide Wire Assisted Catheterization and Colored Dye Injection for Vascular Mapping of Monochorionic Twin Placentas

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between 100-400 &mu;m in diameter function primarily in directing blood flow to various organs according to the overall requirements of the body. The rat mesenteric artery has a diameter greater than 100 &mu;m. The myography technique, first described by Mulvay and Halpern1, was based on the method proposed by Bevan and Osher2. The technique provides information about small vessels under isometric conditions, where substantial shortening of the muscle preparation is prevented. Since force production and sensitivity of vessels to different agonists is dependent on the extent of stretch, according to active tension-length relation, it is essential to conduct contraction studies under isometric conditions to prevent compliance of the mounting wires. Stainless steel wires are preferred to tungsten wires because of oxidation of the latter, which affects recorded responses3.The technique allows for the comparison of agonist-induced contractions of mounted vessels to obtain evidence for normal function of vascular smooth muscle cell receptors.
We have shown in several studies that isolated mesenteric arteries that are contracted with phenylyephrine relax upon addition of cumulative concentrations of extracellular calcium (Ca2+e). The findings led us to conclude that perivascular sensory nerves, which express the G protein-coupled Ca2+-sensing receptor (CaR), mediate this vasorelaxation response. Using an automated wire myography method, we show here that mesenteric arteries from Wistar, Dahl salt-sensitive(DS) and Dahl salt-resistant (DR) rats respond differently to Ca2+e. Tissues from Wistar rats showed higher Ca2+-sensitivity compared to those from DR and DS. Reduced CaR expression in mesenteric arteries from DS rats correlates with reduced Ca2+e-induced relaxation of isolated, pre-contracted arteries. The data suggest that the CaR is required for relaxation of mesenteric arteries under increased adrenergic tone, as occurs in hypertension, and indicate an inherent defect in the CaR signaling pathway in Dahl animals, which is much more severe in DS.
The method is useful in determining vascular reactivity ex vivo in mesenteric resistance arteries and similar small blood vessels and comparisons between different agonists and/or antagonists can be easily and consistently assessed side-by-side6,7,8.

An automated myography method for force measurements in isolated mesenteric arteries is described. It employs a Mulvany-Halpern Auto Dual Wire Myograph 510A to determine responses to phenylephrine and extracellular calcium. The method allows consistent determination of isometric responses to agonists in small vessels of diameters of 60 - 300 &mu;m, independently.

A. mesenterica Kontraktion und Entspannung Studies Verwendung automatisierter Draht Myographie

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between ...

Forschung

Medizin

Accurate and Simple Evaluation of Vascular Anastomoses in Monochorionic Placenta using Colored Dye

The presence of placental vascular anastomoses is a conditio sine qua non for the development of twin-to-twin transfusion syndrome (TTTS) and twin anemia polycythemia sequence (TAPS)1,2. Injection studies of twin placentas have shown that such anastomoses are almost invariably present in monochorionic twins and extremely rare in dichorionic twins1. Three types of anastomoses have been documented: from artery to artery, from vein to vein and from artery to vein. Arterio-venous (AV) anastomoses are unidirectional and are referred to as "deep" anastomoses since they proceed through a shared placental cotyledon, whereas arterio-arterial (AA) and veno-venous (VV) anastomoses are bi-directional and are referred to as "superficial" since they lie on the chorionic plate. Both TTTS and TAPS are caused by net imbalance of blood flow between the twins due to AV anastomoses. Blood from one twin (the donor) is pumped through an artery into the shared placental cotyledon and then drained through a vein into the circulation of the other twin (the recipient). Unless blood is pumped back from the recipient to the donor through oppositely directed deep AV anastomoses or through superficial anastomoses, an imbalance of blood volumes occurs, gradually leading to the development of TTTS or TAPS. The presence of an AA anastomosis has been shown to protect against the development of TTTS and TAPS by compensating for the circulatory imbalance caused by the uni-directional AV anastomoses1,2. 
Injection of monochorionic placentas soon after birth is a useful mean to understand the etiology of various (hematological) complications in monochorionic twins and is a required test to reach the diagnosis of TAPS2. In addition, injection of TTTS placentas treated with fetoscopic laser surgery allows identification of possible residual anastomoses3-5. This additional information is of paramount importance for all perinatologists involved in the management and care of monochorionic twins with TTTS or TAPS. Several placental injection techniques are currently being used. We provide a simple protocol to accurately evaluate the presence of (residual) vascular anastomoses using colored dye injection.

Twin-to-twin transfusion syndrome and twin anemia polycythemia sequence are two potentially devastating problems in perinatal medicine. Both disorders occur only in monochorionic twins and result from unbalanced blood flow through placental vascular anastomoses. We provide a simple protocol to accurately evaluate the presence of vascular anastomoses using colored dye injection of placental vessels after birth.

Präzise und einfache Auswertung der Gefäßanastomosen in Monochoriale Placenta mit Farbstoff

The presence of placental vascular anastomoses is a conditio sine qua non for the development of twin-to-twin transfusion syndrome (TTTS) and twin anemia ...

Accuracy in Dental Medicine, A New Way to Measure Trueness and Precision

Reference scanners are used in dental medicine to verify a lot of procedures. The main interest is to verify impression methods as they serve as a base for dental restorations. The current limitation of many reference scanners is the lack of accuracy scanning large objects like full dental arches, or the limited possibility to assess detailed tooth surfaces. A new reference scanner, based on focus variation scanning technique, was evaluated with regards to highest local and general accuracy. A specific scanning protocol was tested to scan original tooth surface from dental impressions. Also, different model materials were verified. The results showed a high scanning accuracy of the reference scanner with a mean deviation of 5.3 &#177; 1.1 &#181;m for trueness and 1.6 &#177; 0.6 &#181;m for precision in case of full arch scans. Current dental impression methods showed much higher deviations (trueness: 20.4 &#177; 2.2 &#181;m, precision: 12.5 &#177; 2.5 &#181;m) than the internal scanning accuracy of the reference scanner. Smaller objects like single tooth surface can be scanned with an even higher accuracy, enabling the system to assess erosive and abrasive tooth surface loss. The reference scanner can be used to measure differences for a lot of dental research fields. The different magnification levels combined with a high local and general accuracy can be used to assess changes of single teeth or restorations up to full arch changes.

Accuracy is a major demand in dental medicine. To verify accuracy, reference scanners are needed. This article presents a new reference scanner with an adjusted scanning method to acquire a broad variety of dental morphologies with high trueness and precision.

Genauigkeit in Zahnmedizin, einen neuen Weg zu Richtigkeit und Präzision messen

Reference scanners are used in dental medicine to verify a lot of procedures. The main interest is to verify impression methods as they serve as a base ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to atherosclerotic plaque development or the rupturing of established plaques, interrupts normal blood flow leading to various morbidities such as myocardial infarction and stroke. In the clinic endovascular procedures such as angioplasty are commonly performed to reopen the lumen. However, these treatments inevitably damage the vessel wall as well as the vascular endothelium, triggering an excessive healing response and the development of a neointimal plaque that extends into the lumen causing vessel restenosis (re-narrowing). Restenosis remains a major cause of failure of endovascular treatments for atherosclerosis. Thus, preclinical animal models of restenosis are vitally important for investigating the pathophysiological mechanisms as well as translational approaches to vascular interventions. Among several murine experimental models, femoral artery wire injury is widely accepted as the most suitable for studies of post-angioplasty restenosis because it closely resembles the angioplasty procedure that injures both endothelium and vessel wall. However, many researchers have difficulty utilizing this model due to its high degree of technical difficulty. This is primarily because a metal wire needs to be inserted into the femoral artery, which is approximately three times thinner than the wire, to generate sufficient injury to induce prominent neointima. Here, we describe the essential surgical details to effectively overcome the major technical difficulties of this model. By following the presented procedures, performing the mouse femoral artery wire injury becomes easier. Once familiarized, the whole procedure can be completed within 20 min.

The mouse femoral artery wire injury model of restenosis is technically challenging. In this protocol we show the key technical details essential for successfully performing wire injury to induce consistent&#160;neointima for studies of restenosis.

Ein Mausmodell von arterieller Restenose: Technische Aspekte der Femoral Draht Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The &quot;Wire-Injury&quot; Model

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

Induktion von beschleunigter Atherosklerose bei Mäusen: Das "Wire-Injury"-Modell

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

Shunt-Chirurgie, Rechtsherzkatheter und Gefäß Morphometry in einem Rattenmodell für Durchfluss-induzierte pulmonale arterielle Hypertonie

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Model Surgical Training: Skills Acquisition in Fetoscopic Laser Photocoagulation of Monochorionic Diamniotic Twin Placenta Using Realistic Simulators

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome (TTTS), but is technically challenging and can lead to significant complications. Acquiring and maintaining the necessary surgical skills require consistent practice, a critical caseload, and time. Training on realistic surgical simulators can potentially shorten this steep learning curve and enables several proceduralists to acquire procedure-specific skills simultaneously. Here we describe realistic simulators designed to allow the user familiarity with the equipment and specific steps required in the surgical treatment of TTTS, including fetoscopic handling, approaches to anterior and posterior placenta, recognition of anastomoses, and efficient coagulation of vessels. We describe the skills that are especially important in conducting placental laser coagulation that the surgeon can practice on the model and apply in a clinical case. These models can be adapted easily depending on the availability of materials and require standard fetoscopy equipment. Such training systems are complementary to traditional surgical apprenticeships and can be useful aids for fetal medicine units that provide this clinical service.

Practicing the specific skills required for fetoscopic laser coagulation of monochorionic placental anastomoses on realistic models can aid less experienced surgeons in overcoming the steep learning curve associated with this procedure that is now regarded as the standard of care for twin-twin transfusion syndrome.

Modell chirurgische Ausbildung: Kompetenzentwicklung in Fetoscopic Laser Photokoagulation monochorialen dichorial Twin Plazenta mit realistischen Simulatoren

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome ...

Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due to sodium retention and hyperlipidemia. To study the pathophysiology of this syndrome, rodent models have been developed based on the injection of toxic substances such as doxorubicin causing podocyte damage. In mice, only few strains are susceptible to this model. In wildtype 129S1/SvImJ mice, the administration of doxorubicin by rapid intravenous injection to the retrobulbar sinus induces experimental nephrotic syndrome that features all the symptoms of human disease including sodium retention and edema. After the onset of proteinuria, mice exhibit increased urinary serine protease activity that leads to the activation of the epithelial sodium channel (ENaC) and sodium retention. Pharmacological inhibition of urinary serine proteases by the treatment with sustained release aprotinin abrogates ENaC activation and prevents sodium retention. This model is ideal to study the pathophysiology of proteasuria, i.e., the excretion of active serine proteases that cause ENaC activation by the proteolysis of its &#947;-subunit. This can be regarded as the primary mechanism of ENaC activation and sodium retention in proteinuric kidney disease.

Here, we describe the induction of experimental nephrotic syndrome in 129S1/SvImJ mice by rapid retrobulbar injection of doxorubicin. We also treat nephrotic mice with sustained release pellets containing aprotinin to inhibit urinary serine protease activity and prevent sodium retention.

Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The accuracy of PVP mainly depends on the surgeons&#39; experience and multiple fluoroscopes during a traditional procedure. Puncture related complications were reported all over the world. To make the surgical procedure more precise and decrease the rate of puncture-related complications, our team applied a three-dimensional printing guide template to PVP to modify the traditional procedure. This protocol introduces how to model target vertebrae DICOM imaging data into three-dimensions in the software, how to simulate operation in this 3-D model, and how to use all of the surgical data to reconstruct a patient specific template for application. Using this template, surgeons can identify suitable puncture points accurately to improve the accuracy of the operation. The whole protocol includes: 1) diagnosis of the osteoporotic vertebral compression fracture; 2) acquisition of CT imaging of the target vertebra; 3) simulation of the operation in the software; 4) design and fabrication of the 3-D printing guide template; and 5) application of the template into an operation procedure.

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

Herein, we present a three-dimensional printing guide template for percutaneous vertebraplasty. A patient with a T11 vertebral compression fracture was selected as a case study.

Dreidimensionale Druckanleitung Vorlage Assistierte Perkutane Vertebropplastik (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte retrieval with routine gynecological surgery. OP-IVM is suitable for patients undergoing benign gynecological surgery who have the need for fertility preservation (FP) or infertility treatments such as in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET). In the operating room, patients undergoing benign gynecological surgery are first anesthetized and receive ultrasound-guided immature follicle aspiration (IMFA) treatment. As the subsequent gynecological surgery is performed, the cumulus-oocyte complexes (COCs) are examined, and the immature COCs are transferred into the IVM medium and cultured for 28-32 hours in the IVF laboratory. After assessment, mature oocytes in the MII stage will be selected and cryopreserved in liquid nitrogen for FP or fertilized by intracytoplasmic sperm injection (ICSI) for IVF-ET. By combining IVM with gynecological surgery, immature oocytes that would have been discarded can be saved and used for assisted reproductive technology (ART). The procedure, significance and critical aspects of OP-IVM are described in this article.

In vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) combines IVM following oocyte retrieval with routine gynecological surgery and serves as an extension of conventional IVM applications for fertility preservation.

OP-IVM: Kombination der In-vitro-Reifung nach Eizellentnahme mit gynäkologischer Chirurgie

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...