Diese Arbeit wurde von der Deutschen Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, Deutschland, C7 &amp; C6-Projekte) und dem IZKF Münster (Core-Einheit Smap) unterstützt. Die Autoren bedanken sich bei Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich und Roman Priebe für hervorragende technische Assistenz und Daniel Burkert und Sven Fatum zur Herstellung Radiotracern.

1. Spenderorgan Erholung <ol><li> Richten Sie die stereotaktische Mikroskop Rekord Gewicht der 8-10 Wochen alten Ratte (Spender und Empfänger Körpergewicht sollte übereinstimmen). </li><li> Anesthetize der Spender Ratte (Lewis Brown Norway F1, LBN F1) mit Sauerstoff / Isofluran Inhalation (Isofluran 4% / 2 L / min Sauerstoff). Aufrechterhaltung der Narkose durch Absenken Isofluran auf 2-2,5%. </li><li> Setzen Sie den narkotisierten Ratte auf dem OP-Pad. Fix der Ratte Extremitäten mit Klebeband auf dem Pad und gelten Augensalbe (Bepanthen, Bayer), um die Ratte in die Augen. </li><li> Rasur und desinfizieren den Bauch der Ratte und führen Sie einen ventralen Mittellinie Schnitt vom Schambein bis zum kaudalen Rand der Leber. Setzen Sie die linke Niere und ihre Schiffe durch vorsichtiges Bewegen des Darms auf die rechte Seite. Legen Sie eine dünne Gaze über der linken Niere und befeuchten es mit erwärmtem isotonischer Kochsalzlösung, um ein Austrocknen zu verhindern. </li><li> Sorgfältig sezieren das Fettgewebe mit Dumont abgewinkelte Spitze Pinzetten (Dumont SS-45 Pinzetten Inox Medical, Fine Science Tools Kat.Nu. 11203-25) umhüllt den linken Harnleiter. Vermeiden Sie direkten Kontakt mit den Harnleiter, sondern mobilisieren mit hinreichender umliegenden Fettgewebe. </li><li> Trennen Sie die linke Nierenvene aus der Nierenarterie mit Dumont gebogener Spitze Pinzette. Entfernen Sie alle Fett-und Bindegewebe von beiden Schiffen und ätzen die Nebennieren und Hoden-Schiffe. </li><li> Dissect Aorta und untere Hohlvene (IVC) oberhalb und unterhalb der Kreuzung mit der linken Nierenarterie und Vene, bzw., und brennen Sie alle abgehenden Arterien. </li><li> Klemmen Sie die Nebenniere Aorta mit einem mikrochirurgischen Klemme (Micro Serrefines, Fine Science Tools Kat.Nu. 18055-04) über der linken Nierenarterie, so nahe wie möglich an der A. mesenterica superior. Ligieren der infrarenalen Aorta mit chirurgischer Seide (5-0, Vömel, Art.-Nr. 14739) ca. 5 mm unterhalb der linken Nierenarterie. </li><li> Ligieren die infrarenale IVC mit chirurgischer Seide (5-0, Vömel) und klemmen Sie die Nebenniere IVCmit einem mikrochirurgischen Klemme (Micro Serrefines, Fine Science Tools Kat.Nu. 18055-03). </li><li> Schneiden Sie die Nierenvene so nah wie möglich an der IVC mit einer feinen Schere (Iris Scissors - ToughCut Gerade 11,5 cm, Fine Science Tools Kat.Nu. 14058-11). </li><li> Langsam perfundieren die Niere in situ mit 2 ml eiskaltem HTK Perfusionslösung (Custodiol HTK, Dr. Franz Köhler Chemie), indem Sie eine Kanüle (27G Microlance 3 ¾, BD, Kat. Nr. 302200) in der infrarenalen Aorta. Bestätigen Sie, dass die Nieren Farbwechsel (jetzt olive-getönt). </li><li> Zuerst durchschneiden die Nebenniere Aorta und dann den infrarenalen Aorta und schließlich die Harnleiter so nahe wie möglich an der Harnblase. </li><li> Entfernen Sie die Niere und seine Gefäßversorgung zusammen mit dem Harnleiter und Speicher in HTK Perfusion Lösung auf Eis. </li><li> Euthanize den Spender Ratte durch Entfernen der Gefäßklemmen und aufeinander Exzision des Herzens unter Narkose. </li></ol> 2. Empfänger Vorbereitung und Transplantationtion <ol><li> Richten Sie die stereotaktische Mikroskop Rekord Gewicht der Ratte. </li><li> Anesthetize den Empfänger Ratte (Lewis) mit 4% Isofluran. Aufrechterhaltung der Narkose durch Absenken Isofluran auf 2-2,5%. </li><li> Setzen Sie den narkotisierten Ratte auf dem OP-Pad. Fix der Ratte Extremitäten mit Klebeband auf dem Pad und gelten Augensalbe, um die Ratte Mätzchen. Überwachung und Kontrolle der Körpertemperatur mit einer rektale Temperatursensor und ein wärmendes Polster. Während der Operation wiederholt steuern Temperatur, Atmung und Herzfrequenz des Tieres. </li><li> Rasur und desinfizieren den Bauch und führen Sie einen ventralen Mittellinie Schnitt vom Schambein bis zum kaudalen Rand der Leber. Mit einem Skalpell forcutting die Haut, um Hautverletzungen zu minimieren. Setzen Sie die linke Niere und ihre Schiffe durch Bewegen des Darms auf die rechte Seite. </li><li> Entfernen Sie vorsichtig die Nierenkapsel mit Dumont gebogener Spitze Pinzette und Wattestäbchen. </li><li> Verschließen Sie die linke Nierenarterie, Vene und Harnleiter in der Nähe der NierenHilus mit zwei Ligationen mit chirurgischen Faden (Mersilene 4-0, Ethicon, Katze. Nr. EH6732H). Steuerverwaltung der größere Teil der Niere, so dass nur die Nierenhilus. Reinigen Sie die Schnittfläche mit Wattestäbchen und überprüfen Blutungen. Einen weiteren hinzufügen Ligatur, wenn nötig. </li><li> Sorgfältig unverblümt sezieren durch das Bindegewebe für den infrarenalen Aorta und Vena Cava auf der Schwanzflosse Website mit Wattestäbchen. </li><li> Trennen Sie alle sichtbaren Nerven von der infrarenalen Aorta und Vena Cava mit Dumont gebogener Spitze Pinzette. </li><li> Vorsichtig durch das Bindegewebe Blatt zwischen der infrarenalen Aorta und Vena cava zerlegen, wobei zwei Öffnungen von 2-4 mm Länge: Die erste unterhalb der Verzweigung der Hodengefäße, und die zweite über der Verzweigung der A. iliaca Schiffe. Cauterize die iliolumbalen Arterien und Venen in between. </li><li> Zeichnen Sie einen einzigen chirurgischen Faden (Mersilene 0;. Ethicon, Katze no.EH6665E) durch jede der beiden Öffnungen. Mit diese Fäden ziehen infrarenaleAorta und Vena cava sanft auf der rechten Seite des Tieres, um den Zugang zu den Gefäßen Verzweigung auf der dorsalen Seite zu erlangen. Cauterize einem dieser Schiffe zwischen den beiden Öffnungen und entfernen Sie die chirurgische Fäden danach. </li><li> Anschließend verschließen Aorta und IVC durch Uhrzeigersinn Anwendung von vier mikrochirurgischen Klemmen (Micro Serrefines, Fine Science Tools Kat.Nu. 18055-04) beginnend an der oberen Öffnung mit der Aorta und endend mit der Vena Cava an der oberen Öffnung (Micro Serrefines , Fine Science Tools Kat.Nu. 18055-03). </li><li> Danach vorsichtig durchbohren das obere Ende des isolierten Teil der Aorta mit einer Nadel (27G Microlance 3 ¾, BD, Kat. Nr. 302200), legen Sie die untere Klinge eines feinen Feder Schere (Vannas Federschere - 3 mm Klingen, Fein Science Tools, cat.no 15000-00) durch die Punktion Öffnung und führen Sie einen kurzen Längsschnitt. Spülen Sie die isolierten Aorta mit eiskaltem HTK Perfusion Lösung, um alle verbleibenden Blut zu entfernen. </li><li> Ebenso sorgfältig durchbohrendas untere Ende des isolierten Teil der Vena Cava mit einer Nadel, legen Sie die untere Klinge eines feinen Feder Schere durch die Punktion Öffnung und führen Sie einen Längsschnitt enden kurz unterhalb der Aorten-Schnitt. Wieder spülen das Schiff, um alle verbleibenden Blut zu entfernen. </li><li> Entfernen Sie die Nierentransplantates aus dem Storage-Lösung. Platzieren Sie sie unter der ehemaligen Position der linken Niere, und sicherzustellen, dass sie richtig ausgerichtet ist. </li><li> Überprüfen Sie die Ausrichtung der Transplantate Nierenarterie und sicherzustellen, dass es keine Wendungen. Dann legen Sie eine dünne Gaze über das Transplantat und befeuchten sie mit eiskaltem HTK Perfusion Lösung zu kühlen, und um ein Austrocknen zu verhindern. </li><li> Fixieren der Öffnung der Nebenniere Teil der Aorta Stück, in dem die Nierenarterie des Transplantats mündet mit chirurgischen Faden (Ethilon 9-0, Ethicon, Kat. Nr. 2809G..) - Zunächst an der oberen, dann am unteren Ende die Aorta Einschnitt. Schließen Sie den Schnitt mit einer fortlaufenden Naht mit chirurgischen Faden im Uhrzeigersinn(Ethilon 9-0), Dumont gebogener Spitze Pinzette und eine gekrümmte Castroviejo Nadelhalter (Fine Science Tools, Katze. Nr. 12061-01). Danach decken die erste Naht mit Bindegewebe durch eine gegen den Uhrzeigersinn zweite fortlaufende Naht. Nun ist nur der untere Teil der Aorta Stück des Transplantats zu schließen. Regelmäßig abkühlen das Transplantat mit eiskaltem HTK Perfusion Lösung. </li><li> Perfundieren des Transplantats mit 1 ml eiskaltem HTK Perfusionslösung durch eine stumpfe Nadel in das offene Ende des Aorten-Transplantate Stück Validierung der Dichtigkeit und Integrität des Fadens, sowie das Entfernen restliche Blut in das Transplantat eingesetzt. Anschließend Ligation der das offene Ende des Aorten-Stück mit chirurgischer Seide (5-0, Vömel). </li><li> Überprüfen Sie die Ausrichtung der Transplantate Nierenvene und sicherzustellen, dass es keine Wendungen. </li><li> Fixieren der Öffnung der Vene des Transplantats mit chirurgischen Faden (Ethilon 9-0) - zunächst an der oberen und dann an dem unteren Ende des Schnittes in der Hohlvene. Schließen Sie den EinschnittUhrzeigersinn mit einer fortlaufenden Naht mit chirurgischen Faden (Ethilon 9-0), Dumont abgewinkelte Spitze Pinzette und eine gekrümmte Castroviejo Nadelhalter. Regelmäßig abkühlen das Transplantat mit eiskaltem HTK Perfusion Lösung. </li><li> Gegen den Uhrzeigersinn entfernen Sie die mikrochirurgische Klammern, beginnend mit der obersten Hohlvene Klemme. Nach dem Entfernen der letzten Aortenklemme, sorgfältig zu stoppen schließlich milde Blutungen mit Wattestäbchen. Nach ein paar Sekunden wird das Transplantat rosig getönt drehen und uretric Kontraktionen erscheinen soll. </li><li> Für das Einsetzen der Transplantate Harnleiter in die Blase Empfänger `s vorsichtig einen kleinen Patch der Muskulatur an der Spitze der Blase mit einem Vannas Frühling Scissor (Studentische Vannas Frühling Scissor gerade, Fine Science Tools Kat.Nu. 91500-09 ). Entfernen Sie dann das umliegende Gewebe (meist Fett) aus dem Transplantat Harnleiter mit Dumont abgewinkelte Spitze Pinzette. Daher vorsichtig greifen die Spitze der Harnleiter und vorsichtig trennen die umliegende Fett, Bindegewebe und die eingebetteten Schiffe herbin es, indem Sie sie in die entgegengesetzte Richtung. Fixieren Sie die uretric Spitze am Ende eines chirurgischen Faden (Prolene 6-0, Ethicon, Katze. Nr. 8697H) und perforieren die früher hergestellte Spitze der Blase mit der Kanüle. Ziehen Sie den Harnleiter durch die Blase und verlassen sie an der Basis durch eine zweite Perforation. </li><li> Fixieren Sie das zuvor aus dem Harnleiter getrennt Gewebe an der Spitze der Blase mit chirurgischen Faden (Ethilon 9-0). Schneiden Sie die Spitze der Harnleiter mit der beigefügten chirurgischen Faden und ziehen Sie den Harnleiter in die Blase zurück, indem Sie ihn von unten. Danach schließen Sie das zweite Blasenpunktion mit chirurgischen Faden (Ethilon 9-0). </li><li> Schließen Sie die Bauchdecke und die Haut von zwei kontinuierlichen, aber getrennten Nähten mit chirurgischen Faden (Mersilene 0). Desinfizieren Sie die Wunde mit Jod und verwalten Pividon Buprenorphin (0,1 mg pro kg / BW / bid) sc für drei Tage nach der Operation Wundschmerzen steuern. </li></ol> 3. Imaging Allotransplantatabstoßung<ol><li> Anesthetize nonfasting Ratte mit Isofluran 2-2,5%. </li><li> 30 MBq FDG (30 MBq FDG in 0,1 ml 0,9% NaCl) werden iv über Katheterisierung eine laterale Schwanzvene mit einem 24-G-Katheter (Braun, Introcan, 4.252.500-01) verabreicht. Danach spülen Sie den Katheter mit 0,9 ml 0,9% NaCl-Lösung. </li><li> Verlassen Sie die Ratte in einem Restrainer ohne Betäubung bis zum Start des Scans und Hydrat das Tier durch iv Injektion von 1 ml 0,9% NaCl-Lösung stündlich. </li><li> Re-betäuben Ratte mit Isofluran 2% unmittelbar vor dem Scan beginnt. </li><li> Zeigen narkotisierten Ratten in einem hochauflösenden Multi-Drahtkammer-basierte Tier PET-Kamera quadHIDAC (Oxford Positron Systems Ltd, Oxford, UK). Die räumliche Auflösung des PET-Scanner ist 1,0 mm und ist im gesamten FOV (Durchmesser 165 mm, axiale Länge, 280 mm) konstant. Überwachung und Kontrolle der Körpertemperatur während des Scans mit einer rektale Temperatur-Sensor und Steuerung Anästhesie mit einem Pulsoximeter. </li><li> Starten dynamische Übernahme für 60 min ab 180 min nach FDG-Injektion, um Tracer-Akkumulation in den Nieren durch renale Ausscheidung von FDG zu reduzieren. </li><li> Bewerben 5 MBq 18 F-Fluorid iv und führen Sie eine weitere PET-Scan unmittelbar nach dem 18 F-Fluorid-Injektion für 60 min ohne die Position der Ratte in den Scanner zur Identifizierung von Nierenparenchym und für die Berechnung der 18 F-5-Clearance. Rekonstruieren Bilder von beiden Scans. Trace manuell ein Volumen von Interesse (VOI) auf rekonstruierten Bilder 2 min nach 18 F-Fluorid-Injektion (Perfusion-Phase) um Nierenrinde und überweisen Sie den VOI die FDG Bildern. Sorgfältig schließt die Nierenbecken aus dem VOI. Rekonstruieren Bilder von beiden Scans und manuell verfolgen ein Volumen von Interesse (VOI) um Nierenrinde. List-Mode-Daten wurden in Bilder mit einer Voxel-Größe von 0,4 × 0,4 × 0,4 mm 3 rekonstruiert. Sorgfältig schließt die Nierenbecken aus dem VOI. </li><li> Berechnen FDG-Aufnahme durch das Verhältnis of Gesamtaktivität und Volumen und den Prozentsatz der injizierten Dosis (% ID). Wir verwendeten MATLAB (Version R2011b, MathWorks, Natick, MA, USA) und tomographischen Bildgebung (TIM) Version 2.8 für die Bildanalyse. </li></ol>

<ol>
	<li>Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+and+chronic+nephropathy:+a+systematic+review+of+the+literature.">Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature.</a> Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).</li><li>Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+in+the+rat.">Kidney transplantation in the rat.</a> Nature. 194, 309-310 (1962).</li><li>Reuter, S., Schn&#246;ckel, U., Schr&#246;ter, R., Schober, O., Pavenst&#228;dt, H., Sch&#228;fers, M., Gabri&#235;ls, G., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+imaging+of+acute+renal+allograft+rejection+in+rats+using+small+animal+F-FDG-PET.">Non-invasive imaging of acute renal allograft rejection in rats using small animal F-FDG-PET.</a> PLoS. One. 4, e5296 (2009).</li><li>Reuter, S., Schn&#246;ckel, U., Edemir, B., Schr&#246;ter, R., Kentrup, D., Pavenst&#228;dt, H., Schober, O., Schlatter, E., Gabri&#235;ls, G., Sch&#228;fers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+of+noninvasive+serial+assessment+of+acute+renal+allograft+rejection+by+18F-FDG+PET+to+monitor+treatment+efficiency.">Potential of noninvasive serial assessment of acute renal allograft rejection by 18F-FDG PET to monitor treatment efficiency.</a> J. Nucl. Med. 51, 1644-1652 (2010).</li><li>Schn&#246;ckel, U., Reuter, S., Stegger, L., Schlatter, E., Sch&#228;fers, K. P., Hermann, S., Schober, O., Gabri&#235;ls, G., Sch&#228;fers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+18F-fluoride+small+animal+PET+to+noninvasively+assess+renal+function+in+rats.">Dynamic 18F-fluoride small animal PET to noninvasively assess renal function in rats.</a> Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 35, 2267-2274 (2008).</li><li>Grabner, A., Schn&#246;ckel, U., Kentrup, D., Sch&#228;fers, M., Reuter, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+Non-Invasive+Molecular+Imaging+of+Acute+Allograft+Rejection+by+Gamma+Scintigraphy+and+Positron+Emission+Tomography.">Strategies for Non-Invasive Molecular Imaging of Acute Allograft Rejection by Gamma Scintigraphy and Positron Emission Tomography.</a> Curr. Radiopharm. 4, 10-23 (2011).</li><li>Racusen, L. C., Solez, K., Colvin, R. B., Bonsib, S. M., Castro, M. C., Cavallo, T., Croker, B. P., Demetris, A. J., Drachenberg, C. B., Fogo, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Banff+97+working+classification+of+renal+allograft+pathology.">The Banff 97 working classification of renal allograft pathology.</a> Kidney Int. 55, 713-723 (1999).</li><li>Edemir, B., Reuter, S., Borgulya, R., Schr&#246;ter, R., Neugebauer, U., Gabri&#235;ls, G., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+modulates+gene+expression+in+the+collecting+duct.">Acute rejection modulates gene expression in the collecting duct.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 19, 538-546 (2008).</li><li>Velic, A., Gabri&#235;ls, G., Hirsch, J. R., Schr&#246;ter, R., Edemir, B., Paasche, S., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+after+rat+renal+transplantation+leads+to+downregulation+of+Na++and+water+channels+in+the+collecting+duct.">Acute rejection after rat renal transplantation leads to downregulation of Na+ and water channels in the collecting duct.</a> Am. J. Transplant. 5, 1276-1285 (2005).</li><li>Reuter, S., Velic, A., Edemir, B., Schr&#246;ter, R., Pavenst&#228;dt, H., Gabri&#235;ls, G., Bleich, M., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+NHE-3+inhibition+in+rat+renal+transplantation+undergoing+acute+rejection.">Protective role of NHE-3 inhibition in rat renal transplantation undergoing acute rejection.</a> Pflugers Arch. 456, 1075-1084 (2008).</li></ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

FDG-PET-Bildgebung ist eine neue Option für die Diagnose der akuten Abstoßung. Wegen seiner nicht-invasiv und spezifischen Charakters ist FDG-PET Vorteile im Vergleich zu klassischen Diagnostik durch Stanzbiopsie. Im Gegensatz zu der begrenzten Stichprobengröße von einer Biopsie, FDG-PET-Analyse das gesamte Transplantat. Darüber hinaus kann man es den Patienten auf gerinnungshemmende Therapie gelten, und man kann zB PET Maßnahmen wiederholt auf die Behandlung Effizienz 4 Überwachung durchzufü...

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mathieu Needle Holder - 14 cm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>12010-14</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Castroviejo Micro Needle Holder - 9 cm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>12061-01</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Surgical Scissors - Sharp_Blunt</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>14001-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Iris Scissors - ToughCut Straight 11.5 cm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>14058-11</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Student Vannas Spring Scissors </td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>91500-09</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Vannas Spring Scissors - 3 mm Blades</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>15000-00</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>91121-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dumont SS-45 Forceps - Inox Medical</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>11203-25</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>18056-14</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>18055-03</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>18055-04</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isoflurane (e.g. Forene 100% v/v)</td>
 <td>Abott</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>cutane antiseptic (e.g. Octeniderm) </td>
 <td>Sch&uuml;lke</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Povidone Iodine (e.g. Betaisodona)</td>
 <td>Mundipharma</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>ophthalmic ointment (e.g. Bepanthen)</td>
 <td>Bayer</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Buprenorphin (e.g. Temgesic)</td>
 <td>RB Pharmaceuticals</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>HTK perfusion solution (e.g. CUSTODIOL HTK)</td>
 <td>Dr. Franz K&ouml;hler Chemie</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>surgical thread Mersilene 0</td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>EH6665E</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>surgical thread Mersilene 4-0</td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>EH6732H</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>surgical thread Prolene 6-0</td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>8697H</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>surgical thread Ethilon 9-0</td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>2809G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>surgical silk 5-0</td>
 <td>V&ouml;mel</td>
 <td>14739</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Canula (e.g. Microlance 3, 27G &frac34;)</td>
 <td>BD</td>
 <td>302200</td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

non-invasive imaging of acute allograft rejection after rat renal transplantation using 18f-fdg pet

Die Anzahl der Patienten mit Nierenerkrankungen im Endstadium, und die Anzahl der Niere allogenen Empfänger kontinuierlich zunimmt. Akute zelluläre Abstoßung (AR) ein negativer prognostischer Faktor für die langfristige Allograft Überleben und die rechtzeitige Diagnose ist entscheidend für die Funktion 1 Allograft. Derzeit können nur AR definitiv von Kern-Nadel-Biopsie, die als invasive Methode, entblößt erhebliches Risiko der Transplantat Verletzungen oder sogar zum Verlust diagnostiziert werden. Darüber hinaus sind Biopsien nicht möglich bei Patienten, die gerinnungshemmende Medikamente und der begrenzten Probenahmefläche dieser Technik kann zu falsch negativen Ergebnissen führen, wenn die AR ist fokale oder lückenhaft. Als Folge kam es damit zu einem kontinuierlichen Suche nach neuen AR Nachweisverfahren, die oftmals in Tieren, einschließlich der Verwendung von verschiedenen Transplantationsmodellen erfolgen. Seit den frühen 60er Ratte Nierentransplantation ist ein etabliertes Verfahren zur experimentellen Examination und Analyse von AR 2. Wir hier vorliegenden zusätzlich Kleintier Positronen-Emissions-Tomographie (PET) mit 18 F-FDG (FDG) zu AR in einer allogenen Nierentransplantation uninephrectomized Ratte Modell bewerten und Transplantat FDG-PET-Bildgebung als neue Option für eine nicht-invasive, spezifische und Früherkennung von AR auch für die menschliche Situation 3. Ferner kann dieses Verfahren für das Follow-up, um die Überwachung der Transplantatabstoßung 4 verbessern angewendet werden.

Histologie Während AR Leukozyten, dh vor allem T-Lymphozyten in das Transplantat rekrutiert, während die Schwere der Ablehnung durch den Grad der Entzündung widerspiegelt. In der Periodic-Acid-Schiff (PAS)-Färbung dargestellt hier (Abbildung 1), zeigt die Nierentransplantaten signifikanten histologischen Anzeichen von AR, nämlich Glomerulitis, Tubulitis, endothelialitis und Transplantat Infiltration (Abbildung 1, ATX POD4) (POD = postoperativen Ta...

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Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET | Medicine | Video

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Wir präsentieren hier eine Ratte Nierentransplantation Modell zur nicht-invasiven Bestimmung von akuter Abstoßung mittels Positronen-Emissions-Tomographie mit 18F-FDG.

Nicht-invasive Bildgebung des akuten Abstoßung nach Nierentransplantation mit Rat<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal  disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases.  Episodes of acute cellular ...

non-invasive-imaging-acute-allograft-rejection-after-rat-renal

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Medicine

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Human Biology

Osmoregulation and Excretion

SCIENTISTS IN ACTION

16.9K Aufrufe.  University of Münster. Wir präsentieren hier eine Ratte Nierentransplantation Modell zur nicht-invasiven Bestimmung von akuter Abstoßung mittels Positronen-Emissions-Tomographie mit 18F-FDG.

Serie: Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Non-invasive Optical Measurement of Cerebral Metabolism and Hemodynamics in Infants

Perinatal brain injury remains a significant cause of infant mortality and morbidity, but there is not yet an effective bedside tool that can accurately screen for brain injury, monitor injury evolution, or assess response to therapy. The energy used by neurons is derived largely from tissue oxidative metabolism, and neural hyperactivity and cell death are reflected by corresponding changes in cerebral oxygen metabolism (CMRO2). Thus, measures of CMRO2 are reflective of neuronal viability and provide critical diagnostic information, making CMRO2 an ideal target for bedside measurement of brain health.
Brain-imaging techniques such as positron emission tomography (PET) and single-photon emission computed tomography (SPECT) yield measures of cerebral glucose and oxygen metabolism, but these techniques require the administration of radionucleotides, so they are used in only the most acute cases.
Continuous-wave near-infrared spectroscopy (CWNIRS) provides non-invasive and non-ionizing radiation measures of hemoglobin oxygen saturation (SO2) as a surrogate for cerebral oxygen consumption. However, SO2 is less than ideal as a surrogate for cerebral oxygen metabolism as it is influenced by both oxygen delivery and consumption. Furthermore, measurements of SO2 are not sensitive enough to detect brain injury hours after the insult 1,2, because oxygen consumption and delivery reach equilibrium after acute transients 3. We investigated the possibility of using more sophisticated NIRS optical methods to quantify cerebral oxygen metabolism at the bedside in healthy and brain-injured newborns. More specifically, we combined the frequency-domain NIRS (FDNIRS) measure of SO2 with the diffuse correlation spectroscopy (DCS) measure of blood flow index (CBFi) to yield an index of CMRO2 (CMRO2i) 4,5.
With the combined FDNIRS/DCS system we are able to quantify cerebral metabolism and hemodynamics. This represents an improvement over CWNIRS for detecting brain health, brain development, and response to therapy in neonates. Moreover, this method adheres to all neonatal intensive care unit (NICU) policies on infection control and institutional policies on laser safety. Future work will seek to integrate the two instruments to reduce acquisition time at the bedside and to implement real-time feedback on data quality to reduce the rate of data rejection.

We combined frequency-domain near-infrared spectroscopy measures of cerebral hemoglobin oxygenation with diffuse correlation spectroscopy measures of cerebral blood flow index to estimate an index of oxygen metabolism. We tested the utility of this measure as a bedside screening tool to evaluate the health and development of the newborn brain.

Non-invasive optische Messung des zerebralen Metabolismus und Hämodynamik bei Säuglingen

Perinatal brain injury remains a significant cause of infant mortality  and morbidity, but there is not yet an effective bedside tool that can  accurately ...

Forschung

Medizin

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

Intravital imaging has emerged as an indispensable tool in biological research. In the process, many imaging techniques have been developed to study different biological processes in animals non-invasively. However, a major technical limitation in existing intravital imaging modalities is the inability to combine non-invasive, longitudinal imaging with single-cell resolution capabilities. We show here how transplantation into the anterior chamber of the eye circumvents such significant limitation offering a versatile experimental platform that enables non-invasive, longitudinal imaging with cellular resolution in vivo. We demonstrate the transplantation procedure in the mouse and provide representative results using a model with clinical relevance, namely pancreatic islet transplantation. In addition to enabling direct visualization in a variety of tissues transplanted into the anterior chamber of the eye, this approach provides a platform to screen drugs by performing long-term follow up and monitoring in target tissues. Because of its versatility, tissue/cell transplantation into the anterior chamber of the eye not only benefits transplantation therapies, it extends to other in vivo applications to study physiological and pathophysiological processes such as signal transduction and cancer or autoimmune disease development.

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

A new approach combining intraocular transplantation and confocal microscopy enables longitudinal, non-invasive real-time imaging with single-cell resolution within grafted tissues in vivo. We demonstrate how to transplant pancreatic islets into the anterior chamber of the mouse eye.

Transplantation in die Vorderkammer des Auges für Längs-, Non-invasive<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging mit Single-cell Auflösung in Echtzeit

Intravital imaging has emerged as an indispensable tool in biological research.  In the process, many imaging techniques have been developed to study ...

Non-invasive Imaging and Analysis of Cerebral Ischemia in Living Rats Using Positron Emission Tomography with 18F-FDG

Stroke is the third leading cause of death among Americans 65 years of age or older1. The quality of life for patients who suffer from a stroke fails to return to normal in a large majority of patients2, which is mainly due to current lack of clinical treatment for acute stroke. This necessitates understanding the physiological effects of cerebral ischemia on brain tissue over time and is a major area of active research. Towards this end, experimental progress has been made using rats as a preclinical model for stroke, particularly, using non-invasive methods such as 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) coupled with Positron Emission Tomography (PET) imaging3,10,17. Here we present a strategy for inducing cerebral ischemia in rats by middle cerebral artery occlusion (MCAO) that mimics focal cerebral ischemia in humans, and imaging its effects over 24 hr using FDG-PET coupled with X-ray computed tomography (CT) with an Albira PET-CT instrument. A VOI template atlas was subsequently fused to the cerebral rat data to enable a unbiased analysis of the brain and its sub-regions4. In addition, a method for 3D visualization of the FDG-PET-CT time course is presented. In summary, we present a detailed protocol for initiating, quantifying, and visualizing an induced ischemic stroke event in a living Sprague-Dawley rat in three dimensions using FDG-PET.

Non-invasive Imaging and Analysis of Cerebral Ischemia in Living Rats Using Positron Emission Tomography with 18F-FDG

Brain damage resulting from cerebral ischemia may be non-invasively imaged and studied in rats using pre-clinical positron emission tomography coupled with the injectable radioactive probe, 18F-fluorodeoxyglucose. Further, the use of modern software tools that include volume of interest (VOI) brain templates dramatically increase the quantitative information gleaned from these studies.

Nicht-invasive Bildgebung und Analyse der zerebralen Ischämie in lebenden Ratten mit Hilfe der Positronen-Emissions-Tomographie mit<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

Stroke is the third leading cause of death among Americans 65 years of age or older1. The quality of life for patients who suffer from a stroke fails to ...

Murine Model for Non-invasive Imaging to Detect and Monitor Ovarian Cancer Recurrence

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of care consisting of surgical debulking and combination chemotherapy consisting of platinum and taxane compounds, almost 90% of patients recur within a few years. In these patients the development of chemoresistant disease limits the efficacy of currently available chemotherapy agents and therefore contributes to the high mortality. To discover novel therapy options that can target recurrent disease, appropriate animal models that closely mimic the clinical profile of patients with recurrent ovarian cancer are required. The challenge in monitoring intra-peritoneal (i.p.) disease limits the use of i.p. models and thus most xenografts are established subcutaneously. We have developed a sensitive optical imaging platform that allows the detection and anatomical location of i.p. tumor mass. The platform includes the use of optical reporters that extend from the visible light range to near infrared, which in combination with 2-dimensional X-ray co-registration can provide anatomical location of molecular signals. Detection is significantly improved by the use of a rotation system that drives the animal to multiple angular positions for 360 degree imaging, allowing the identification of tumors that are not visible in single orientation. This platform provides a unique model to non-invasively monitor tumor growth and evaluate the efficacy of new therapies for the prevention or treatment of recurrent ovarian cancer.

We describe a non-invasive animal imaging platform that allows the detection, quantification, and monitoring of ovarian cancer growth and recurrence. This intra-peritoneal xenograft model mimics the clinical profile of patients with ovarian cancer.

Mausmodell für nicht-invasive Bildgebungs zu erfassen und zu überwachen Eierstockkrebs Rezidiv

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely replicates both the technical and pathological processes that occur in human renal transplantation. Although mouse models of allogeneic rejection in organs other than the kidney exist, and are more technically feasible, there is evidence that different organs elicit disparate rejection modes and dynamics, for instance the time course of rejection in cardiac and renal allograft differs significantly in certain strain combinations. This model is an attractive tool for many reasons despite its technical challenges. As inbred mouse strain haplotypes are well characterized it is possible to choose donor and recipient combinations to model acute allograft rejection by transplanting across MHC class I and II loci. Conversely by transplanting between strains with similar haplotypes a chronic process can be elicited were the allograft kidney develops interstitial fibrosis and tubular atrophy. We have modified the surgical technique to reduce operating time and improve ease of surgery, however a learning curve still needs to be overcome in order to faithfully replicate the model. This study will provide key points in the surgical procedure and aid the process of establishing this technique.

Here, we present a protocol to study the immunology of rejection. The surgical model presented reports a short operating time and a concise technique. Depending on the donor-recipient strain combination, the transplanted kidney may develop acute cellular rejection or chronic allograft damage, defined by interstitial fibrosis and tubular atrophy.

Maus Nierentransplantation: Modelle der Transplantatabstoßung

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT

This paper describes the use of 18F-FDG and micro-PET/CT imaging to determine in vivo glucose metabolism kinetics in mice (and is transferable to rats). Impaired uptake and metabolism of glucose in multiple organ systems due to insulin resistance is a hallmark of type 2 diabetes. The ability of this technique to extract an image-derived input function from the vena cava using an iterative deconvolution method eliminates the requirement of the collection of arterial blood samples. Fitting of tissue and vena cava time activity curves to a two-tissue, three compartment model permits the estimation of kinetic micro-parameters related to the 18F-FDG uptake from the plasma to the intracellular space, the rate of transport from intracellular space to plasma and the rate of 18F-FDG phosphorylation. This methodology allows for multiple measures of glucose uptake and metabolism kinetics in the context of longitudinal studies and also provides insights into the efficacy of therapeutic interventions.

Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT

This study describes a protocol that uses 18F-FDG and positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) imaging, together with kinetic modelling, to quantify the in vivo, real-time uptake of 18F-FDG into tissues.

Die Bestimmung Glucose Metabolism Kinetics Verwendung<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG Micro-PET / CT

This paper describes the use of 18F-FDG and micro-PET/CT imaging to determine in vivo glucose metabolism kinetics in mice (and is transferable to rats). ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of clinical efficacy, they are until now imperfect solutions. Stem cell therapy using ASC sheets could provide a solution to this problem. ASCs are considered as promising candidates for promoting tissue healing because of their trophic and immunomodulatory properties. Here, we provide methods to produce high-density ASC sheets, that are transplanted onto a colorectal anastomosis in a rat model to reduce the leakage. ASCs formed cell sheets in thermo-responsive culture dishes that could be easily detached. On the day of the transplantation, a partial colectomy with a 5-suture colorectal anastomosis was performed. Animals were immediately transplanted with 1 ASC sheet per rat. ASC sheets adhered spontaneously to the anastomosis without any glue, suture, or any biomaterial. Animal groups were sacrificed 3 and 7 days postoperatively. Compared to transplanted animals, the incidence of anastomotic abscesses and leakage was higher in control animals. In our model, the transplantation of ASC sheets after colorectal anastomosis was successful and associated with a lower leakage rate.

The preparation and transplantation of adipose tissue derived stem cell (ASC) sheets onto insufficiently sutured colorectal anastomoses in a rat model is presented. This novel application shows that ASC sheets can reduce colorectal anastomosis leakage.

Transplantation von Fettgewebe-Derived Stem Cell Blatt, Leckage nach teilweiser Colectomy in einem Rattenmodell zu reduzieren

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to expend energy has made it a potential target for novel therapies to ameliorate obesity and associated metabolic disorders in humans. Though this tissue has been well studied in small animals, BAT&#39;s thermogenic capacity in humans remains largely unknown due to the difficulties of measuring its volume, activity, and distribution. Identifying and quantifying active human BAT is commonly performed using 18F-Fluorodeoxyglucose (18F-FDG) positron emission tomography and computed tomography (PET/CT) scans following cold-exposure or pharmacological activation. Here we describe a detailed image-analysis approach to quantify total-body human BAT from 18F-FDG PET/CT scans using an open-source software. We demonstrate the drawing of user-specified regions of interest to identify metabolically active adipose tissue while avoiding common non-BAT tissues, to measure BAT volume and activity, and to further characterize its anatomical distribution. Although this rigorous approach is time-consuming, we believe it will ultimately provide a foundation to develop future automated BAT quantification algorithms.

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

Using free, open-source software, we have developed an analytical approach to quantify total and regional brown adipose tissue (BAT) volume and metabolic activity of BAT using 18F-FDG PET/CT.

Ganzen Körper und regionale Quantifizierung der aktiven Menschen braune Fettgewebe mit 18F-FDG PET/CT

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to ...

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of disorders of consciousness, disrupted higher brain function, and verbal disturbances. As a consequence of an insufficient ability to communicate, objective evaluations are needed from family members, medical staff, and caregivers. One such evaluation is the assessment of functioning brain areas. Recently, multimodal brain imaging has been used to explore the function of damaged brain areas. [18F]-fluorodeoxyglucose positron emission tomography-computed tomography ([18F]FDG-PET/CT) is a successful tool for examining brain function. However, the assessment of brain glucose metabolism based on [18F]FDG-PET/CT is not standardized and depends on several varying parameters, as well as the patient&#39;s condition. Here, we describe a series of semiquantitative assessment protocols for a region-of-interest (ROI) image analysis using self-produced [18F]FDG tracers in patients with sTBI. The protocol focuses on screening the participants, preparing the [18F]FDG tracer in the hot lab, scheduling the acquisition of [18F]FDG-PET/CT brain images, and measuring glucose metabolism using the ROI analysis from a targeted brain area.

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

[18F]-fluorodeoxyglucose (FDG) positron emission tomography-computed tomography is useful for studying glucose metabolism related to brain function. Here, we present a protocol for an [18F]FDG tracer set-up and semiquantitative assessment of the region-of-interest analysis for targeted brain areas associated with clinical manifestations in patients with severe traumatic brain injury.

Semi-quantitative Bewertung mit [18F] FDG Tracer bei Patienten mit schweren Hirnverletzungen

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of ...

Optical Clearing and Imaging of Immunolabeled Kidney Tissue

Optical clearing techniques render tissue transparent by equilibrating the refractive index throughout a sample for subsequent three-dimensional (3-D) imaging. They have received great attention in all research areas for the potential to analyze microscopic multicellular structures that extend over macroscopic distances. Given that kidney tubules, vasculature, nerves, and glomeruli extend in many directions, which have been only partially captured by traditional two-dimensional techniques so far, tissue clearing also opened up many new areas of kidney research. The list of optical clearing methods is rapidly growing, but it remains difficult for beginners in this field to choose the best method for a given research question. Provided here is a simple method that combines antibody labeling of thick mouse kidney slices; optical clearing with cheap, non-toxic and ready-to-use chemical ethyl cinnamate; and confocal imaging. This protocol describes how to perfuse kidneys and use an antigen-retrieval step to increase antibody- binding without requiring specialized equipment. Its application is presented in imaging different multicellular structures within the kidney, and how to troubleshoot poor antibody penetration into tissue is addressed. We also discuss the potential difficulties of imaging endogenous fluorophores and acquiring very large samples and how to overcome them. This simple protocol provides an easy-to-setup and comprehensive tool to study tissue in three dimensions.

The combination of antibody labeling, optical clearing, and advanced light microscopy allows three-dimensional analysis of complete structures or organs. Described here is a simple method to combine immunolabeling of thick kidney slices, optical clearing with ethyl cinnamate, and confocal imaging that enables visualization and quantification of three-dimensional kidney structures.

Optische Seimierung und Bildgebung von immunomarkiertem Nierengewebe

Optical clearing techniques render tissue transparent by equilibrating the refractive index throughout a sample for subsequent three-dimensional (3-D) ...