Die orthotope Nierentransplantation von Ratten ist ein wichtiges Modell zur Untersuchung des Mechanismus der renalen Allotransplantatabstoßung in präklinischen Studien und könnte bei der Entwicklung eines neuartigen Ansatzes zur Verbesserung des Langzeitüberlebens von renalen Allotransplantaten helfen. Die End-to-End-Anastomose der Nierengefäße bei dieser Operation vermeidet eine Ischämie des Unterkörpers und die Thrombose der Vena cava inferior, während die Anastomose des Harnleiters in einer End-to-Side-Tunnelmethode das postoperative Urinleck und die Verdrehung des Harnleiters reduziert. Diese Methode gibt Aufschluss über die Untersuchung der Mechanismen der Immunabstoßung und -verletzung von Nierenallotransplantaten nach Nierentransplantationen.
Beginnen Sie mit dem Einschneiden des Abdomens mit einer chirurgischen Schere entlang der Mittellinie von der Symphyse pubis zum Subxiphoid. Öffnen Sie dann den Schnitt mit einem Retraktor. Nehmen Sie den Darm von der rechten Seite des Einschnitts und wickeln Sie ihn mit angefeuchteter Gaze ein, um ein Austrocknen zu verhindern.
Legen Sie dann die linke Niere frei. Dissoziieren Sie die linke Nierenarterie und Vene mit Mikrozangen und Wattestäbchen unter 20-facher Vergrößerung. Ligatieren und transektieren Sie bei Bedarf die Nebennierenvene und die Genitalvene.
Dissoziieren Sie den Harnleiter mit Hilfe von Mikropinzetten und erhalten Sie das periphere Bindegewebe, um die Blutversorgung des Harnleiters sicherzustellen. Dissoziation und Clip oder Ligate der Aorta etwa fünf Millimeter über der linken Nierenarterie mit einer Gefäßklemme oder 4-0 Polyamid-Monofilamentnaht. Dann transezieren Sie die linke Nierenvene distal zur Verbindung der linken Genitalvene und der Nebennierenvene.
Mit einer 24-Gauge-Skalpellnadel spülen Sie die Niere von der Aorta unterhalb der linken Nierenarterie mit eiskalter UW-Lösung, ergänzt mit 100 Einheiten pro Milliliter Heparin, bis die Farbe des Blutes verblasst. Transsektieren Sie die linke Nierenarterie neben der Aorta, dann den Harnleiter neben der Blase und dissoziieren Sie die Niere mit Hilfe von Mikrozangen und Scheren. Bewahren Sie die linke Niere des Spenders in eiskalter UW-Lösung auf.
Dissoziation der linken Nierenarterie und der Nierenvene der Empfängerratte unter 20-facher Vergrößerung mit Wattestäbchen und Mikropinzetten. Ligatieren Sie bei Bedarf die Nebennierenvene und die Vena genitalis. Schneiden Sie die linke Nierenarterie und die Nierenvene an der Wurzel mit mikrovaskulären Klemmen ab und durchbluten Sie dann die Nierenarterie und die Nierenvene drei Millimeter von der mikrovaskulären Klemme entfernt.
Dissoziieren und lizieren Sie den linken Harnleiter etwa zwei bis drei Zentimeter unterhalb der Niere mit einem 8-0 Polyamid monofil nähen und transektieren es an der Ligatur. Sezieren Sie die native linke Niere des Empfängers, indem Sie die Niere mit Hilfe von Mikrozangen und Schere dissoziieren. Implantieren Sie die Spenderniere in die linke Nierengrube der Empfängerratte und legen Sie Eis um die implantierte Spenderniere.
Wechseln Sie zur 45-fachen Vergrößerung und anastomosieren Sie dann die Nierenarterie und die Nierenvene des Spenders in einem End-to-End-Muster mit 10-0 Polyamid-Monofilamentnähten an die Nierenarterie und die Nierenvene des Empfängers. Um die Nierenarterie mit unterbrochenen Nähten zu anastomosieren, platzieren Sie die Haltenähte in 12- und sechs-Uhr-Positionen der Anastomose. Nähen Sie eine Seite der Anastomose zwischen den beiden Bleibähten mit zwei bis drei Stichen.
Drehen Sie die Strebenähte um und nähen Sie die andere Seite der Anastomose zwischen den beiden Bleibähten mit zwei bis drei Stichen. Um die Nierenvene mit kontinuierlichen Nähten zu anastomosieren, platzieren Sie die Haltenähte an den Positionen sechs und 12 Uhr der Anastomose. Nähen Sie eine Seite der Anastomose aus der 12-Uhr-Position mit vier bis fünf Stichen mit den laufenden Nähten.
Drehen Sie die Strebenähte um und nähen Sie die andere Seite der Anastomose aus der Sechs-Uhr-Position. Reperfusionieren Sie die Spendernieren, indem Sie die nicht-invasive mikrovaskuläre Klemme der Nierenvene lösen, identifizieren Sie die Blutungsstellen und machen Sie bei Bedarf zusätzliche Stiche. Als nächstes lösen Sie die nicht-invasive mikrovaskuläre Klemme der Nierenarterie, identifizieren Sie die Blutungsstellen und machen Sie bei Bedarf zusätzliche Stiche.
Bei einer 20-fachen Vergrößerung ligaten oder nähen Sie das Ende des Spenderharnleiters mit einer 4-0-Polyamid-Monofilamentnaht als Schlepptau, um das Ende durch den Tunnel der Empfängerblase zu ziehen. Befestigen Sie den Spenderharnleiter mit der Blase des Empfängers, indem Sie die Adventitia des Spenderharnleiters mit der Muskelschicht der Empfängerblase außen an vier gleich weit entfernten Positionen mit einem 8-0 nähen Polyamid-Monofilament-Naht. Transektieren Sie anschließend das Ende des Spenderharnleiters mit der Naht außerhalb der Empfängerblase und lassen Sie den Spenderharnleiter wieder in die Blase des Empfängers schrumpfen.
Legen Sie den Darm zurück in die Bauchhöhle und schließen Sie den Bauchschnitt mit kontinuierlichen Nähten in der Muskelschicht und dann die Hautschicht mit einer 4-0 Polyamid-Monofilamentnaht. Nach zehn Wochen nach der Transplantation zeigten Hämatoxylin- und Eosinfärbung und periodische Säureverschiebungsfärbung Glomerulärsklerose, interstitielle Fibrose, tubuläre Atrophie und interstitielle arterielle Sklerose im renalen Allotransplantat im Gegensatz zur Isotransplantatniere. Die Silberfärbung zeigte die Verdickung der glomerulären Basalmembran in der Allotransplantatniere im Vergleich zur Isotransplantatniere, was auf den Erfolg des orthotopen Nierentransplantationsmodells der Ratte hinweist.
Da das Gefäßloch der Nieren sehr dünn ist, um die falsche Naht zu vermeiden, denken Sie daran, die Anastomose auf dem Feld mit hoher Vergrößerung durchzuführen.
