Name: intracarotid cancer cell injection to produce mouse models of brain metastasis
Uploaded: 2017-02-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 43 s
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The authors have no acknowledgements.

Ethik Aussage: Alle Tierstudien von der Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC) von der University of Texas MD Anderson Cancer Center genehmigt. 1. Bereiten Sie Krebszellen für die Injektion <ol><li> Samen, die Krebszellen ein oder zwei Tage vor der Injektion. Verwenden Sie DMEM / F12-Medium mit 10% FBS ergänzt, es sei denn, eine Spezialität Medium in der Literatur für eine bestimmte Zelllinie angedeutet ist. </li><li> Am Tag des chirurgischen Eingriffs, Ernte Zellen, wenn sie erreicht 70 bis 80% Konfluenz, indem zuerst Waschen mit serumfreiem Medium einmal vor Trypsinisierung (0,25%) für 1 bis 2 min bei 37 ° C. Hinzufügen, in Zellen 10% FBS enthaltendes DMEM / F12-Medium, das 0,25% Trypsin zu quenchen. </li><li> Zentrifugieren der Zellen bei 80 × g für 3 min. 5 × 10 6 Zellen / ml, abhängig von der Zelllinie - in Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) bei 1 waschen Zellen in serumfreien Medien zweimal restliche Serum zu entfernen, die Zellen mit einem Hämozytometer zählen und zu resuspendieren. Halten Sie sich auf Eisbis zum Zeitpunkt der Injektion. HINWEIS: MDA-MB-231 Brustkrebszellen und K1735 Melanomzellen wurden in dieser Studie, und beide Zellinien wurden bei 2 × 10 6 Zellen / ml Konzentration verwendet. Halten Sie die Trypsinierung Dauer so kurz wie möglich als Übertherapie können die Ergebnisse der Metastasierung Assays beeinflussen. </li></ol> 2. Bereiten Sie Mäuse für Tumorzellinjektion <ol><li> Anästhesieren Mäuse durch intraperitoneale (ip) Injektion von Ketamin / Xylazin-Cocktail (Ketamin 100 mg / kg, Xylazin 10 mg / kg). </li><li> Bestätigen Sie eine komplette Anästhesie durch Kneifen der Tierfüße und beobachten fehlende Reaktion. </li><li> Platzieren Sie die Maus auf einer Glasplatte (verwendet für das Gießen von Protein-Gele), und befestigen Sie sie mit Gummibändern. </li><li> Falls erforderlich, entfernen Sie die Haare des Halses durch Rasieren oder eine kleine Menge Haarentfernung Produkt Auftragen und Abwischen der Haare mit einem Papiertuch ab. HINWEIS: Wenn Nacktmäuse mit, diesen Schritt überspringen, da sie keine Körperhaare haben. </li><li> Reinigen Sie die Haut am Hals durch die AnwendungPVP-Jod und 70% Alkohol. </li><li> Platzieren Sie die Maus auf der Bühne des Binokular </li><li> Einen Einschnitt in die Haut ~ 1 cm lang mit einem chirurgischen Skalpell. </li><li> Unverblümt sezieren den Muskel mit Zahnzange unterhalb der Arteria carotis zu belichten. </li><li> Trennen Sie die Arteria carotis vom benachbarten Vagusnerv mit chirurgischen Pinzette. </li><li> Mit chirurgische Pinzette, trennen einige Baumwolle aus einem Wattebausch, befeuchten und Mode in eine kleinere Wattebausch. Dieses Puffer-befeuchtete Wattebausch unter der A. carotis der beabsichtigten Stelle der Injektion. </li><li> Legen Sie eine Naht distalen und proximalen zu dem Wattebausch und lose Knoten machen. Ziehen Sie den proximalen Knoten den Blutfluss in der Injektionsstelle zu blockieren. </li><li> Gehen Sie zur Krebszellinjektion, wenn die Arteria carotis auf dem Wattebausch mit frischen roten Blut voll unter Druck erscheint. </li></ol> 3. Cancer Cell Injektion in Arteria carotis <ol><li> Vortex und ziehen 100 ul of Krebszellen in die Spritze. </li><li> Unter dem Binokular, legen Sie langsam die 31 G-Nadel (mit Fase nach oben) in das Lumen der Arterie Carotis auf der Oberseite der Baumwollkugel sitzt. </li><li> injizieren langsam die Zellen aus der Spritze in die Carotis-Arterie. Erfolgreiche Injektion kann durch die wechselnden Farben der umliegenden Blutgefäße und Muskulatur, wenn gepufferte Krebszellen in die Blutbahn geschoben werden unter dem Mikroskop beobachtet werden. </li><li> Wenn die Einspritzung des gesamten Volumens abgeschlossen ist, heben Sie vorsichtig die distale Arteria carotis Aufstoßen zu verhindern. </li><li> Schnell den distalen Knoten ziehen Sie die Injektionsvorgang abzuschließen. </li><li> Nach der Injektion abgeschlossen, ziehen Sie die Ligatur und schneiden Sie die überschüssige Seidennaht mit Mikro-Schere unter dem Binokular. Bewegen Sie den abgetrennten Muskel wieder auf die Wunde abzudecken. Schließen Sie die Haut mit zwei Heftklammern. </li></ol> 4. Chirurgische Erholung <ol><li> Bewegen Sie das operierte Tier auf einem Heizkissenzur Erholung. 60 min für die Tiere das Bewusstsein wieder zu erlangen - Es kann 30 nehmen. In der Zwischenzeit, Buprenorphin (0,05 mg / kg) subkutane Injektion als postoperative Analgesie verabreichen. Hinweis: Analgesie zur Verfügung gestellt werden sollten, entsprechend den lokalen IACUC Protokoll genehmigt. </li><li> Sobald die Tiere erwachen und ihr normales Verhalten fortzusetzen, kehren die Mäuse zu ihren Wohnstandort. Geben Sie Mäuse mit Gel Lebensmittel für einige Tage nach der Operation. Achten Sie auf eine chirurgische Aufzeichnung und halten Sie sie in den Raum. </li></ol> 5. Nicht-invasive In - vivo - Bildgebung <ol><li> Für mit Luciferase - Reporterkonstrukte markierten Zellen, Krebszellen Injektionseffizienz unter Verwendung von in - vivo - Bildgebungssystem 14 messen. HINWEIS: Imaging nicht am Tag der Injektion durchgeführt, eine übermäßige Belastung auf Versuchstiere zu vermeiden. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Die kritischsten Schritte zur erfolgreichen carotis arterielle Injektion von Krebszellen sind: 1) tiefer Anästhesie von Maus in Vorbereitung für die chirurgische Operation; 2) stetig Platzierung der Arteria carotis auf der Oberseite der Baumwolle zu unterstützen; 3) dicht Ligatur der A. carotis nach erfolgreicher Injektion. Tief Anästhesie von ~ 30 min ist in der Regel notwendig für die stationäre chirurgische Leistung unter dem Binokular. Wir verwenden kommerziell ready-to-use Ketamin...

Die Metastasierung von Krebs auf das zentrale Nervensystem (ZNS) ist eine verheerende Krankheit, und kann entweder das Hirnparenchym oder die Leptomeningen ( &quot;Hirnmetastasen&quot; bezieht sich sowohl auf die in diesem Artikel) einzubeziehen. Es ist die vorherrschende intracranial Malignität, outnumbering primären Gliomen von&gt; 10: 1 1, 2. Lungenkrebs, Brustkrebs und Melanomen sind die drei wichtigsten Tumorerkrankungen, die eine hohe Inzidenz von Hirnmetastasen produzieren 3, 4. In den letzten Jahren haben beeindruckende Fortschritte in der neuen Krebstherapien, dramatisch verlängert das Überleben und die Verbesserung der Lebensqualität für viele Krebspatienten. Doch bei Wiederholung wird das Auftreten von Hirnmetastasen steigt rapide an. Beispielsweise wurde die Anti-HER2-Antikörper Trastuzumab (Herceptin) signifikante klinische Wirksamkeit bei Patienten mit HER2 + Brustkrebs nachgewiesen; noch eine beunruhigende Tendenz hat sich herausbei diesen Patienten: bis zu 1/3 von denen , deren extracranial systemische Erkrankung zunächst von Trastuzumab Behandlung profitierten später Hirnmetastase 5, 6, 7 zu entwickeln. Leider Patienten mit Hirnmetastasen sind resistent gegen fast alle gängigen Behandlungen, in der Regel eine traumatische Verschlechterung der Lebensqualität erleben, und ihre Ein-Jahres - Überleben nach der Diagnose ist nur ~ 20% 8. Aktuelle Therapien für Hirnmetastasen (einschließlich Steroide, Schädel Strahlentherapie und chirurgische Resektion bei ausgewählten Patienten) sind nur palliativ, nicht kurativ 9. Daher zeichnet sich Hirnmetastasen als die nächste imposante Herausforderung in dieser Ära neuer Krebstherapien. Zur Bewältigung jeden Tag in der Klinik die ungedeckten Herausforderung Patienten konfrontiert, brauchen wir dringend um besser auf die zugrunde liegenden Mechanismus der Hirnmetastasen zu verstehen und dieses Wissen nutzen, um neue Therapien zu entwickeln. <pclass = &quot;jove_content&quot;&gt; Successful Kolonisierung des Gehirns durch metastatische Krebszellen erfordert die Leistung einer Reihe von durch die komplizierte Wechselwirkung mehrerer biologischer Spieler vermittelte Funktionen, wie den Bypass der Blut-Hirn-Schranke (BBB) ​​und die Flucht aus dem Gehirn des intrinsischen Immunabwehrmechanismen 10, von denen keine in einer ex vivo oder in vitro System rekapituliert wird. Daher sind geeignete und treu in - vivo - Modellen von entscheidender Bedeutung für Studien von Hirnmetastasen. Eine herkömmliche in vivo Metastasen Assay führt Krebszellen via Schwanzveneninjektion, was die Mehrzahl der Zellen in der Lunge untergebracht zu werden. Gehirn Metastasen nur selten in diesen Modellen produziert , bevor sie von Tumorbelastung in der Lunge 11 verursacht Tier Tod. Direkte intrazerebrale Injektion von Krebszellen produziert konsistente Tumorauswuchs im ZNS und weit in den Studien von primären Gliomen verwendet wird. Jedoch such Injektion beeinträchtigt die BBB und verursacht eine traumatische Verletzung an der Injektionsstelle, die beide wichtige Punkte der Besorgnis über die physiologische Relevanz dieses Modells. Ein anderes häufig verwendetes Krebszelle Einführung Weg, Intrakardial, ist einfach zu verwalten und experimentelle Metastasierung des ZNS erzeugt. Allerdings sind gleichzeitig Metastasen zu Organ anderen Stellen als das ZNS immer produziert und können Tiersterblichkeit 11 verursachen; Daher macht es die hohe Variabilität dieses Modells ungeeignet für quantitative Bewertung der biologischen Mechanismen oder therapeutische Mittel mit einer begrenzten Anzahl von Tieren. Hier haben wir die Verfahren beschreiben experimentelle Hirnmetastasen über die Injektion von Krebszellen in die Arteria carotis communis erzeugen. Wir haben diesen Ansatz Beiträge zur metastatischen Kaskade von Hirnmetastasen &quot;einzelner Gene zu sezieren und Wirksamkeit der therapeutischen Intervention zu bewertens 12, 13. Die Hauptvorteile dieses Ansatzes sind der hohe Grad an Reproduzierbarkeit und geringer Grad an Variabilität; Der größte Nachteil ist die Raffinesse und Geschicklichkeit erforderlich, um die Mikrochirurgie durchzuführen.

<table><tbody><tr><td>Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K113</td><td></td></tr><tr><td>Routine Stereomicroscope Leica M50</td><td>Leica</td><td>M50</td><td>The microscope is modular and highly configurable to fit particular space requirements.</td></tr><tr><td>Surgical disposable scapel</td><td>Integra Miltex</td><td>4-410</td><td>to make skin incisions</td></tr><tr><td>Tissue Forceps - 1 x 2 Teeth</td><td>Fine Science Tools</td><td>11021-12</td><td>to bluntly dissect mucles</td></tr><tr><td>Dumont #5 - Mirror Finish Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-23</td><td>to separate and prepare the carotid artery for injection</td></tr><tr><td>Spring Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15025-10</td><td>to cut sutures</td></tr><tr><td>EZ Clip Kit</td><td>Stoelting</td><td>59020</td><td>for wound cloure</td></tr><tr><td>BD Insulin Syringe</td><td>Becton Dickinson</td><td>328438</td><td>for cell injection</td></tr><tr><td>IVIS Spectrum &lt;em&gt;In Vivo&lt;/em&gt; Imaging System</td><td>PerkinElmer</td><td>124262</td><td></td></tr></tbody></table>

intracarotid cancer cell injection to produce mouse models of brain metastasis

Metastasierung, die Ausbreitung und das Wachstum von bösartigen Zellen an sekundären Standorten innerhalb des Körpers eines Patienten, Konten für&gt; 90% der durch Krebs verursachten Todesfälle. Vor kurzem haben beeindruckende Fortschritte in der neuartigen Therapien dramatisch das Überleben und die Verbesserung der Lebensqualität verlängert für viele Krebspatienten. Leider ist schnell metastasierendem Rezidive Inzidenz von Gehirn steigt, und alle aktuellen Therapien sind nur palliative. Daher sind gute experimentelle Tiermodelle dringend notwendig in eingehende Studien der Biologie von Krankheiten zu erleichtern und neuartige Therapieschemata für die präklinische Evaluierung zu beurteilen. Jedoch erzeugt die Standard - in - vivo - Metastase Assay über Schwanzveneninjektion von Krebszellen überwiegend Lunge Metastasen; Tiere in die Lunge Tumorbelastung vor eine sinnvolle Auswuchs von Hirnmetastasen erliegen gewöhnlich. Intrakardial von Tumorzellen produziert metastatischen Läsionen zu multiplen Organ Websites einschließlich des Gehirns; jedoch die variabikeit des Tumorwachstums mit diesem Modell hergestellt ist groß, bei der Bewertung der therapeutischen Wirksamkeit seiner Nützlichkeit dämpfend. So generieren zuverlässige und konsistente Tiermodelle für Hirnmetastasen Studie beschreiben wir ein Verfahren zur Herstellung von experimentellen Hirnmetastasen in der Hausmaus (Mus musculus) über intracarotid Injektion von Tumorzellen. Dieser Ansatz ermöglicht eine große Anzahl von Hirnmetastasen tragenden Mäuse mit ähnlichen Wachstum und Mortalität Eigenschaften zu erzeugen, so dass die Forschungsanstrengungen zu erleichtern grundlegende biologische Mechanismen zu untersuchen und neuartige therapeutische Mittel zu beurteilen.

Es gibt zwei Punkte, an denen die Qualität der Injektion ausgewertet werden kann. Die erste Chance wird durch die Beobachtung des Bedieners während der Injektion von Blutgefäßen Farben ändern. Leckage aus armen Injektionen können leicht unter dem Binokular beobachtet werden. Die stetige und sichere Platzierung des Mauskörpers (1A) und seine Arteria carotis (Abbildung 1B) auf der Stützwattebausch sind kritische Faktoren für glatte und erfolgreich...

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Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Hirnmetastasen hat ein dringender medizinischer Bedarf werden wie ihre Häufigkeit zugenommen hat, während therapeutische Optionen palliative geblieben sind. Erstellen von experimentellen Tiermodellen von Hirnmetastasen über intracarotid arterielle Injektion von Krebszellen erleichtert mechanistische Untersuchungen der Krankheitsbiologie und Evaluierung neuartiger Interventions Regimen.

Intracarotid Cancer Cell Injection zu produzieren Mausmodelle von Hirnmetastase

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

26.4K Aufrufe.  The University of Texas MD Anderson Cancer Center.  Hirnmetastasen hat ein dringender medizinischer Bedarf werden wie ihre Häufigkeit zugenommen hat, während therapeutische Optionen palliative geblieben sind. Erstellen von experimentellen Tiermodellen von Hirnmetastasen über intracarotid arterielle Injektion von Krebszellen erleichtert mechanistische Untersuchungen der Krankheitsbiologie und Evaluierung neuartiger Interventions Regimen. 

Serie: Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely used intra-cardiac and intra-tibial injections, IIA injection brings several advantages. First, it can deliver a large quantity of cancer cells specifically to hind limb bones, thereby providing spatiotemporally synchronized early-stage colonization events and allowing robust quantification and swift detection of disseminated tumor cells. Second, it injects cancer cells into the circulation without damaging the local tissues, thereby avoiding inflammatory and wound-healing processes that confound the bone colonization process. Third, IIA injection causes very little metastatic growth in non-bone organs, thereby preventing animals from succumbing to other vital metastases, and allowing continuous monitoring of indolent bone lesions. These advantages are especially useful for the inspection of progression from single cancer cells to multi-cell micrometastases, which has largely been elusive in the past. When combined with cutting-edge approaches of biological imaging and bone histology, IIA injection can be applied to various research purposes related to bone metastases.

This manuscript provides the detailed procedure of intra-iliac artery (IIA) injection, a technique to deliver cancer cells specifically to hind limb tissues including bones to establish experimental bone metastases. Although initially established with breast tumor models, this protocol can be easily extended to other cancer types.

Intra-Beckenarterie Injection für effiziente und selektive Modellierung von Mikroskopische Knochenmetastasen

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely ...

Forschung

Krebsforschung

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are particularly devastating, difficult to treat, and confer a poor prognosis. While the precise incidence of brain metastases in the United States remains hard to estimate, it is likely to increase as extracranial therapies continue to become more efficacious in treating cancer. Thus, it is necessary to identify and develop novel therapeutic approaches to treat metastasis at this site. To this end, intracranial injection of cancer cells has become a well-established method in which to model brain metastasis. Previously, the inability to directly measure tumor growth has been a technical hindrance to this model; however, increasing availability and quality of small animal imaging modalities, such as magnetic resonance imaging (MRI), are vastly improving the ability to monitor tumor growth over time and infer changes within the brain during the experimental period. Herein, intracranial injection of murine mammary tumor cells into immunocompetent mice followed by MRI is demonstrated. The presented injection approach utilizes isoflurane anesthesia and a stereotactic setup with a digitally controlled, automated drill and needle injection to enhance precision, and reduce technical error. MRI is measured over time using a 9.4 Tesla instrument in The Ohio State University James Comprehensive Cancer Center Small Animal Imaging Shared Resource. Tumor volume measurements are demonstrated at each time point through use of ImageJ. Overall, this intracranial injection approach allows for precise injection, day-to-day monitoring, and accurate tumor volume measurements, which combined greatly enhance the utility of this model system to test novel hypotheses on the drivers of brain metastases.

Intracranial brain metastasis modeling is complicated by an inability to monitor tumor size and response to treatment with precise and timely methods. The presented methodology couples intracranial tumor injection with magnetic resonance imaging analysis, which when combined, cultivates precise and consistent injections, enhanced animal monitoring, and accurate tumor volume measurements.

Modellierung von Hirnmetastasen durch intrakranielle Injektion und Magnetresonanztomographie

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are ...

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are diagnosed with brain metastases each year. Significant progress has been made in improving survival outcomes for patients with primary breast cancer and systemic malignancies; however, the dismal prognosis for patients with clinical brain metastases highlights the urgent need to develop novel therapeutic agents and strategies against this deadly disease. The lack of suitable experimental models has been one of the major hurdles impeding advancement of our understanding of brain metastasis biology and treatment. Herein, we describe a xenograft mouse model of brain metastasis generated via tail-vein injection of an endogenously HER2-amplified cell line derived from inflammatory breast cancer (IBC), a rare and aggressive form of breast cancer. Cells were labeled with firefly luciferase and green fluorescence protein to monitor brain metastasis, and quantified metastatic burden by bioluminescence imaging, fluorescent stereomicroscopy, and histologic evaluation. Mice robustly and consistently develop brain metastases, allowing investigation of key mediators in the metastatic process and the development of preclinical testing of new treatment strategies.

We describe a xenograft mouse model of breast cancer brain metastasis generated via tail-vein injection of an endogenously HER2-amplified inflammatory breast cancer cell line.

Modellierung der Hirnmetastasierung durch Injektion von entzündlichen Brustkrebszellen in die Schwanzvene

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are ...

Ultrasound Imaging-guided Intracardiac Injection to Develop a Mouse Model of Breast Cancer Brain Metastases Followed by Longitudinal MRI

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 months. It is critical to have suitable animal models to mimic the hemodynamic spread of the metastatic cells in the clinical scenario. Here, we are introducing the use of small animal ultrasound imaging to guide an accurate injection of brain tropical breast cancer cells into the left ventricle of athymic nude mice. Longitudinal MRI is used to assessing intracranial initiation and growth of brain metastases. Ultrasound-guided intracardiac injection ensures not only an accurate injection and hereby a higher successful rate but also significantly decreased mortality rate, as compared to our previous manual procedure. In vivo high resolution MRI allows the visualization of hyperintense multifocal lesions, as small as 310 &#181;m in diameter on T2-weighted images at 3 weeks post injection. Follow-up MRI reveals intracranial tumor growth and increased number of metastases that distribute throughout the whole brain.

A breast cancer brain metastasis mouse model is established with ultrasound imaging-guided intracardiac injection of MDA-MB231/Br-GFP cells. Development of multifocal intracranial metastases has been monitored longitudinally using high-resolution 9.4 T MRI.

Ultraschall-Imaging-guided Intra Injection zur Entwicklung eines Mausmodells von Brustkrebs Hirnmetastasen durch Längs MRI Gefolgt

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 ...

Medizin

Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Critical aspects of metastatic diseases, such as the complex neural microenvironment and stromal cell interaction, cannot be entirely replicated with in vitro assays; thus, animal models are critical for investigating and understanding the effects of therapeutic intervention. However, most brain tumor xenografting methods do not produce brain metastases consistently in terms of the time frame and tumor burden. Brain metastasis models generated by intracardiac injection of cancer cells can result in unintended extracranial tumor burden and lead to non-brain metastatic morbidity and mortality. Although intracranial injection of cancer cells can limit extracranial tumor formation, it has several caveats, such as the injected cells frequently form a singular tumor mass at the injection site, high leptomeningeal involvement, and damage to brain vasculature during needle penetration. This protocol describes a mouse model of brain metastasis generated by internal carotid artery injection. This method produces intracranial tumors consistently without the involvement of other organs, enabling the evaluation of therapeutic agents for brain metastasis.

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Most brain metastasis mouse models are complicated by systemic metastases confounding analysis of mortality and therapeutic intervention outcomes. Presented here is a protocol for internal carotid injection of cancer cells that produces consistent intracranial tumors with minimal systemic tumors.

Modellierung der Hirnmetastasierung durch Injektion von Krebszellen in die innere Halsschlagader

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Critical aspects of metastatic diseases, such as the complex neural ...

Intracranial Cannula Implantation for Serial Locoregional Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Infusions in Mice

Pediatric CNS tumors are responsible for the majority of cancer-related deaths in children and have poor prognoses, despite advancements in chemotherapy and radiotherapy. As many tumors lack efficacious treatments, there is a crucial need to develop more promising therapeutic options, such as immunotherapies; the use of chimeric antigen receptor (CAR) T cell therapy&#160;directed against CNS tumors is of particular interest. Cell surface targets such as B7-H3, IL13RA2, and the disialoganglioside GD2 are highly expressed on the surface of several pediatric and adult CNS tumors,&#160;raising the opportunity to use CAR T cell therapy against these and other surface targets. To evaluate the repeated locoregional delivery of CAR T cells in preclinical murine models, an indwelling catheter system that recapitulates indwelling catheters currently being used in human clinical trials was established. Unlike stereotactic delivery, the indwelling catheter system allows for repeated dosing without the use of multiple surgeries. This protocol describes the intratumoral placement of a fixed guide cannula that has been used to successfully test serial CAR T cell infusions in orthotopic murine models of pediatric brain tumors. Following orthotopic injection and engraftment of the tumor cells in mice, intratumoral placement of a fixed guide cannula is completed on a stereotactic apparatus and secured with screws and acrylic resin. Treatment cannulas are then inserted through the fixed guide cannula for repeated CAR T cell delivery. Stereotactic placement of the guide cannula can be adjusted to deliver CAR T cells directly into the lateral ventricle or other locations in the brain. This platform offers a reliable mechanism for the preclinical testing of repeated intracranial infusions of CAR T cells and other novel therapeutics for these devastating pediatric tumors.

Intracranial Cannula Implantation for Serial Locoregional Chimeric Antigen Receptor CAR T Cell Infusions in Mice

Central nervous system (CNS) tumors are the leading cause of cancer-related death in children, and locoregional immune-based therapies are increasingly being tested for patients in clinical trials. This protocol describes methods for locoregional cannula implantation in mice for the preclinical evaluation of immunotherapeutic infusions targeting CNS tumors.

Intrakranielle Kanülenimplantation für serielle lokoregionäre chimäre Antigenrezeptor (CAR) T-Zell-Infusionen in Mäusen

Pediatric CNS tumors are responsible for the majority of cancer-related deaths in children and have poor prognoses, despite advancements in chemotherapy ...

<meta charset="utf8"></head><body>Reparatur der Arteria carotis communis nach Injektion in einem Mausmodell

Facilitating Repeat Intracarotid Injections in Mouse Models by a Novel Injection Site Repair Technique

Given recent advances in the delivery of novel antitumor therapeutics using endovascular selective intraarterial delivery methods in neuro-oncology, there is an urgent need to develop methods for intracarotid injections in mouse models, including methods to repair the carotid artery in mice after injection to allow for subsequent injections. We developed a method of intracarotid injection in a mouse model to deliver therapeutics into the internal carotid artery (ICA) with two alternative procedures. 
During injection, the needle is inserted into the common carotid artery (CCA) after tying a suture around the external carotid artery (ECA) and injected therapeutics are delivered into the ICA. Following injection, the common carotid artery (CCA) can be ligated, which limits the number of intracarotid injections to one. The alternative procedure described in this article includes a modification where intracarotid artery injection is followed by injection site repair of the CCA, which restores blood flow within the CCA and avoids the complication of cerebral ischemia seen in some mouse models. 
We also compared the delivery of bone marrow-derived human mesenchymal stem cells (BM-hMSCs) to intracranial tumors when delivered through intracarotid injection with and without injection site repair following the injection. Delivery of BM-hMSCs does not differ significantly between the methods. Our results demonstrate that injection site repair of the CCA allows for repeat injections through the same artery and does not impair the delivery and distribution of injected material, thus providing a model with greater flexibility that more closely emulates intracarotid injection in humans.

<meta charset="utf8"></head><body>Autor im Rampenlicht: Weiterentwicklung der Glioblastombehandlung durch intraarterielle Verabreichungsstrategien für onkolytische Viren und microRNAs

Repair of the intracarotid artery in a mouse model after injection returns blood flow to the artery without negatively impacting the distribution of the injected material. Injection site repair facilitates subsequent injections through the same artery and prevents cerebral ischemia in mouse strains that lack a complete Circle of Willis.

Erleichterung wiederholter Intrakarotis-Injektionen in Mausmodellen durch eine neuartige Reparaturtechnik an der Injektionsstelle

Given recent advances in the delivery of novel antitumor therapeutics using endovascular selective intraarterial delivery methods in neuro-oncology, there ...

Modeling Brain Tumor Metastasis via Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

<a href='https://app.jove.com/v/23284/modeling-brain-tumor-metastasis-via-internal-carotid-artery-injection'>Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)</a>In this video, an anesthetized mouse undergoes a surgical procedure in which cancer cells are injected into the common carotid artery (CCA) to facilitate targeted delivery to the brain. The procedure involves precise suturing and manipulation of the carotid arteries to direct the injected cells toward the internal carotid artery (ICA), promoting tumor formation in the brain over time.

Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)In this video, an anesthetized ...

Intracarotid Cancer Cell Injection zu produzieren Mausmodelle von Hirnmetastase

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