Wir danken Ihnen, Jessica Ottmar für Protokoll Vorschläge und Beiträge zu den repräsentativen Daten. Besonderen Dank an Sabrina Blackledge, Lauren Kohoutek und Kerisa Shelton zur Demonstration dieses Protokoll.

1. Einrichten <ol><li> Alle Forschung sollte von den zuständigen Institutional Review Board oder menschlichen Probanden Prüfungsausschuss vor der Datenerfassung genehmigt werden. </li><li> Idealerweise sollten zwei Zimmer zur Verfügung, die TSST befragen. Ein komfortabler Warteraum zur Verfügung stehen sollte Teilnehmern vor Beginn des TSST und in der Rekonvaleszenz. Ein separater Besprechungsraum sollte während der Rede Vorbereitung, Rede Performance und Mathematik Teile der TSST eingesetzt werden, um der Neuheit und uncontrolability einzuführen. </li><li> Ordnen Sie die Interview-Raum, so dass die Teilnehmer werden vor die eidgenössischen Interviewer und Position Video-oder Audio-Aufnahmegeräte in das Gesichtsfeld des Teilnehmers. Laborkittel sollten für die Interviewer während des TSST tragen, um zu betonen, während der TSST erhöhen. Weisen Sie die Interviewer, Blickkontakt mit den Teilnehmern zu halten und alles unterlassen, was emotionale Gesichtsausdrücke während der TSST. </li><li> Überlegen Sie genau, the Forschungsfrage (n) bei der Auswahl abhängig Messungen. : Richtlinien für die Analyse und Veröffentlichung der verschiedenen Messungen der Reaktion auf Stress werden von mehreren Quellen (Richtlinien für die Veröffentlichung und Analyse der psychophysiologischen Maßnahmen werden von der Gesellschaft für Psychophysiologie Forschung bereitgestellt <a href="http://www.sprweb.org/journal/index.cfm#guidelines" target="_blank">http://www.sprweb.org/journal/index. cfm # guidelines</a> ). 5 Konsultation der diese Ressourcen bei der Planung von Experimenten wird empfohlen. </li><li> Richten Sie alle Geräte benötigt, um physiologische, psychologische oder endokrine Reaktionen auf die TSST aufzunehmen. Dieses Gerät kann (aber nicht beschränkt auf) Elektroden und elektronischen Geräten und / oder Software, um die Herzfrequenz, Herz-Kreislauf-Reaktivität, die Hautleitfähigkeit oder Antwort, Lidschlag, Muskelkontraktion / Ton, der Atmung usw., Papier und Bleistift oder elektronischen Versionen von psychologische Instrumente wie das State-Trait Anxiety Inventory; 6 Röhren und andere Sammlung Materialien für Urin-, Blut-oder Speichelproben,. oder Videoaufzeichnung Ausrüstung Für diese Demonstration werden wir mit drei führen Elektrokardiogramm (EKG)-Elektroden, um die Herzfrequenz während des TSST zu messen, und die wiederholte Verabreichung des State-Trait Anxiety Inventory, um psychologische Reaktion vor und nach dem Stressor zu messen. Wir nutzen eine einfache Recording-System entwickelt, um die physiologischen Reaktionen zu messen (Biopac MP36 System), um die Herzfrequenz aufzeichnen. </li><li> Wenn Blutproben (anstatt Speichel) während des Experiments gesammelt werden, sollten die Bemühungen für Schmerzen und Leiden bei der Erhebung weitestgehend einzuschränken. Blutentnahme Verfahren einführen können zusätzliche physische oder psychische Belastung, verwirrende Antwort auf die TSST. </li><li> Wenn der Teilnehmer ankommt, begrüßen sie ins Labor. Erhalten informed consent und Sitz der Teilnehmer bequem. </li><li> Sammeln demografische Informationen, Screening-Informationen oder zusätzlinal Ankunft Maßnahmen, die von Ihrem Experiment benötigt werden. Stellen Sie sicher, dass der Teilnehmer nicht für Nahrungsmittel oder Getränke (außer Wasser) in der letzten Stunde verbraucht, wenn das Sammeln Kortisol-Messungen. Eine kurze Zeit des Fastens ist empfehlenswert, wenn Sie sammeln werden Speichelproben für die Analyse. Änderungen des pH-Wertes mit sauren Speisen oder Getränken oder sichtbarer Verschmutzung verbunden mit genauen Messung der Speicheldrüsen Marker stören. Urin Toxikologie-Screening erforderlich, wenn die Maßnahmen von Interesse durch Medikamente oder andere Metaboliten verunreinigt werden kann. Informationen über Faktoren, die Stress-Reaktion (z. B. Medikamente, Krankheit, Schlaf, den letzten belastende Ereignisse, soziale Phobie) sollte auch bei der Screening-Teilnehmer beeinflussen können. </li></ol> 2. Pre-Stress-Messungen <ol><li> Weisen Sie den Teilnehmer, um bequem warten Sie 45 Minuten im Wartezimmer. Sie können wählen, um die Teilnehmer mit Lesestoff wie Zeitschriften, die emo bietentional-neutral Inhalte oder anderen emotional neutral in diesem Zeitraum. </li><li> Nach dem 45-minütigen Wartezeit, zur Verwaltung der State-Trait Anxiety Inventory, um Vorspannung Angst zu bewerten. 6 Alternativ können auch andere Instrumente, die entworfen, um Statusänderungen in Stress, Angst oder Entspannung bewerten verabreicht werden kann (z. B. visuelle Analogskala) werden. </li><li> Sammle eine &quot;Vorspannung&quot; Speichelprobe. Weisen Sie den Teilnehmer, den Mund mit Wasser spülen. Geben Sie dem Teilnehmer eine 5-10 cm Abschnitt Trinkhalm und einem sauberen, Einweg 2,0 ml Polypropylen Röhrchen. Weisen Sie den Teilnehmer, den Kopf nach vorne geneigt, damit Speichel Pool auf dem Boden der Mundhöhle dann den Speichel durch den Strohhalm in die Flasche. Sammeln Sie ca. 1,5-2,0 ml des Speichels aus der Teilnehmerliste. Alternativ können Speichel durch Verwendung von absorbierenden zahnärztlichen Docht (oder ähnliches Material) und Unterweisung der Teilnehmer zu kauen oder zu sättigen das Material mit Speichel gesammelt werden. Wenn posSible, den Raum verlassen, um den Teilnehmer mit Privatsphäre. Label und speichern alle Speichel-Proben bei -20 ° C so schnell wie möglich. </li><li> Rekord 5 Minuten Vorspannung physiologische Messungen. </li></ol> 3. Das TSST <ol><li> Wenn Sie verwenden möchten einen separaten Besprechungsraum (um den Stress Auswirkungen der TSST zu erhöhen), bringen die Teilnehmer aus dem Wartezimmer in die Interview-Raum. </li><li> Zu Beginn des TSST Rede Vorbereitungszeit, lesen Sie das folgende Skript an die Teilnehmer: &quot;Das ist die Rede Vorbereitung Teil der Aufgabe, ihr seid geistig vorzubereiten fünf-minütigen Rede, warum Sie ein guter Kandidat für Ihr Traumjob wäre. Ihre Rede wird auf Video aufgezeichnet und durch ein Gremium von Richtern in öffentlichen Reden geschult überprüft werden. Sie haben 10 Minuten für die Vorbereitung und die Zeit beginnt jetzt. &quot; </li><li> Rekord physiologische Messungen während der 10-minütigen Rede Vorbereitungszeit. Legen Sie eine digitale Zeitschaltuhr für 10 Minuten und verlassen den Raum. </li&gt; <li> Nach 10 Minuten den Raum trägt einen Kittel zurück. Lesen Sie das folgende Skript an die Teilnehmer: &quot;Das ist die Rede Teil der Aufgabe Sie sind mit einer Rede, warum Sie ein guter Kandidat für Ihr Traumjob wäre liefern Sie sollten für die gesamte Fünf-Minuten-Zeitraum zu sprechen... Ihre Zeit beginnt jetzt. &quot; Die Stütze Videokamera sollte nun gedreht werden, um evaluative / Leistung Stress erhöhen. </li><li> Rekord physiologische Messungen während der 5-minütigen Rede Performance-Zeitraums. Wenn der Teilnehmer hört auf zu reden während der Rede, damit er oder sie bleiben für 20 Sekunden still. Wenn er oder sie nicht fortgesetzt wird gesprochen, prompt die Teilnehmer weiter zu sprechen, indem sie anweisen,: &quot;Sie haben noch verbleibende Zeit.&quot; </li><li> Am Ende der 5-minütigen Rede Performance-Zeitraums, lesen Sie das folgende Skript an die Teilnehmer: &quot;Während der letzten fünf Minuten math Teil dieser Aufgabe, die Sie gebeten, nacheinander subtrahieren Sie die Zahl 13 aus 1.022 werden Sie verbal.ly melden Sie Ihre Antworten laut, und bat darum, wieder ganz von 1.022, wenn ein Fehler gemacht werden. . Ihre Zeit beginnt jetzt: &quot;Wenn die Teilnehmer einen Fehler macht, prompt ihnen mit:&quot; Das ist falsch, dann starte gleich noch 1.022 &quot;Set eine digitale Zeitschaltuhr für 5 Minuten.. </li><li> Rekord physiologische Messungen während der 5-Minuten-Mathe Performance-Zeitraums. </li><li> Am Ende des Performance-Zeitraums Mathematik der TSST, sammeln eine &quot;post-stress&quot; Speichelprobe. </li><li> Verwalten Post-Stress-State-Trait Anxiety Inventory. </li></ol> 4. Post-Stress-Recovery-Messungen <ol><li> Zurück Teilnehmer auf die ursprüngliche Wartezimmer. Während der ersten Erholungsphase, weisen die Teilnehmer bequem warten Sie 20 Minuten. Legen Sie eine digitale Zeitschaltuhr für 20 Minuten und verlassen den Raum. </li><li> Zurück zu Wartezimmer nach 20 Minuten und sammeln eine &quot;recovery 1&quot; Speichelprobe. </li><li> In der zweiten Erholungsphase, weisen die Teilnehmer wieder bequem warten Sie 20 Minuten. Legen Sie eine digitale Zeitschaltuhr für 20 Minuten und verlassen den Raum. </li><li> Zurück zu Wartezimmer nach 20 Minuten und sammeln eine &quot;recovery 2&quot; Speichelprobe. </li><li> Weisen Sie den Teilnehmer in die &quot;Verwertung&quot; State-Trait Anxiety Inventory abzuschließen. </li><li> Besprechen Sie die Teilnehmer, wie die wahre Natur des Experiments. Informieren Sie die Teilnehmer, dass ihre Leistung nicht aufgenommen wurde und dass keine Analyse ihrer Sprache oder Mathematik Leistung durchgeführt werden. Erklären Sie den Teilnehmer, dass die Aufgaben, mit denen sie vorgestellt wurden unzumutbar erschwert wurden und nicht auf die Teilnehmer der Eignung oder Fähigkeit zu reflektieren. </li></ol> 5. Data Analysis <ol><li> Zur Analyse psychologische Maßnahmen, Gäste jeden Staat Trait Anxiety Inventory aus der Vorspannung, Post-Stress-und Recovery-Zeit Punkte. 6 </li><li> Zur Analyse physiologische Messungen, Berechnung einer mittleren Herzfrequenz Punktzahl für jede der 5-minütigen &quot;pre Stress&quot;, &quot;Rede Vorbereitung&quot;, &quot;Rede-Performance&quot; und &quot;math &quot;Zeiten des TSST. Alternativ berechnen Mittelwerte für jede Minute des TSST oder messen die Herzfrequenz zu diskreten Zeitpunkten während des TSST. </li><li> Zur Analyse neuroendokrinen Maßnahmen Assay Speichel-Proben für die Hormon-Konzentration mit dem kommerziell erhältlichen EIA-Kits. </li></ol> 6 Optional:. Zusätzliche Cortisol Assay-Protokoll-Informationen (reproduziert aus Salimetrics Cortisol-Assay-Kit einfügen) <ol><li> Bringen Sie alle Speicheldrüsen-Assay-Kit Reagenzien auf Raumtemperatur. </li><li> Bereiten Waschpuffer nach Montageanweisungen. </li><li> Bestimmen Platte Layout und Pipette 25 ul Standards und Kontrollen in die entsprechenden Wells in zweifacher Ausfertigung. </li><li> Thaw Speichelproben, vortexen, zentrifugieren bei 1.500 XG (@ 3,000 RPM) für 15 Minuten. </li><li> Je 25 ul einer klaren Flüssigkeit aus zentrifugierten Proben in die entsprechenden Wells in der Platte (in zweifacher Ausfertigung). </li><li> Enzymkonjugat und Pipette 200 ul in alle Vertiefungen. </li&gt; <li> Mix Platte für 5 Minuten bei 500 rpm und inkubieren für eine zusätzliche 55 Minuten. </li><li> Waschen und trocknen Sie die Platte 4 mal mit Waschpuffer. </li><li> Geben Sie 200 ul Tetramethylbenzidin (TMB)-Lösung in jede Vertiefung mit einer Mehrkanalpipette. </li><li> Mix der Platte 5 Minuten bei 500 Umdrehungen pro Minute und im Dunkeln inkubieren für eine zusätzliche 25 Minuten. </li><li> Dann werden 50 ul Stop-Lösung in jede Vertiefung zugeben und 3 Minuten bei 500 Umdrehungen pro Minute, um die Reaktionen zu stoppen. </li><li> Wischen Sie die Platte unten sauber und lesen Sie die Platte in einem Platten-Lesegerät bei 450 nm innerhalb von 10 Minuten nach Zugabe Stop-Lösung. </li><li> Zur Berechnung der Cortisol-Konzentration, berechnet die durchschnittliche optische Dichte für alle Doppelbestimmungen. Subtrahieren der mittleren optischen Dichte der nicht-spezifische Bindung Brunnen aus dem Mittelwert der optischen Dichte der Null-, Standard-, Steuer-und Probenvertiefungen. </li><li> Berechnen Sie die prozentuale gebunden (B / Bo) für jeden Standard, jede Kontrolle und Probe, indem die durchschnittliche optische Dichte dieser Brunnen (B) von der durchschnittlichenAlter optische Dichte der Null-Brunnen (Bo). Bestimmen Sie die Konzentration der Kontrollen und Proben durch Interpolation unter Verwendung von Software in der Lage Logistik. </li></ol> 7. Repräsentative Ergebnisse: Der Vertreter hier präsentierten Daten aus einer Durchsicht der Literatur und zwei Studien, die in unserem Labor im Laufe des Nachmittags mit gesunden erwachsenen männlichen Teilnehmern durchgeführt wurden zusammengestellt. Diese Daten sollen repräsentativ für die Ergebnisse, die gefunden mit dem Protokoll in diesem Artikel vorgestellt werden könnte. Das TSST-Protokoll (Abbildung 1) induziert steigt in selbst berichteten Angst (wie von der State-Trait Anxiety Inventory gemessen; Abbildung 2), Herzfrequenz (Abbildung 3) und Cortisol-Konzentrationen (Abbildung 4). Das experimentelle Protokoll in Abbildung 1 dargestellt ist, soll ein Beispiel, wie verschiedene Messungen können während einer Datensammlung Sitzung mit dem TSST gemacht werden können. Der Zeitpunkt der Messung!ts und die Einbeziehung der verschiedenen Maßnahmen werden von der spezifischen Fragestellung diktiert werden. Wenn Sie eine Intervention, sollen Angst und / oder Stress-Reaktion, abgestumpft oder abgeschwächten Anstieg der diese Maßnahmen werden voraussichtlich zu reduzieren. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig1.jpg" /> Abbildung 1. Experimental-Protokoll Hinweis: Trier Social Stress Test (TSST), State-Trait Anxiety Inventory (STAI); 5-minütigen Pre Drangperiode (PS); 10-minütigen Vorausschauende Drangperiode (Rede Vorbereitung) (AS); 5-Minuten-Rede Zeitraum. (S); 5-Minuten-Math Zeitraum (M). <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig2.jpg" /> Abbildung 2. Vertreter Zustand Angstwerte Hinweis:. Staat Anxiety Ergebnis aus 20-iten Staat Angst Maß für State-Trait Anxiety Inventory (STAI) berechnet Vertreter Noten spiegeln gesammelten Daten in unserem Labor und veröffentlicht in der Literatur.. Abbildung 3. Vertreter Herzfrequenzdaten Hinweis:.. Herzfrequenz in Schlägen pro Minute (BPM) Repräsentative Werte spiegeln gesammelten Daten in unserem Labor und veröffentlicht in der Literatur. <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig4.jpg" /> Abbildung 4. Vertreter Cortisol Daten Hinweis:.. Cortisol-Konzentration im UL / DL Repräsentative Werte spiegeln gesammelten Daten in unserem Labor und veröffentlicht in der Literatur.

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Reviewing determinants of human salivary cortisol responses to challenge.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 2-18 (2009).</li><li>Buske-Kirschbaum, A., Jobst, S., Wustmans, A., Kirschbaum, C., Rauh, W., Hellhammer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuated+free+cortisol+response+to+psychosocial+stress+in+children+with+atopic+dermatitis.">Attenuated free cortisol response to psychosocial stress in children with atopic dermatitis.</a> Psychosom. Med. 59, 419-426 (1997).</li></ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

In diesem Artikel haben wir gezeigt, wie man die Trier Social Stress Test in einem gesunden Probanden befragen. Das TSST ist eine standardisierte Labor sozialen Stressor, die robust und zuverlässig erhöht in psychologischen, physiologischen und neuroendokrinen Maßnahmen induziert. Das TSST ist eine sinnvolle Alternative zu physischen Stressoren wie am kalten Presser Test oder Gehen auf dem Laufband, und reproduziert die mehr naturalistische psychische Belastung der Leistung in der Gegenwart eine wertende Publikum. </...

<table border="1"><tbody><tr><th> Bezeichnung des Geräts / Supply </th><th> Firma </th><th> Katalog-Nummer </th></tr><tr><td> BSL Psychophysiologie System, Mac OS Inklusive MP36 Datenerfassungseinheit und drei Kanal-EKG-Elektroden </td><td> Biopac Systems Inc. </td><td> BSLPSY-M </td></tr><tr><td> State-Trait Anxiety Inventory </td><td> Geist Garden, Inc. </td><td> Bieder-B </td></tr><tr><td> Cortisol Enzyme Immuno Assay Kit </td><td> Salimetrics </td><td> 1-3002 </td></tr><tr><td> 2,0 ml Polypropylen Ampullen </td><td> Fisher Scientific </td><td> 05 40B 146 </td></tr><tr><td> BioRad Mikroplatten-Reader, Modell 680, mit Microplate Manager Software </td><td> BioRad </td><td> Plate Reader: 168 1000 Software: 1706800 </td></tr></tbody></table>

the trier social stress test protocol for inducing psychological stress

Dieser Artikel beschreibt eine psychische Belastung Protokoll für den Einsatz im Labor. Protokolle, dass die Forscher die biologische Pfade der Reaktion auf Stress in Gesundheit und Krankheit Studie ermöglichen, sind von grundlegender Bedeutung für den Fortschritt der Forschung in Stress und Angst. 1 Obwohl zahlreiche Protokolle zur Induktion Stress-Reaktion im Labor bestehen, zu viele vernachlässigen einen naturalistischen Kontext oder auf Aspekte der sozialen und psychologischen Stress zu integrieren. Von psychischer Stress-Protokolle, Meta-Analyse legt nahe, dass die Trier Social Stress Test (TSST) die nützlich und angemessen standardisiertes Protokoll für die Untersuchung der Stresshormon-Reaktivität. 2 In der ursprünglichen Beschreibung des TSST ist, wollten die Forscher Design und Evaluation eines Verfahrens induzieren kann eine zuverlässige Reaktion auf Stress in der Mehrzahl der gesunden Probanden. 3 Diese Forscher fanden heraus, Erhöhungen der Herzfrequenz, Blutdruck und einige endokrine Stressantwort markers in Reaktion auf die TSST (eine psychologische Stressor), um eine Kochsalzlösung (ein physikalischer Stressor) verglichen. 3 Obwohl die TSST modifiziert worden ist, auf die Bedürfnisse der verschiedenen Arbeitsgruppen gerecht zu werden, es besteht im Allgemeinen aus einer Wartezeit bei der Ankunft, vorausschauende Rede Vorbereitung, Vortrag Leistung und verbal Rechenleistung Zeiten, durch eine oder mehrere Erholungsphasen folgen. Das TSST, dass die Teilnehmer zur Vorbereitung und eine Rede halten, und verbal zu einem anspruchsvollen Rechenaufgabe in das Vorhandensein einer sozial evaluative Publikum ansprechen. 3 Soziale Bewertung und Unkontrollierbarkeit haben als Schlüsselkomponenten der Stress-Induktion wurde durch den TSST identifiziert. 4 In Verwendung für mehr als einem Jahrzehnt ist das Ziel des TSST systematisch induzieren eine Stress-Reaktion, um Unterschiede in der Reaktivität, Angst und Aktivierung der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse (HPA) oder sympathisch-Nebennieren-Mark (SAM)-Achse messen während der Aufgabe . 1 Researcihr im Allgemeinen zu bewerten Veränderungen in selbst berichteten Angst, physiologischen Maßnahmen (zB Herzfrequenz), und / oder neuroendokrinen Indizes (z. B. das Stresshormon Cortisol) in Reaktion auf die TSST. Viele Forscher haben Speicheldrüsen Probenahme für die Stress-Marker wie Cortisol und Alpha-Amylase (ein Marker für die Aktivierung des autonomen Nervensystems) als Alternative zur Blutentnahme auf die verwirrende Stress des Blut-Sammlung Techniken reduzieren angenommen. Zusätzlich zu den Veränderungen durch eine individuelle Abschluss der TSST erfahren, können die Forscher Veränderungen zwischen den verschiedenen Behandlungsgruppen (z. B. klinische gegenüber gesunden Kontrollpersonen) oder die Wirksamkeit der Stress-Reduzierung Interventionen zu vergleichen. 1

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The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll zur Induktion psychischen Stress bei den Teilnehmern, die es Forschern ermöglicht, psychologische, physiologische und neuroendokrine Reaktionen auf Stress innerhalb einzelner Teilnehmer oder zwischen den Gruppen zu messen.

Die Trier Social Stress Test-Protokoll zur Induktion psychischer Stress

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

the-trier-social-stress-test-protocol-for-inducing-psychological

Research

JoVE Journal

Medicine

55.6K Aufrufe.  Northern Arizona University. Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll zur Induktion psychischen Stress bei den Teilnehmern, die es Forschern ermöglicht, psychologische, physiologische und neuroendokrine Reaktionen auf Stress innerhalb einzelner Teilnehmer oder zwischen den Gruppen zu messen.

Serie: The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

Using Visual and Narrative Methods to Achieve Fair Process in Clinical Care

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is respect for patient's values, preferences, and expressed needs. Yet specific approaches to gaining this understanding and translating it to quality care in the clinical setting are lacking. From a patient perspective quality is not a simple concept but is best understood in terms of five dimensions: technical outcomes; decision-making efficiency; amenities and convenience; information and emotional support; and overall patient satisfaction. Failure to consider quality from this five-pronged perspective results in a focus on medical outcomes, without considering the processes central to quality from the patient's perspective and vital to achieving good outcomes. In this paper, we argue for applying the concept of fair process in clinical settings. Fair process involves using a collaborative approach to exploring diagnostic issues and treatments with patients, explaining the rationale for decisions, setting expectations about roles and responsibilities, and implementing a core plan and ongoing evaluation. Fair process opens the door to bringing patient expertise into the clinical setting and the work of developing health care goals and strategies. This paper provides a step by step illustration of an innovative visual approach, called photovoice or photo-elicitation, to achieve fair process in clinical work with acquired brain injury survivors and others living with chronic health conditions. Applying this visual tool and methodology in the clinical setting will enhance patient-provider communication; engage patients as partners in identifying challenges, strengths, goals, and strategies; and support evaluation of progress over time. Asking patients to bring visuals of their lives into the clinical interaction can help to illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships with patients living with chronic conditions such as brain injury, and identify patient-centered goals and possibilities for healing. The process illustrated here can be used by clinicians, (primary care physicians, rehabilitation therapists, neurologists, neuropsychologists, psychologists, and others) working with people living with chronic conditions such as acquired brain injury, mental illness, physical disabilities, HIV/AIDS, substance abuse, or post-traumatic stress, and by leaders of support groups for the types of patients described above and their family members or caregivers.

This paper illustrates an innovative visual approach (photovoice or photo-elicitation) to achieve fair process in clinical care for patients living with chronic health conditions, illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships, and identify patient-centered goals and possibilities for healing.

Mit visuellen und narrativen Methoden auf ein faires Verfahren in der klinischen Versorgung erreichen

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is ...

Forschung

Medizin

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson's Disease

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our understanding of the mechanisms underlying parkinsonian symptoms, since it recapitulates the changes in basal ganglia circuitry and pharmacology observed in parkinsonian patients1-4. However, the precise cellular and molecular changes occurring at cortico-striatal synapses of the output pathways within the striatum, which is the major input region of the basal ganglia remain elusive, and this is believed to be site where pathological abnormalities underlying parkinsonian symptoms arise3,5.
In PD, understanding the mechanisms underlying changes in basal ganglia circuitry following degeneration of the nigro-striatal pathway has been greatly advanced by the development of bacterial artificial chromosome (BAC) mice over-expressing green fluorescent proteins driven by promoters specific for the two striatal output pathways (direct pathway: eGFP-D1; indirect pathway: eGFP-D2 and eGFP-A2a)8, allowing them to be studied in isolation. For example, recent studies have suggested that there are pathological changes in synaptic plasticity in parkinsonian mice9,10. However, these studies utilised juvenile mice and acute models of parkinsonism. It is unclear whether the changes described in adult rats with stable 6-OHDA lesions also occur in these models. Other groups have attempted to generate a stable unilaterally-lesioned 6-OHDA adult mouse model of PD by lesioning the medial forebrain bundle (MFB), unfortunately, the mortality rate in this study was extremely high, with only 14% surviving the surgery for 21 days or longer11. More recent studies have generated intra-nigral lesions with both a low mortality rate &gt;80% loss of dopaminergic neurons, however expression of L-DOPA induced dyskinesia11,12,13,14 was variable in these studies. Another well established mouse model of PD is the MPTP-lesioned mouse15. Whilst this model has proven useful in the assessment of potential neuroprotective agents16, it is less suitable for understanding mechanisms underlying symptoms of PD, as this model often fails to induce motor deficits, and shows a wide variability in the extent of lesion17, 18.
Here we have developed a stable unilateral 6-OHDA-lesioned mouse model of PD by direct administration of 6-OHDA into the MFB, which consistently causes &gt;95% loss of striatal dopamine (as measured by HPLC), as well as producing the behavioural imbalances observed in the well characterised unilateral 6-OHDA-lesioned rat model of PD. This newly developed mouse model of PD will prove a valuable tool in understanding the mechanisms underlying generation of parkinsonian symptoms.

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson&#039;s Disease

A protocol for performing unilateral 6-OHDA lesions of the medial forebrain bundle in mice is described. This method has a low mortality rate (13.3 %) with 89% of the surviving animals showing &#62;95% loss of striatal dopamine and 90.63&#177;-4.02 % ipsiversive rotational bias towards the side of the lesion.

Entwicklung eines Einseitig-läsionierten 6-OHDA Mausmodell der Parkinson-Krankheit

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our ...

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce atherosclerosis (reviewed in 1 and 2). The role of shear stress has been extensively studied in vitro investigating the influence of flow dynamics on cultured endothelial cells 1,3,4 and in vivo in larger animals and humans 1,5,6,7,8. However, highly reproducible small animal models allowing systematic investigation of the influence of shear stress on plaque development are rare. Recently, Nam et al. 9 introduced a mouse model in which the ligation of branches of the carotid artery creates a region of low and oscillatory flow. Although this model causes endothelial dysfunction and rapid formation of atherosclerotic lesions in hyperlipidemic mice, it cannot be excluded that the observed inflammatory response is, at least in part, a consequence of endothelial and/or vessel damage due to ligation.
In order to avoid such limitations, a shear stress modifying cuff has been developed based upon calculated fluid dynamics, whose cone shaped inner lumen was selected to create defined regions of low, high and oscillatory shear stress within the common carotid artery 10. By applying this model in Apolipoprotein E (ApoE) knockout mice fed a high cholesterol western type diet, vascular lesions develop upstream and downstream from the cuff. Their phenotype is correlated with the regional flow dynamics 11 as confirmed by in vivo Magnetic Resonance Imaging (MRI) 12: Low and laminar shear stress upstream of the cuff causes the formation of extensive plaques of a more vulnerable phenotype, whereas oscillatory shear stress downstream of the cuff induces stable atherosclerotic lesions 11. In those regions of high shear stress and high laminar flow within the cuff, typically no atherosclerotic plaques are observed.
 
In conclusion, the shear stress-modifying cuff procedure is a reliable surgical approach to produce phenotypically different atherosclerotic lesions in ApoE-deficient mice.

The constricting cuff presented in this article is designed to induce atherosclerosis in the murine common carotid artery. Due to the conical shape of its inner lumen the implanted cuff generates well-defined regions of low, high and oscillatory shear stress triggering the development of atherosclerotic lesions of different inflammatory phenotypes.

Implantation einer Karotis Cuff für Triggering Shear-Stress-Induced Arteriosklerose bei Mäusen

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

Biomarker in einem Tiermodell für die Aufdeckung Neural, hämatologischen und Behavioral Korrelate der PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the arteries (&beta;2). When systemically administered, it increases cardiac demand. Thus, dobutamine unmasks abnormal rhythm or ischemic areas potentially at risk of infarction. 
Monitoring of heart function during a cardiac stress test can be performed by either ecocardiography or cardiac catheterization. The latter is an invasive but more accurate and informative technique that the former.
Cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization accomplished as described here allows, in a single experiment, the measurement of the following hemodynamic parameters: heart rate (HR), systolic pressure, diastolic pressure, end-diastolic pressure, maximal positive pressure development (dP/dtmax) and maximal negative pressure development (dP/dtmin), at baseline conditions and under increasing doses of dobutamine.
As expected, in normal mice we observed a dobutamine dose-related increase in HR, dP/dtmax and dP/dtmin. Moreover, at the highest dose tested (12 ng/g/min) the cardiac decompensation of high fat diet-induced obese mice was unmasked.

We describe the protocol to perform a cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in normal mice. Also we show its application to unmask subclinical cardiac disease in high fat diet-induced obese mice.

Cardiac Stress Test durch Dobutamin induziert und Überwacht durch Herzkatheter in Mäuse

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Reduction in Left Ventricular Wall Stress and Improvement in Function in Failing Hearts using Algisyl-LVR

Injection of Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently used for the first time in patients who had symptomatic heart failure. In all patients, cardiac function of the left ventricle (LV) improved significantly, as manifested by consistent reduction of the LV volume and wall stress. Here we describe this novel treatment procedure and the methods used to quantify its effects on LV wall stress and function.
Algisyl-LVR is a biopolymer gel consisting of Na+-Alginate and Ca2+-Alginate. The treatment procedure was carried out by mixing these two components and then combining them into one syringe for intramyocardial injections. This mixture was injected at 10 to 19 locations mid-way between the base and apex of the LV free wall in patients.
Magnetic resonance imaging (MRI), together with mathematical modeling, was used to quantify the effects of this treatment in patients before treatment and at various time points during recovery. The epicardial and endocardial surfaces were first digitized from the MR images to reconstruct the LV geometry at end-systole and at end-diastole. Left ventricular cavity volumes were then measured from these reconstructed surfaces.
Mathematical models of the LV were created from these MRI-reconstructed surfaces to calculate regional myofiber stress. Each LV model was constructed so that 1) it deforms according to a previously validated stress-strain relationship of the myocardium, and 2) the predicted LV cavity volume from these models matches the corresponding MRI-measured volume at end-diastole and end-systole. Diastolic filling was simulated by loading the LV endocardial surface with a prescribed end-diastolic pressure. Systolic contraction was simulated by concurrently loading the endocardial surface with a prescribed end-systolic pressure and adding active contraction in the myofiber direction. Regional myofiber stress at end-diastole and end-systole was computed from the deformed LV based on the stress-strain relationship.

This article describes procedures for implanting a novel hydrogel in failing hearts and quantifying its effect on left ventricular wall stress and function. These procedures have been successfully applied in dogs and humans.

Reduktion der linksventrikulären Wandspannung und Verbesserung der Funktion in Failing Herzen mit Algisyl-LVR

Injection of  Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat  patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently ...

A Mouse Tumor Model of Surgical Stress to Explore the Mechanisms of Postoperative Immunosuppression and Evaluate Novel Perioperative Immunotherapies

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to the development of metastatic disease in animal models and in cancer patients. Preclinical work from our group and others has demonstrated a profound suppression of innate immune function, specifically NK cells in the postoperative period and this plays a major role in the enhanced development of metastases following surgery. Relatively few animal studies and clinical trials have focused on characterizing and reversing the detrimental effects of cancer surgery. Using a rigorous animal model of spontaneously metastasizing tumors and surgical stress, the enhancement of cancer surgery on the development of lung metastases was demonstrated. In this model, 4T1 breast cancer cells are implanted in the mouse mammary fat pad. At day 14 post tumor implantation, a complete resection of the primary mammary tumor is performed in all animals. A subset of animals receives additional surgical stress in the form of an abdominal nephrectomy. At day 28, lung tumor nodules are quantified. When immunotherapy was given immediately preoperatively, a profound activation of immune cells which prevented the development of metastases following surgery was detected. While the 4T1 breast tumor surgery model allows for the simulation of the effects of abdominal surgical stress on tumor metastases, its applicability to other tumor types needs to be tested. The current challenge is to identify safe and promising immunotherapies in preclinical mouse models and to translate them into viable perioperative therapies to be given to cancer surgery patients to prevent the recurrence of metastatic disease.

A mouse tumor model of surgical stress is used to explore how postoperative immune suppression promotes metastatic disease and to evaluate immunostimulatory perioperative therapies.

Ein Maus-Tumormodell der operativen Belastung zu Entdecken Sie die Mechanismen der postoperative Immunsuppression und Bewerten Novel Perioperative Immuntherapien

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to ...

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the actual molecules towards which the cells migrate remain elusive. This modified invasion assay has been developed to identify targets which drive cell migration and invasion. This technique compares the invasion index under three conditions to determine whether a specific hormone, growth factor, or cytokine plays a role in mediating the invasive potential of a cancer cell. These conditions include i) normal fetal bovine serum (FBS), ii) charcoal-stripped FBS (CS-FBS), which removes hormones, growth factors, and cytokines and iii) CS-FBS + molecule (denoted &#8220;X&#8221;). A significant change in cell invasion with CS-FBS as compared to FBS, indicates the involvement of hormones, cytokines or growth factors in mediating the change. Individual molecules can then be added back to CS-FBS to assay their ability to reverse or rescue the invasion phenotype. Furthermore, two or more factors can be combined to evaluate the additive or synergistic effects of multiple molecules in driving or inhibiting invasion. Overall, this method enables the investigator to determine whether hormones, cytokines, and/or growth factors play a role in cell invasion by serving as chemoattractants or inhibitors of invasion for a particular type of cancer cell or a specific mutant. By identifying specific chemoattractants and inhibitors, this modified invasion assay may help to elucidate signaling pathways that direct cancer cell invasion.

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

This video article describes a modified in vitro method to examine the role of hormones, cytokines and/or growth factors in driving cancer cell invasion.

Eine modifizierte<em&gt; In-vitro-</em&gt; Invasion Assay, um die mögliche Rolle von Hormonen, Cytokinen und / oder Wachstumsfaktoren bei der Vermittlung der Invasion von Krebszellen fest,

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the ...

Glutamate and Hypoxia as a Stress Model for the Isolated Perfused Vertebrate Retina

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal vascular occlusion, retinal detachment, and diabetic retinopathy. It was the object of this study to introduce a standardized stress model for future preclinical therapeutic testing.
Bovine retinas were prepared and perfused with an oxygen saturated standard solution, and the ERG was recorded. After recording stable b-waves, hypoxia (pure N2) or glutamate stress (250 &#181;m glutamate) was exerted for 45 min. To investigate the effects on photoreceptor function alone, 1 mM aspartate was added to obtain a-waves. ERG-recovery was monitored for 75 min.
For hypoxia, a decrease in a-wave amplitude of 87.0% was noted (p &#60;0.01) after an exposition time of 45 min (decrease of 36.5% after the end of the washout p = 0.03). Additionally, an initial decrease in b-wave amplitudes of 87.23% was recorded, that reached statistical significance (p &#60;0.01, decrease of 25.5% at the end of the washout, p = 0.03).
For 250 &#181;m glutamate, an initial 7.8% reduction of a-wave amplitudes (p &#62;0.05) followed by a reduction of 1.9% (p &#62;0.05). A reduction of 83.7% of b-wave amplitudes (p &#60;0.01) was noted; after a washout of 75 min the reduction was 2.3% (p = 0.62). In this study, a standardized stress model is presented that may be useful to identify possible neuroprotective effects in the future.

With this study, we introduce a standardized stress model for the isolated superfused bovine retina for future preclinical therapeutic testing. The effect of either hypoxia (pure N2) or glutamate stress (250 &#181;M glutamate) on retinal function represented by a- and b-wave amplitudes was evaluated.

Glutamat und Hypoxie als Stress-Modell für die isolierten perfundierten Wirbel Retina

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal ...

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Oxidative stress plays a critical role in several degenerative diseases, including age-related macular degeneration (AMD), a pathology that affects ~30 million patients worldwide. It leads to a decrease in retinal pigment epithelium (RPE)-synthesized neuroprotective factors, e.g., pigment epithelium-derived factor (PEDF) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), followed by the loss of RPE cells, and eventually photoreceptor and retinal ganglion cell (RGC) death. We hypothesize that the reconstitution of the neuroprotective and neurogenic retinal environment by the subretinal transplantation of transfected RPE cells overexpressing PEDF and GM-CSF has the potential to prevent retinal degeneration by mitigating the effects of oxidative stress, inhibiting inflammation, and supporting cell survival. Using the Sleeping Beauty transposon system (SB100X) human RPE cells have been transfected with the PEDF and GM-CSF genes and shown stable gene integration, long-term gene expression, and protein secretion using qPCR, western blot, ELISA, and immunofluorescence. To confirm the functionality and the potency of the PEDF and GM-CSF secreted by the transfected RPE cells, we have developed an in vitro assay to quantify the reduction of H2O2-induced oxidative stress on RPE cells in culture. Cell protection was evaluated by analyzing cell morphology, density, intracellular level of glutathione, UCP2 gene expression, and cell viability. Both, transfected RPE cells overexpressing PEDF and/or GM-CSF and cells non-transfected but pretreated with PEDF and/or GM-CSF (commercially available or purified from transfected cells) showed significant antioxidant cell protection compared to non-treated controls. The present H2O2-model is a simple and effective approach to evaluate the antioxidant effect of factors that may be effective to treat AMD or similar neurodegenerative diseases.

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

We present a protocol for the development and use ofan oxidative stress-model by treating retinal pigment epithelial cells with H2O2, analyzing cell morphology, viability, density, glutathione, and UCP-2 level. It is a useful model to investigate the antioxidant effect of proteins secreted by transposon-transfected cells to treat neuroretinal degeneration.

Induktion und Analyse von oxidativem Stress in Dornröschen-Transposon-transfizierten menschlichen retinalen Pigmentepithelzellen

Oxidative stress plays a critical role in several degenerative diseases, including age-related macular degeneration (AMD), a pathology that affects ~30 ...