프로토콜 제안 및 대표자 데이터에 기여 제시카 Ottmar에 감사합니다. 이 프로토콜을 보여주는위한 사브리나 Blackledge, 로렌 Kohoutek 및 Kerisa 쉘튼 특별 감사드립니다.

1. 설정 <ol><li> 모든 연구는 해당 기관 검토위원회 또는 사전 데이터 수집에 인간 주제 검토위원회의 승인을 받아야한다. </li><li> 이상적으로, 두 객실 TSST을 수행할 수 있어야합니다. 편안한 대기실은 TSST를 시작 및 복구 기간 동안 이전에 참가자들에게 제공한다. 별도의 인터뷰 룸은 참신하고 uncontrolability을 소개하는 연설 준비, 음성 성능 및 TSST의 수학 부분 동안 사용해야합니다. </li><li> 참가자는 남부 동맹 면접 및 참가자의 시야에 위치 비디오 또는 오디오 녹음 장비를 대적하게 될 것입 있도록 인터뷰 룸을 마련. 면접은 TSST 동안 스트레스를 증가 TSST 동안 착용하는 연구실 코트를 사용할 수 있어야합니다. 참가자들과 눈을 접촉을 유지하고 TSST 동안 정서적 얼굴 표정을 만드는 삼가해에 면접을 지시한다. </li><li> 조심스럽게 일을 고려전자 연구 질문 (들)에 의존 측정을 선택합니다. : 분석 및 스트레스 반응의 다양한 측정 출판에 대한 지침은 여러 소스 (psychophysiological 조치의 간행물 및 분석에 대한 지침이 Psychophysiological 연구 학회에서 제공하는 제공하는 <a href="http://www.sprweb.org/journal/index.cfm#guidelines" target="_blank">http://www.sprweb.org/journal/index. CFM # 지침은</a> ). 실험의 설계시 이러한 리소스의 5 상담을 권장합니다. </li><li> TSST에 생리적, 심리적 또는 내분비 반응을 기록하는 데 필요한 모든 장비를 설정합니다. 종이와 연필 또는 전자 버전,이 장비는 (이에 제한되지 않음) 전극 및 전자 장비 및 / 또는 소프트웨어의 심장 박동, 심장 혈관 반응, 피부 전도성이나 반응, 눈 깜짝할 새에, 근육 수축 / 톤, 호흡 율을 기록 포함될 수 있습니다 이러한 인보이스 상태 특성 불안과 같은 심리적 악기entory, 6 튜브와 소변, 혈액 또는 타액 샘플을 다른 수집 자료,. 또는 비디오 녹화 장비는이 시연을 위해, 우리는 (ECG) TSST 동안 심장 박동을 측정하는 전극, 그리고의 반복 관리 세 리드 심전도를 사용하는 것입니다 스트레스 전후 심리적 반응을 측정 상태 특성 불안 인벤토리. 우리는 심장 박동을 기록하는 생리 반응을 측정하기위한 기본적인 녹화 시스템 (BioPac MP36 시스템)을 사용합니다. </li><li> 혈액 샘플 (오히려 타액보다) 실험을 통해 수집된되는 경우 수집하는 동안 통증과 고통을 최소화하기 위해 노력하여야한다. 혈액 수집 절차는 추가적인 신체적 혹은 심리적 스트레스, TSST에 혼란함을 주죠 응답을 도입할 수 있습니다. </li><li> 참가자가 도착하면, 연구실로 그들을 환영합니다. 편안하게 정보를 동의하고 좌석 참가자를 구합니다. </li><li> 통계 정보, 심사 정보 또는 additio를 수집실험에 의해 필요한 nal 도착 측정합니다. 참가자는 지난 시간에 음식이나 음료를 (물 이외의) 소비되지 않았음을 확인하면 cortisol 측정을 수집. 금식의 짧은 기간은 분석을 위해 타액 샘플을 수집 것입 경우 권장됩니다. 산성 음식이나 음료 또는 눈에 보이는 오염과 관련된 산도의 변화는 타액 마커의 정확한 측정을 방해할 수 있습니다. 관심 조치가 약물이나 다른 metabolites에 의한 오염 수있다면 소변 독극물 검사가 필요할 수 있습니다. 스트레스 반응 (예 : 약품은, 질병은, 수면, 최근 스트레스 행사, 사회 공포증)이 또한 심사시 참가자 고려되어야 영향을 미칠 수있는 요인에 대한 정보. </li></ol> 2. 사전 응력 측정 <ol><li> 대기실에서 45 분 동안 편안하게 기다릴 수있는 참가자를 지시한다. 넌 정말 EMO를 포함하는 잡지 등 읽기 자료와 참가자를 제공하도록 선택할 수 있습니다tionally 중립적인 콘텐츠 또는이 기간 동안 다른 감정적으로 중립적인 활동. </li><li> 45 분 대기 기간 후 미리 스트레스 불안을 평가하기위한 국가의 특성 불안 인벤토리를 관리 6. 또는, 스트레스, 불안 또는 휴식의 상태 변화를 평가하기위한 다른 악기가 (예 : 시각 아날로그 저울) 관리 수 있습니다. </li><li> &quot;사전 스트레스&quot;타액 샘플을 수집합니다. 물로 그들의 입을 헹굴 수있는 참가자를 지시한다. 참가자에게 빨대의 50~10cm 섹션과 깨끗한 일회용 2.0 ML의 폴리 프로필렌의 병을주세요. 입 바닥에 수영장에 타액이 다음 유리병에 빨대로 타액을 통과 수 있도록 앞으로 자신의 머리를 기울 참가자 지시. 참가자의 타액의 약 1.5-2.0 ML를 수집합니다. 또는 타액을 흡수 치과 심지 (또는 이와 유사한 재료)를 사용하고 타액과 함께 자료를 씹어 또는 포화에 참가자 지시에 의해 수집될 수 있습니다. 경우 POSsible, 개인 정보와 함께 참가자를 제공하기 위해 방을 두십시오. 라벨과 가능한 한 빨리 -20 ° C에서 모든 타액 샘플을 저장합니다. </li><li> 미리 스트레스 생​​리 측정 5 분 기록. </li></ol> 3. TSST <ol><li> 당신은 별도의 인터뷰 룸을 (TSST의 스트레스 효과를 높이기 위해)를 사용해야한다면, 인터뷰 룸에 대기실에서 참가자 가져. </li><li> TSST 연설 준비 기간을 시작하려면 참가자에 다음 스크립트를 읽고 : &quot;이것은 작업의 연설 준비 부분이며 당신은 정신적으로 당신의 이상적인 직업에 대한 좋은 후보 될 이유를 설명하는 다섯 분 연설을 준비하는 것입니다. 당신의 연설은 연설에서 훈련 심사 위원에 의해 촬영하고 검토하게됩니다. 당신은 준비 10 분하고 시간이 지금 시작됩니다. &quot; </li><li> 10 분 연설 준비 기간 동안 생리 측정을 기록합니다. 10 분 동안 디지털 타이머를 설정하고 방을 두십시오. </리&gt; <li> 십분 후, 실험 복을 입고 룸으로 돌아갑니다. 참가자에 다음 스크립트를 참조하십시오 : &quot;이것은 작업의 음성 부분이다 당신은 당신의 이상적인 직업에 대한 좋은 후보 될 이유를 설명하는 연설을 전달하기 위해 아르 당신은 전체 5 분 기간에 대한 이야기​​해야... 시간이 이제 시작됩니다. &quot; 소품 비디오 카메라가 평가하는 / 성능 스트레스를 증가, 지금 켜져 있어야합니다. </li><li> 5 분 스피치 성능 기간 동안 생리 측정을 기록합니다. 참가자가 연설하는 동안 얘기하지 않으면, 그 또는 그녀가 20 초 동안 묵비권을 행사할 수 있습니다. 그 또는 그녀가 말할 다시 시작하지 않는 경우, 그들을 지시하여 계속해서 말을하는 참가자 프롬프트 : &quot;당신은 아직도 남아있는 시간이.&quot; </li><li> 5 분 연설 성능 기간의 끝에, 참가자에 다음 스크립트를 읽고 : &quot;당신이 순차적으로 1022에서 숫자 13 뺄하라는 메시지가 나타납니다 이러한 작업의 마지막 다섯 분 수학 부분 동안 것입 구두.정가 크게 대답을보고하고, 실수가 이루어졌다하더라도 1022부터 다시 시작하라는 메시지가 있습니다. . 시간은 이제 시작 &quot;참가자가 실수를하게되면, 그들을 프롬프트 :&quot;잘못된 것입니다 즉, 1022에서 다시 시작하십시오 &quot;5 분 디지털 타이머를 설정합니다.. </li><li> 5 분 수학 성능 기간 동안 생리 측정을 기록합니다. </li><li> TSST의 수학 성능 기간의 끝에, &quot;포스트 스트레스&quot;타액 샘플을 수집합니다. </li><li> 후 스트레스 상태 특성 불안 재고를 관리할 수 있습니다. </li></ol> 4. 후 스트레스 복구 측정 <ol><li> 원래 대기실 참가자를 반환합니다. 첫 번째 복구 기간 동안, 20 분 동안 편안하게 기다릴 수있는 참가자를 지시합니다. 20 분 디지털 타이머를 설정하고 방을 두십시오. </li><li> 20 분정도 후에 대기실로 돌아가 &quot;복구 1&quot;타액 샘플을 수집합니다. </li><li> 두 번째 복구 기간 동안, 다시 20 분 동안 편안하게 기다릴 수있는 참가자 지시. 20 분 디지털 타이머를 설정하고 방을 두십시오. </li><li> 20 분정도 후에 대기실로 돌아가 &quot;복구 2&quot;타액 샘플을 수집합니다. </li><li> &quot;복구&quot;상태 특성 불안 인벤토리를 완료하기 위해 참가자를 지시한다. </li><li> 실험의 본질에 대해서보고 참가자. 자신의 성능 기록하고 음성이나 수학의 성능에 대한 분석이 진행되지 않습니다 것이 아니라 그 참가자에게 알리십시오. 그들이 제시되었다있는 작업이 부당하게 어려운되었으며 참가자의 적성이나 능력에 반영하지 않는 참가자에게 설명하십시오. </li></ol> 5. 데이터 분석 <ol><li> 심리 조치를 분석하기 위해서는, 사전 응력, 포스트 스트레스 및 복구 시간 지점에서 각 국가의 특성 불안 재고를 점수. 6 </li><li> 생리 조치를 분석하려면, &quot;&quot;, &quot;프리 스트레스&quot; &quot;연설의 성능&quot;과 &quot;m를 음성 준비 5 분마다 의미 심장 박동 점수를 계산TSST 기간. 또는 계산은 TSST 동안 이산 시간 지점에서 TSST 또는 측정 심장 박동의 각 분에 대한 점수를 의미 &quot;ath. </li><li> neuroendocrine 조치 상용 EIA 키트를 사용하여 호르몬 농도에 대한 분석 타액 샘플을 분석한다. </li></ol> 6 선택 사항 :. 추가 타액 Cortisol 분석 프로토콜 정보 (Salimetrics 타액 cortisol 분석 키트 삽입에서 재현) <ol><li> 상온 모든 타액 분석 키트 시약을 가져와. </li><li> 키트 지침에 따라 버퍼를 씻어 준비합니다. </li><li> 중복 적절한 우물에 플레이트 레이아웃과 표준 및 컨트롤의 피펫 25 μL를 결정합니다. </li><li> 15 분 동안 1,500 XG (@ 3,000 RPM)에서 해동의 타액 샘플, 와동 및 원심 분리기. </li><li> 플레이트에 적절한 우물 (중복의)에 centrifuged 샘플에서 투명한 액체의 피펫 25 μL. </li><li> 모든 우물에 효소 활용 및 피펫 200 μL를 준비합니다. </li&gt; <li> 500 rpm으로 5 분 접시를 믹스하여 추가 55분에 대한 품어. </li><li> 세척 버퍼로 4 번 세척 접시 점이 되리. </li><li> 멀티채널 피펫을 사용하여 각 잘 200 μL tetramethylbenzidine (TMB) 솔루션을 추가합니다. </li><li> 500 RPM에서 5 분 동안 접시를 믹스하고 추가 25 분 어둠 속에 품어. </li><li> 50 μL 정지 각 잘하는 솔루션과 반응을 중지 500 RPM에서 3 분 정도 혼합을 추가합니다. </li><li> 접시 바​​닥이 중지 솔루션을 추가 10 분 이내에 450 nm의에서 판 Reader에서 접시를 청소 읽고 닦아주십시오. </li><li> cortisol 농도를 계산하려면 모든 중복 우물에 대한 평균 광 밀도를 계산합니다. 제로, 표준 컨트롤과 샘플 우물의 평균 광 밀도에서 비 특정 바인딩 우물의 평균 광 밀도를 빼기. </li><li> 단언 이러한 우물의 평균 광학 밀도 (B)을 나누어 각 표준 제어 및 샘플 행 퍼센트 (B / 보)을 계산제로 우물 (보)의 세 광학 밀도. 물류 수있는 소프트웨어를 사용하여 보간하여 컨트롤과 샘플의 농도를 결정합니다. </li></ol> 7. 대표 결과 : 여기에 제시 대표적인 데이터는 건강한 성인 남자 참가자와 함께 오후 동안 우리가 실험실에서 실시했던 문학 두 ​​연구의 검토 대상에서 컴파일됩니다. 이러한 데이터는 약이 문서에서 제시한 프로토콜을 사용하여 찾을 수있는 결과를 나타내는 것입니다. , 심장 박동 (그림 3) 및 타액 cortisol의 농도 (그림 4);이 TSST 프로토콜 (그림 1) 자기보고 불안의 증가 (그림 2와 같은 상태 특성 불안 인벤토리로 측정) 유도. 그림 1에 설명된 실험 프로토콜은 다양한 측정이 TSST와 데이터 수집 세션 동안 만들 수있는지를 한 예제를 제공하기위한 것입니다. measuremen의 타이밍TS와 다른 조치의 포함은 구체적인 연구 질문에 의해 결정됩니다. 불안 및 / 또는 스트레스 반응, 이러한 조치에 무딘 또는 감쇠 증가가 예측된다 절감하기위한 것일 뿐이므로 이러한 개입을 사용하는 경우. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig1.jpg" /> 그림 1. 실험 프로토콜 참고 : 모금 사회 스트레스 테스트 (TSST), 상태 특성 불안 인벤토리 (왠), 5 분 사전 스트레스 기간 (PS), 10 분 예상 스트레스 기간 (연설 준비) (AS), 5 분 스피치 기간. (S), 5 분 수학 기간 (M). <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig2.jpg" /> 그림 2. 대표 상태 불안 점수. 주 : 상태 불안 점수가 상태 특성 불안 인벤토리 (왠)의 20 iten 상태 불안 측정으로부터 계산 대표 점수는 우리가 실험실에서 수집 문학 출판 데이터를 반영합니다.. 그림 3. 대표 심장 박동 데이터 참고 :.. 분당 비트 (BPM)의 심장 박동 대표 값은 우리가 실험실에서 수집 문학 출판 데이터를 반영합니다. <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig4.jpg" /> 그림 4. 대표 타액 cortisol 데이터 참고 :.. UL / DL에 Cortisol 농도 대표 값 우리가 실험실에서 수집 문학 출판 데이터를 반영합니다.

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관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

이 문서에서는, 우리는 건강한 지원자에서 모금 사회 스트레스 테스트를 실시하는 방법을 보여주었다. TSST는 심리적, 생리 및 neuroendocrine 조치에 강력하고 안정적​​인 증가를 유도 표준 실험실 사회적 스트레스 요인이다. TSST는 추위 압착기 시험 또는 밟아 돌리는 바퀴의 도보에 물리적 스트레스에 대한 유용한 대안이며, 평가하는 관객의 존재의의 성능보다 자연 심리적 스트레스를 재현. <p ...

<table border="1"><tbody><tr><th> 장비 / 공급의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> BSL 정신 생리학 시스템, MP36 데이터 수집 유닛과 세 리드 심전도 전극을 포함 맥 OS </td><td> BioPac 시스템 주식 회사 </td><td> BSLPSY - M </td></tr><tr><td> 상태 특성 불안 인벤토리 </td><td> 마음 가든, 주식 회사 </td><td> 침착한 - B </td></tr><tr><td> 타액 Cortisol 효소 단백질 분석 키트 </td><td> Salimetrics </td><td> 1-3002 </td></tr><tr><td> 2.0 ML 폴리 프로필렌 튜브 </td><td> 피셔 과학 </td><td> 05 40B 146 </td></tr><tr><td> BioRad Microplate 리더, Microplate Manager 소프트웨어와 함께 모델 680, </td><td> BioRad </td><td> 플레이트 리더 : 168 1000 소프트웨어 : 1,706,800 </td></tr></tbody></table>

the trier social stress test protocol for inducing psychological stress

이 문서는 실험실 환경에서 사용하기 위해 심리적 스트레스 프로토콜을 보여줍니다. 연구자들은 건강과 질병의 스트레스 반응의 생물 학적 경로를 연구하도록 프로토콜은 스트레스와 불안에 연구의 진행에 기본입니다. 한 다수의 프로토콜이 연구실에 스트레스 반응을 유도하는 존재이지만, 많은 방치는 자연 컨텍스트 또는 제공하는 사회적, 심리적 스트레스의 측면을 통합합니다. 심리적 스트레스 프로토콜, 메타 분석은 모금 사회 스트레스 테스트 (TSST)는 TSST의 원래 설명에 스트레스 호르몬 반응 2. 연구에 가장 유용하고 적절한 표준 프로토콜입니다 것을 제시, 연구자들은 절차를 설계하고 평가하는 모색 건강한 자원 봉사자의 대부분의 신뢰할 수있는 스트레스 반응. 3 유도 능력이 연구자들은 심장 박동, 혈압과 여러 내분비 스트레스 m의 고도를 발견TSST에 대응 arkers (심리적 스트레스)가 식염수 주사 (물리적 스트레스)에 비해. 3 TSST가 여러 연구 그룹의 요구를 충족하도록 수정되었습니다 있지만, 그것은 일반적으로 도착시 대기 기간, 예상 음성으로 구성되어 있습니다 하나 이상의 복구 기간 다음에 준비, 음성 성능 및 언어적 연산 성능 기간. TSST는 연설을 준비하고 전달하기 위해 참가자 있어야하고, 말로 사회적 평가하는 관객의 존재에 도전 산술 문제에 대응 3. 사회 평가 및 uncontrollability가 TSST에 의한 응력 유도의 핵심 구성 요소로 확인되었습니다. 4를 위해 사용 10 년간 TSST의 목표는 체계적으로 작업하는 동안 (고전력 증폭기) hypothalamic - 뇌하수체 - 부신이나 교감 - 부신 - 골수의 (SAM) 축의 반응, 불안 및 활성화의 차이를 측정하기 위해서는 스트레스 반응을 유도하는 것입니다 1. Researc그녀는 일반적으로 자기보고 불안의 변화, 생리 조치 (예 : 심장 박동), 및 / 또는 TSST에 대응 neuroendocrine 인덱스를 (스트레스 호르몬 cortisol 등) 평가. 대부분의 조사는 혈액 수집 기술의 혼란함을 주죠 스트레스를 줄이기 위해 혈액 샘플링 대안으로 cortisol과 알파 - 아밀라아제 (자율 신경계 활성화의 마커)와 같은 스트레스 마커를위한 타액 표본을 채택했습니다. TSST를 완료 개인 경험 변화 이외에, 연구자들은 다른 치료 그룹 (예 : 임상 비해 건강한 통제 샘플) 또는의 효과 스트레스 줄이고 개입을 사이에 변화를 비교할 수 있습니다 1.

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The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

이 문서는 단일 참가자 이내 또는 그룹 간의 스트레스로 심리적, 생리 및 neuroendocrine 반응을 측정하는 연구를 수 있도록 참가자의 심리적 스트레스를 유발을위한 프로토콜을 설명합니다.

심리적 스트레스를 유발을위한 모금 사회 스트레스 테스트 프로토콜

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

the-trier-social-stress-test-protocol-for-inducing-psychological

Research

JoVE Journal

Medicine

56.0K 조회수.  Northern Arizona University. 이 문서는 단일 참가자 이내 또는 그룹 간의 스트레스로 심리적, 생리 및 neuroendocrine 반응을 측정하는 연구를 수 있도록 참가자의 심리적 스트레스를 유발을위한 프로토콜을 설명합니다.

비디오: The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

Using Visual and Narrative Methods to Achieve Fair Process in Clinical Care

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is respect for patient's values, preferences, and expressed needs. Yet specific approaches to gaining this understanding and translating it to quality care in the clinical setting are lacking. From a patient perspective quality is not a simple concept but is best understood in terms of five dimensions: technical outcomes; decision-making efficiency; amenities and convenience; information and emotional support; and overall patient satisfaction. Failure to consider quality from this five-pronged perspective results in a focus on medical outcomes, without considering the processes central to quality from the patient's perspective and vital to achieving good outcomes. In this paper, we argue for applying the concept of fair process in clinical settings. Fair process involves using a collaborative approach to exploring diagnostic issues and treatments with patients, explaining the rationale for decisions, setting expectations about roles and responsibilities, and implementing a core plan and ongoing evaluation. Fair process opens the door to bringing patient expertise into the clinical setting and the work of developing health care goals and strategies. This paper provides a step by step illustration of an innovative visual approach, called photovoice or photo-elicitation, to achieve fair process in clinical work with acquired brain injury survivors and others living with chronic health conditions. Applying this visual tool and methodology in the clinical setting will enhance patient-provider communication; engage patients as partners in identifying challenges, strengths, goals, and strategies; and support evaluation of progress over time. Asking patients to bring visuals of their lives into the clinical interaction can help to illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships with patients living with chronic conditions such as brain injury, and identify patient-centered goals and possibilities for healing. The process illustrated here can be used by clinicians, (primary care physicians, rehabilitation therapists, neurologists, neuropsychologists, psychologists, and others) working with people living with chronic conditions such as acquired brain injury, mental illness, physical disabilities, HIV/AIDS, substance abuse, or post-traumatic stress, and by leaders of support groups for the types of patients described above and their family members or caregivers.

This paper illustrates an innovative visual approach (photovoice or photo-elicitation) to achieve fair process in clinical care for patients living with chronic health conditions, illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships, and identify patient-centered goals and possibilities for healing.

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is ...

연구

의학

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson's Disease

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our understanding of the mechanisms underlying parkinsonian symptoms, since it recapitulates the changes in basal ganglia circuitry and pharmacology observed in parkinsonian patients1-4. However, the precise cellular and molecular changes occurring at cortico-striatal synapses of the output pathways within the striatum, which is the major input region of the basal ganglia remain elusive, and this is believed to be site where pathological abnormalities underlying parkinsonian symptoms arise3,5.
In PD, understanding the mechanisms underlying changes in basal ganglia circuitry following degeneration of the nigro-striatal pathway has been greatly advanced by the development of bacterial artificial chromosome (BAC) mice over-expressing green fluorescent proteins driven by promoters specific for the two striatal output pathways (direct pathway: eGFP-D1; indirect pathway: eGFP-D2 and eGFP-A2a)8, allowing them to be studied in isolation. For example, recent studies have suggested that there are pathological changes in synaptic plasticity in parkinsonian mice9,10. However, these studies utilised juvenile mice and acute models of parkinsonism. It is unclear whether the changes described in adult rats with stable 6-OHDA lesions also occur in these models. Other groups have attempted to generate a stable unilaterally-lesioned 6-OHDA adult mouse model of PD by lesioning the medial forebrain bundle (MFB), unfortunately, the mortality rate in this study was extremely high, with only 14% surviving the surgery for 21 days or longer11. More recent studies have generated intra-nigral lesions with both a low mortality rate &gt;80% loss of dopaminergic neurons, however expression of L-DOPA induced dyskinesia11,12,13,14 was variable in these studies. Another well established mouse model of PD is the MPTP-lesioned mouse15. Whilst this model has proven useful in the assessment of potential neuroprotective agents16, it is less suitable for understanding mechanisms underlying symptoms of PD, as this model often fails to induce motor deficits, and shows a wide variability in the extent of lesion17, 18.
Here we have developed a stable unilateral 6-OHDA-lesioned mouse model of PD by direct administration of 6-OHDA into the MFB, which consistently causes &gt;95% loss of striatal dopamine (as measured by HPLC), as well as producing the behavioural imbalances observed in the well characterised unilateral 6-OHDA-lesioned rat model of PD. This newly developed mouse model of PD will prove a valuable tool in understanding the mechanisms underlying generation of parkinsonian symptoms.

A protocol for performing unilateral 6-OHDA lesions of the medial forebrain bundle in mice is described. This method has a low mortality rate (13.3 %) with 89% of the surviving animals showing &#62;95% loss of striatal dopamine and 90.63&#177;-4.02 % ipsiversive rotational bias towards the side of the lesion.

파킨슨병의 일방적-6-OHDA lesioned 마우스 모델의 개발

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our ...

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce atherosclerosis (reviewed in 1 and 2). The role of shear stress has been extensively studied in vitro investigating the influence of flow dynamics on cultured endothelial cells 1,3,4 and in vivo in larger animals and humans 1,5,6,7,8. However, highly reproducible small animal models allowing systematic investigation of the influence of shear stress on plaque development are rare. Recently, Nam et al. 9 introduced a mouse model in which the ligation of branches of the carotid artery creates a region of low and oscillatory flow. Although this model causes endothelial dysfunction and rapid formation of atherosclerotic lesions in hyperlipidemic mice, it cannot be excluded that the observed inflammatory response is, at least in part, a consequence of endothelial and/or vessel damage due to ligation.
In order to avoid such limitations, a shear stress modifying cuff has been developed based upon calculated fluid dynamics, whose cone shaped inner lumen was selected to create defined regions of low, high and oscillatory shear stress within the common carotid artery 10. By applying this model in Apolipoprotein E (ApoE) knockout mice fed a high cholesterol western type diet, vascular lesions develop upstream and downstream from the cuff. Their phenotype is correlated with the regional flow dynamics 11 as confirmed by in vivo Magnetic Resonance Imaging (MRI) 12: Low and laminar shear stress upstream of the cuff causes the formation of extensive plaques of a more vulnerable phenotype, whereas oscillatory shear stress downstream of the cuff induces stable atherosclerotic lesions 11. In those regions of high shear stress and high laminar flow within the cuff, typically no atherosclerotic plaques are observed.
 
In conclusion, the shear stress-modifying cuff procedure is a reliable surgical approach to produce phenotypically different atherosclerotic lesions in ApoE-deficient mice.

The constricting cuff presented in this article is designed to induce atherosclerosis in the murine common carotid artery. Due to the conical shape of its inner lumen the implanted cuff generates well-defined regions of low, high and oscillatory shear stress triggering the development of atherosclerotic lesions of different inflammatory phenotypes.

마우스의 전단 응력 유발 죽상 경화증을 실행을위한 경동맥 혈압계의 주입

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

PTSD의, 신경 Hematologic, 그리고 행동 상관 관계를 누설하는 행위에 대해서는 동물 모델에서 생체

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the arteries (&beta;2). When systemically administered, it increases cardiac demand. Thus, dobutamine unmasks abnormal rhythm or ischemic areas potentially at risk of infarction. 
Monitoring of heart function during a cardiac stress test can be performed by either ecocardiography or cardiac catheterization. The latter is an invasive but more accurate and informative technique that the former.
Cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization accomplished as described here allows, in a single experiment, the measurement of the following hemodynamic parameters: heart rate (HR), systolic pressure, diastolic pressure, end-diastolic pressure, maximal positive pressure development (dP/dtmax) and maximal negative pressure development (dP/dtmin), at baseline conditions and under increasing doses of dobutamine.
As expected, in normal mice we observed a dobutamine dose-related increase in HR, dP/dtmax and dP/dtmin. Moreover, at the highest dose tested (12 ng/g/min) the cardiac decompensation of high fat diet-induced obese mice was unmasked.

We describe the protocol to perform a cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in normal mice. Also we show its application to unmask subclinical cardiac disease in high fat diet-induced obese mice.

심장 스트레스 테스트 Dobutamine에 의해 유도와 마우스의 심장 Catheterization에 의해 모니터링

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Reduction in Left Ventricular Wall Stress and Improvement in Function in Failing Hearts using Algisyl-LVR

Injection of Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently used for the first time in patients who had symptomatic heart failure. In all patients, cardiac function of the left ventricle (LV) improved significantly, as manifested by consistent reduction of the LV volume and wall stress. Here we describe this novel treatment procedure and the methods used to quantify its effects on LV wall stress and function.
Algisyl-LVR is a biopolymer gel consisting of Na+-Alginate and Ca2+-Alginate. The treatment procedure was carried out by mixing these two components and then combining them into one syringe for intramyocardial injections. This mixture was injected at 10 to 19 locations mid-way between the base and apex of the LV free wall in patients.
Magnetic resonance imaging (MRI), together with mathematical modeling, was used to quantify the effects of this treatment in patients before treatment and at various time points during recovery. The epicardial and endocardial surfaces were first digitized from the MR images to reconstruct the LV geometry at end-systole and at end-diastole. Left ventricular cavity volumes were then measured from these reconstructed surfaces.
Mathematical models of the LV were created from these MRI-reconstructed surfaces to calculate regional myofiber stress. Each LV model was constructed so that 1) it deforms according to a previously validated stress-strain relationship of the myocardium, and 2) the predicted LV cavity volume from these models matches the corresponding MRI-measured volume at end-diastole and end-systole. Diastolic filling was simulated by loading the LV endocardial surface with a prescribed end-diastolic pressure. Systolic contraction was simulated by concurrently loading the endocardial surface with a prescribed end-systolic pressure and adding active contraction in the myofiber direction. Regional myofiber stress at end-diastole and end-systole was computed from the deformed LV based on the stress-strain relationship.

This article describes procedures for implanting a novel hydrogel in failing hearts and quantifying its effect on left ventricular wall stress and function. These procedures have been successfully applied in dogs and humans.

Algisyl-LVR을 사용하여 마음을 실패의 기능에서 왼쪽 심실 벽 스트레스와 개선의 감소

Injection of  Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat  patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently ...

A Mouse Tumor Model of Surgical Stress to Explore the Mechanisms of Postoperative Immunosuppression and Evaluate Novel Perioperative Immunotherapies

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to the development of metastatic disease in animal models and in cancer patients. Preclinical work from our group and others has demonstrated a profound suppression of innate immune function, specifically NK cells in the postoperative period and this plays a major role in the enhanced development of metastases following surgery. Relatively few animal studies and clinical trials have focused on characterizing and reversing the detrimental effects of cancer surgery. Using a rigorous animal model of spontaneously metastasizing tumors and surgical stress, the enhancement of cancer surgery on the development of lung metastases was demonstrated. In this model, 4T1 breast cancer cells are implanted in the mouse mammary fat pad. At day 14 post tumor implantation, a complete resection of the primary mammary tumor is performed in all animals. A subset of animals receives additional surgical stress in the form of an abdominal nephrectomy. At day 28, lung tumor nodules are quantified. When immunotherapy was given immediately preoperatively, a profound activation of immune cells which prevented the development of metastases following surgery was detected. While the 4T1 breast tumor surgery model allows for the simulation of the effects of abdominal surgical stress on tumor metastases, its applicability to other tumor types needs to be tested. The current challenge is to identify safe and promising immunotherapies in preclinical mouse models and to translate them into viable perioperative therapies to be given to cancer surgery patients to prevent the recurrence of metastatic disease.

A mouse tumor model of surgical stress is used to explore how postoperative immune suppression promotes metastatic disease and to evaluate immunostimulatory perioperative therapies.

수술 후 면역 억제의 메커니즘을 탐색 소설 수술 전후 면역 요법을 평가하기 위해 수술 스트레스의 마우스 종양 모델

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to ...

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the actual molecules towards which the cells migrate remain elusive. This modified invasion assay has been developed to identify targets which drive cell migration and invasion. This technique compares the invasion index under three conditions to determine whether a specific hormone, growth factor, or cytokine plays a role in mediating the invasive potential of a cancer cell. These conditions include i) normal fetal bovine serum (FBS), ii) charcoal-stripped FBS (CS-FBS), which removes hormones, growth factors, and cytokines and iii) CS-FBS + molecule (denoted &#8220;X&#8221;). A significant change in cell invasion with CS-FBS as compared to FBS, indicates the involvement of hormones, cytokines or growth factors in mediating the change. Individual molecules can then be added back to CS-FBS to assay their ability to reverse or rescue the invasion phenotype. Furthermore, two or more factors can be combined to evaluate the additive or synergistic effects of multiple molecules in driving or inhibiting invasion. Overall, this method enables the investigator to determine whether hormones, cytokines, and/or growth factors play a role in cell invasion by serving as chemoattractants or inhibitors of invasion for a particular type of cancer cell or a specific mutant. By identifying specific chemoattractants and inhibitors, this modified invasion assay may help to elucidate signaling pathways that direct cancer cell invasion.

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

This video article describes a modified in vitro method to examine the role of hormones, cytokines and/or growth factors in driving cancer cell invasion.

수정<em&gt; 시험관</em&gt; 침공 분석은 호르몬, 중재 암 세포 침략의 사이토 카인 및 / 또는 성장 인자의 잠재적 인 역할을 확인하는

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the ...

DTI of the Visual Pathway - White Matter Tracts and Cerebral Lesions

DTI is a technique that identifies white matter tracts (WMT) non-invasively in healthy and non-healthy patients using diffusion measurements. Similar to visual pathways (VP), WMT are not visible with classical MRI or intra-operatively with microscope. DTI will help neurosurgeons to prevent destruction of the VP while removing lesions adjacent to this WMT. We have performed DTI on fifty patients before and after surgery between March 2012 to January 2014. To navigate we used a 3DT1-weighted sequence. Additionally, we performed a T2-weighted and DTI-sequences. The parameters used were, FOV: 200 x 200 mm, slice thickness: 2 mm, and acquisition matrix: 96 x 96 yielding nearly isotropic voxels of 2 x 2 x 2 mm. Axial MRI was carried out using a 32 gradient direction and one b0-image. We used Echo-Planar-Imaging (EPI) and ASSET parallel imaging with an acceleration factor of 2 and b-value of 800 s/mm&#178;. The scanning time was less than 9 min.
The DTI-data obtained were processed using a FDA approved surgical navigation system program which uses a straightforward fiber-tracking approach known as fiber assignment by continuous tracking (FACT). This is based on the propagation of lines between regions of interest (ROI) which is defined by a physician. A maximum angle of 50, FA start value of 0.10 and ADC stop value of 0.20 mm&#178;/s were the parameters used for tractography.
There are some limitations to this technique. The limited acquisition time frame enforces trade-offs in the image quality. Another important point not to be neglected is the brain shift during surgery. As for the latter intra-operative MRI might be helpful. Furthermore the risk of false positive or false negative tracts needs to be taken into account which might compromise the final results.

Diffusion tensor imaging (DTI) was performed to try to depict the major parts of the visual pathway. The goal was to use an FDA approved standard commercial workstation which could be used for everyday routine in order to try to reduce postoperative damage of the visual pathway in the patients.

시각 통로의 DTI - 흰색 물질 책자 및 뇌 병변

DTI is a technique that identifies white matter tracts (WMT) non-invasively in healthy and non-healthy patients using diffusion measurements. Similar to ...

Glutamate and Hypoxia as a Stress Model for the Isolated Perfused Vertebrate Retina

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal vascular occlusion, retinal detachment, and diabetic retinopathy. It was the object of this study to introduce a standardized stress model for future preclinical therapeutic testing.
Bovine retinas were prepared and perfused with an oxygen saturated standard solution, and the ERG was recorded. After recording stable b-waves, hypoxia (pure N2) or glutamate stress (250 &#181;m glutamate) was exerted for 45 min. To investigate the effects on photoreceptor function alone, 1 mM aspartate was added to obtain a-waves. ERG-recovery was monitored for 75 min.
For hypoxia, a decrease in a-wave amplitude of 87.0% was noted (p &#60;0.01) after an exposition time of 45 min (decrease of 36.5% after the end of the washout p = 0.03). Additionally, an initial decrease in b-wave amplitudes of 87.23% was recorded, that reached statistical significance (p &#60;0.01, decrease of 25.5% at the end of the washout, p = 0.03).
For 250 &#181;m glutamate, an initial 7.8% reduction of a-wave amplitudes (p &#62;0.05) followed by a reduction of 1.9% (p &#62;0.05). A reduction of 83.7% of b-wave amplitudes (p &#60;0.01) was noted; after a washout of 75 min the reduction was 2.3% (p = 0.62). In this study, a standardized stress model is presented that may be useful to identify possible neuroprotective effects in the future.

With this study, we introduce a standardized stress model for the isolated superfused bovine retina for future preclinical therapeutic testing. The effect of either hypoxia (pure N2) or glutamate stress (250 &#181;M glutamate) on retinal function represented by a- and b-wave amplitudes was evaluated.

고립 된 관류 척추 동물의 망막에 대한 스트레스 모델로 글루타민산과 저산소증

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal ...