Name: intracarotid cancer cell injection to produce mouse models of brain metastasis
Uploaded: 2017-02-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 43 s
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The authors have no acknowledgements.

déclaration éthique: Toutes les études animales ont été approuvées par le Comité institutionnel des animaux soin et l&#39;utilisation (IACUC) de l&#39;Université du Texas MD Anderson Cancer Center. 1. Préparation de cellules cancéreuses pour injection <ol><li> Ensemencer les cellules cancéreuses d&#39;un ou deux jours avant l&#39;injection. Utilisez DMEM / F12 supplémenté avec 10% de FBS, à moins qu&#39;un moyen de spécialité est indiqué dans la littérature pour une lignée cellulaire particulière. </li><li> Le jour de l&#39;opération chirurgicale, les cellules de la récolte quand ils atteignent 70-80% de confluence par un premier lavage avec un milieu sans sérum une fois avant trypsinisation (0,25%) pendant 1 - 2 min à 37 ° C. Ajouter dans les cellules de 10% de FBS contenant du milieu DMEM / F12 pour étancher la trypsine à 0,25%. </li><li> Centrifuger les cellules à 80 × g pendant 3 min. Laver les cellules dans un milieu sans sérum deux fois pour éliminer le sérum résiduel, compter les cellules avec un hémocytomètre et remettre en suspension dans une solution saline équilibrée de Hank (HBSS) à 1 - 5 x 10 6 cellules / ml, en fonction de la lignée cellulaire. Gardez sur la glacejusqu&#39;au moment de l&#39;injection. REMARQUE: MDA-MB-231 cellules de cancer du sein et des cellules de mélanome K1735 ont été utilisés dans cette étude, et les deux lignées cellulaires ont été utilisées à 2 x 10 6 cellules / ml de concentration. Gardez la durée de trypsinisation aussi courte que possible que surtraitement peut influencer les résultats des tests de métastases. </li></ol> 2. Préparer les souris pour cellules tumorales Injection <ol><li> Anesthetize souris par voie intrapéritonéale (ip) injection de kétamine / xylazine cocktail (kétamine 100 mg / kg, xylazine 10 mg / kg). </li><li> Confirmer anesthésie complète en pinçant les pieds des animaux et observer l&#39;absence de réponse. </li><li> Placez la souris sur une plaque de verre (utilisé pour la coulée de gels de protéines), et fixer avec des bandes de caoutchouc. </li><li> Si nécessaire, enlever les poils du cou par le rasage ou en appliquant une petite quantité de produit d&#39;épilation et essuyer les cheveux avec une serviette en papier. NOTE: Si vous utilisez la souris nude, sauter cette étape car ils ne possèdent pas les poils du corps. </li><li> Nettoyer la peau du cou en appliquantpovidone-iode et 70% d&#39;alcool. </li><li> Placer la souris sur platine du microscope à dissection </li><li> Faire une incision dans la peau ~ 1 cm de long avec un scalpel chirurgical. </li><li> Carrément disséquer le muscle avec une pince à dents pour exposer l&#39;artère carotide en dessous. </li><li> Séparer l&#39;artère carotide du nerf pneumogastrique adjacente avec des pinces chirurgicales. </li><li> En utilisant des pinces chirurgicales, séparer un peu de coton à partir d&#39;une boule de coton, humidifier, et de la mode dans une boule de coton plus petit. Placez cette boule de coton tampon humidifié sous l&#39;artère carotide du site prévu de l&#39;injection. </li><li> Placez une extrémité distale de suture et à proximité de la boule de coton et faire des noeuds lâches. Serrez le noeud proximal pour bloquer le flux sanguin dans le site d&#39;injection. </li><li> Passez à l&#39;injection des cellules cancéreuses si l&#39;artère carotide sur la boule de coton apparaît totalement sous pression avec du sang rouge frais. </li></ol> 3. Cancer cellulaire injection dans l&#39;artère carotide <ol><li> Vortex et d&#39;en tirer 100 pi oles cellules cancéreuses f dans la seringue. </li><li> Sous le microscope de dissection, insérez lentement le G aiguille 31 (avec biseau vers le haut) dans la lumière de l&#39;artère carotide assis sur le dessus de la boule de coton. </li><li> injecter lentement les cellules de la seringue dans l&#39;artère carotide. injection réussie peut être observée au microscope par la couleur changeante des vaisseaux sanguins à proximité et la musculature lorsque les cellules cancéreuses tamponnées sont poussés dans la circulation. </li><li> Lors de l&#39;injection de la totalité du volume est terminée, lever l&#39;artère carotide distale doucement pour éviter la régurgitation. </li><li> serrez rapidement le noeud distal pour terminer le processus d&#39;injection. </li><li> Après avoir terminé l&#39;injection, serrer les ligatures et couper la suture de soie en excès avec des micro-ciseaux sous le microscope de dissection. Reculer le muscle séparé pour couvrir le site de la plaie. Fermer la peau avec deux agrafes. </li></ol> 4. Récupération chirurgicale <ol><li> Déplacer l&#39;animal opéré sur un coussin chauffantpour la récupération. Il peut prendre 30 - 60 min pour que les animaux reprennent conscience. En attendant, administrer la buprénorphine (0,05 mg / kg) par injection sous - cutanée comme l&#39; analgésie post-chirurgicale. Remarque: L&#39;analgésie doit être fourni en fonction de votre IACUC locale protocole approuvé. </li><li> Une fois que les animaux se réveillent et reprennent leur comportement normal, retourner les souris à l&#39;emplacement de leur logement. Fournir des souris avec de la nourriture de gel pendant plusieurs jours après la chirurgie. Tenir un registre chirurgical et le garder dans la chambre. </li></ol> 5. Non-invasive imagerie in vivo <ol><li> Pour les cellules marquées avec des constructions rapporteurs luciférase, mesurer l&#39; efficacité des cellules cancéreuses d&#39;injection in vivo en utilisant le système d&#39;imagerie 14. REMARQUE: L&#39;imagerie est pas effectuée le jour de l&#39;injection pour éviter des contraintes excessives aux animaux de recherche. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Les étapes les plus critiques pour l&#39;injection artérielle carotidienne réussie de cellules cancéreuses sont: 1) une anesthésie profonde de la souris en vue d&#39;une opération chirurgicale; 2) mise en place régulière de l&#39;artère carotide au-dessus du support de coton; 3) la ligature serrée de l&#39;artère carotide après l&#39;injection réussie. anesthésie profonde de ~ 30 min est généralement nécessaire pour une performance chirurgicale régulière sous le microscope...

La métastase du cancer du système nerveux central (SNC) est une maladie dévastatrice, et peut impliquer soit le parenchyme cérébral ou les méninges ( «métastases cérébrales» désigne à la fois dans cet article). Il est la tumeur maligne intracrânienne prédominante, dépassant les gliomes primaires par&gt; 10: 1 1, 2. Le cancer du poumon, le cancer du sein et le mélanome sont les trois principales maladies néoplasiques principales qui produisent une forte incidence de métastases cérébrales 3, 4. Au cours des dernières années, des progrès impressionnants dans de nouvelles thérapies contre le cancer ont considérablement prolongé la survie et l&#39;amélioration de la qualité de vie de nombreux patients atteints de cancer. Cependant, lors de la récurrence, l&#39;incidence des métastases cérébrales augmente rapidement. Par exemple, le trastuzumab anticorps anti-HER2 (Herceptin) a démontré une efficacité clinique significative chez les patients atteints HER2 cancer du sein; encore une tendance inquiétante est apparuechez ces patients: jusqu&#39;à 1/3 de ceux dont la maladie systémique extracrânien initialement bénéficié d&#39; un traitement de trastuzumab plus tard développer des métastases cérébrales 5, 6, 7. Malheureusement, les patients atteints de métastases cérébrales sont réfractaires à presque tous les traitements actuels, connaît généralement une détérioration traumatique de la qualité de vie et leur survie à un an après le diagnostic est seulement ~ 20% 8. Les thérapies actuelles pour des métastases cérébrales (y compris des stéroïdes, la radiothérapie crânienne, et la résection chirurgicale chez des patients sélectionnés) sont palliatifs simplement, non curatif 9. Par conséquent, des métastases cérébrales est en train de devenir le prochain imposant défi en cette ère de nouvelles thérapies contre le cancer. Pour relever le défi non satisfaits des patients sont confrontés chaque jour à la clinique, il est urgent de mieux comprendre le mécanisme sous-jacent de métastases cérébrales et utiliser ces connaissances pour développer de nouvelles thérapies. <pclass = &quot;jove_content&quot;&gt; colonisation réussie du cerveau par des cellules cancéreuses métastatiques nécessite des performances d&#39;une série de fonctions médiées par l&#39;interaction complexe de plusieurs joueurs biologiques, tels que le by-pass de la barrière hémato-encéphalique (BBB) ​​et d&#39;échapper à partir du cerveau de intrinsèque des mécanismes de défense immunitaire 10, aucune d&#39; entre elles est récapitulée dans une ex vivo ou in vitro. système Par conséquent, bon et fidèle des modèles in vivo sont critiques pour les études de métastases cérébrales. Un essai classique dans les métastases in vivo des cellules cancéreuses introduit par injection dans la veine caudale, ce qui entraîne la majorité des cellules à se loger dans les poumons. Lésions métastatiques cérébrales sont rarement produites dans ces modèles avant la mort animale causée par la charge tumorale dans les poumons 11. injection intracérébrale directe des cellules cancéreuses de la tumeur produit excroissance constante dans le système nerveux central et est largement utilisé dans les études de gliomes primaires. Cependant, sinjection uch compromet la BHE et provoque des lésions traumatiques au niveau du site d&#39;injection, les deux principaux points de préoccupation quant à la pertinence physiologique de ce modèle. Une autre cellule cancéreuse l&#39;introduction voie fréquemment utilisé, l&#39;injection intracardiaque, est facile à administrer et ne produit métastase expérimentale au SNC. Cependant, les métastases simultanées vers des sites d&#39;organes autres que le SNC sont toujours produites et peuvent causer la mortalité des animaux 11; par conséquent, le degré élevé de variabilité de ce modèle, il est inapproprié pour l&#39;évaluation quantitative des mécanismes biologiques ou d&#39;agents thérapeutiques avec un nombre limité d&#39;animaux. Nous décrivons ici les procédures pour produire expérimentale des métastases cérébrales via l&#39;injection de cellules cancéreuses dans l&#39;artère carotide commune. Nous avons utilisé cette approche pour disséquer les contributions des gènes individuels à la cascade métastatique des métastases cérébrales et d&#39;évaluer l&#39;efficacité d&#39;une intervention thérapeutiques 12, 13. Les principaux avantages de cette approche sont le degré élevé de reproductibilité et de faible degré de variabilité; l&#39;inconvénient majeur est la sophistication et de la dextérité nécessaire pour réaliser la microchirurgie.

<table><tbody><tr><td>Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K113</td><td></td></tr><tr><td>Routine Stereomicroscope Leica M50</td><td>Leica</td><td>M50</td><td>The microscope is modular and highly configurable to fit particular space requirements.</td></tr><tr><td>Surgical disposable scapel</td><td>Integra Miltex</td><td>4-410</td><td>to make skin incisions</td></tr><tr><td>Tissue Forceps - 1 x 2 Teeth</td><td>Fine Science Tools</td><td>11021-12</td><td>to bluntly dissect mucles</td></tr><tr><td>Dumont #5 - Mirror Finish Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-23</td><td>to separate and prepare the carotid artery for injection</td></tr><tr><td>Spring Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15025-10</td><td>to cut sutures</td></tr><tr><td>EZ Clip Kit</td><td>Stoelting</td><td>59020</td><td>for wound cloure</td></tr><tr><td>BD Insulin Syringe</td><td>Becton Dickinson</td><td>328438</td><td>for cell injection</td></tr><tr><td>IVIS Spectrum &lt;em&gt;In Vivo&lt;/em&gt; Imaging System</td><td>PerkinElmer</td><td>124262</td><td></td></tr></tbody></table>

intracarotid cancer cell injection to produce mouse models of brain metastasis

Les métastases, la prolifération et la croissance des cellules malignes à des sites secondaires à l&#39;intérieur du corps d&#39;un patient, représente&gt; 90% de la mortalité liée au cancer. Récemment, des progrès impressionnants dans les nouvelles thérapies ont considérablement prolongé la survie et l&#39;amélioration de la qualité de vie de nombreux patients atteints de cancer. Malheureusement, l&#39;incidence du cerveau récurrences métastatiques est en augmentation rapide, et toutes les thérapies actuelles ne sont que des palliatifs. Par conséquent, de bons modèles animaux expérimentaux sont nécessaires de toute urgence pour faciliter les études approfondies de la biologie de la maladie et d&#39;évaluer de nouveaux schémas thérapeutiques pour l&#39;évaluation préclinique. Cependant, la norme dans le dosage des métastases in vivo via une injection dans la veine caudale des cellules cancéreuses produit principalement des lésions métastasiques du poumon; animaux succombent généralement à la charge de la tumeur du poumon avant toute excroissance significative des métastases cérébrales. l&#39;injection intracardiaque de cellules tumorales produit des lésions métastatiques à des sites multiples organes, y compris le cerveau; cependant, le variabilité de la croissance tumorale produite avec ce modèle est grand, freinant son utilité dans l&#39;évaluation de l&#39;efficacité thérapeutique. Pour générer des modèles animaux fiables et cohérentes pour l&#39; étude du cerveau de métastases, ici , nous décrivons une procédure pour la production expérimentale des métastases du cerveau dans la maison de souris (Mus musculus) par injection intracarotidienne des cellules tumorales. Cette approche permet de produire un grand nombre de cerveau des souris métastase porteurs ayant des caractéristiques de croissance et de mortalité similaires, facilitant ainsi les efforts de recherche pour étudier les mécanismes biologiques de base et d&#39;évaluer de nouveaux agents thérapeutiques.

Il y a deux points où la qualité de l&#39;injection peut être évaluée. La première occasion est par l&#39;observation de l&#39;opérateur de changer les couleurs des vaisseaux sanguins lors de l&#39;injection. Fuites d&#39;injections pauvres peut être facilement observé sous le microscope de dissection. Le placement stable et sécurisé du corps de la souris (figure 1A) et son artère carotide (figure 1B) sur la boule de coton de soutien sont des...

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Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

métastases cérébrales est devenu un besoin médical non satisfait urgent que son incidence a augmenté tandis que les options thérapeutiques sont restés palliatifs. La création de modèles animaux expérimentaux de métastases cérébrales par injection artérielle intracarotidienne des cellules cancéreuses facilite les études mécanistiques de la biologie de la maladie et l&#39; évaluation de nouveaux schémas d&#39;intervention.

Intracarotidienne Cancer Cell Injection pour produire des modèles de souris de Brain Métastase

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

26.4K vues.  The University of Texas MD Anderson Cancer Center.  métastases cérébrales est devenu un besoin médical non satisfait urgent que son incidence a augmenté tandis que les options thérapeutiques sont restés palliatifs. La création de modèles animaux expérimentaux de métastases cérébrales par injection artérielle intracarotidienne des cellules cancéreuses facilite les études mécanistiques de la biologie de la maladie et l' évaluation de nouveaux schémas d'intervention. 

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Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely used intra-cardiac and intra-tibial injections, IIA injection brings several advantages. First, it can deliver a large quantity of cancer cells specifically to hind limb bones, thereby providing spatiotemporally synchronized early-stage colonization events and allowing robust quantification and swift detection of disseminated tumor cells. Second, it injects cancer cells into the circulation without damaging the local tissues, thereby avoiding inflammatory and wound-healing processes that confound the bone colonization process. Third, IIA injection causes very little metastatic growth in non-bone organs, thereby preventing animals from succumbing to other vital metastases, and allowing continuous monitoring of indolent bone lesions. These advantages are especially useful for the inspection of progression from single cancer cells to multi-cell micrometastases, which has largely been elusive in the past. When combined with cutting-edge approaches of biological imaging and bone histology, IIA injection can be applied to various research purposes related to bone metastases.

This manuscript provides the detailed procedure of intra-iliac artery (IIA) injection, a technique to deliver cancer cells specifically to hind limb tissues including bones to establish experimental bone metastases. Although initially established with breast tumor models, this protocol can be easily extended to other cancer types.

Intra-iliaque Artère injection pour la modélisation efficace et sélective des métastases osseuses Microscopique

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely ...

Recherche

Recherche en cancérologie

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are particularly devastating, difficult to treat, and confer a poor prognosis. While the precise incidence of brain metastases in the United States remains hard to estimate, it is likely to increase as extracranial therapies continue to become more efficacious in treating cancer. Thus, it is necessary to identify and develop novel therapeutic approaches to treat metastasis at this site. To this end, intracranial injection of cancer cells has become a well-established method in which to model brain metastasis. Previously, the inability to directly measure tumor growth has been a technical hindrance to this model; however, increasing availability and quality of small animal imaging modalities, such as magnetic resonance imaging (MRI), are vastly improving the ability to monitor tumor growth over time and infer changes within the brain during the experimental period. Herein, intracranial injection of murine mammary tumor cells into immunocompetent mice followed by MRI is demonstrated. The presented injection approach utilizes isoflurane anesthesia and a stereotactic setup with a digitally controlled, automated drill and needle injection to enhance precision, and reduce technical error. MRI is measured over time using a 9.4 Tesla instrument in The Ohio State University James Comprehensive Cancer Center Small Animal Imaging Shared Resource. Tumor volume measurements are demonstrated at each time point through use of ImageJ. Overall, this intracranial injection approach allows for precise injection, day-to-day monitoring, and accurate tumor volume measurements, which combined greatly enhance the utility of this model system to test novel hypotheses on the drivers of brain metastases.

Intracranial brain metastasis modeling is complicated by an inability to monitor tumor size and response to treatment with precise and timely methods. The presented methodology couples intracranial tumor injection with magnetic resonance imaging analysis, which when combined, cultivates precise and consistent injections, enhanced animal monitoring, and accurate tumor volume measurements.

Modélisation des métastases cérébrales par injection intracrânienne et imagerie par résonance magnétique

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are ...

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are diagnosed with brain metastases each year. Significant progress has been made in improving survival outcomes for patients with primary breast cancer and systemic malignancies; however, the dismal prognosis for patients with clinical brain metastases highlights the urgent need to develop novel therapeutic agents and strategies against this deadly disease. The lack of suitable experimental models has been one of the major hurdles impeding advancement of our understanding of brain metastasis biology and treatment. Herein, we describe a xenograft mouse model of brain metastasis generated via tail-vein injection of an endogenously HER2-amplified cell line derived from inflammatory breast cancer (IBC), a rare and aggressive form of breast cancer. Cells were labeled with firefly luciferase and green fluorescence protein to monitor brain metastasis, and quantified metastatic burden by bioluminescence imaging, fluorescent stereomicroscopy, and histologic evaluation. Mice robustly and consistently develop brain metastases, allowing investigation of key mediators in the metastatic process and the development of preclinical testing of new treatment strategies.

We describe a xenograft mouse model of breast cancer brain metastasis generated via tail-vein injection of an endogenously HER2-amplified inflammatory breast cancer cell line.

Modélisation des métastases cérébrales par injection veineuse de cellules inflammatoires du cancer du sein

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are ...

Ultrasound Imaging-guided Intracardiac Injection to Develop a Mouse Model of Breast Cancer Brain Metastases Followed by Longitudinal MRI

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 months. It is critical to have suitable animal models to mimic the hemodynamic spread of the metastatic cells in the clinical scenario. Here, we are introducing the use of small animal ultrasound imaging to guide an accurate injection of brain tropical breast cancer cells into the left ventricle of athymic nude mice. Longitudinal MRI is used to assessing intracranial initiation and growth of brain metastases. Ultrasound-guided intracardiac injection ensures not only an accurate injection and hereby a higher successful rate but also significantly decreased mortality rate, as compared to our previous manual procedure. In vivo high resolution MRI allows the visualization of hyperintense multifocal lesions, as small as 310 &#181;m in diameter on T2-weighted images at 3 weeks post injection. Follow-up MRI reveals intracranial tumor growth and increased number of metastases that distribute throughout the whole brain.

A breast cancer brain metastasis mouse model is established with ultrasound imaging-guided intracardiac injection of MDA-MB231/Br-GFP cells. Development of multifocal intracranial metastases has been monitored longitudinally using high-resolution 9.4 T MRI.

Ultrasound Imaging guidée injection intracardiaque de développer un modèle de souris de cancer du sein métastases cérébrales Suivi par IRM longitudinale

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 ...

Médecine

Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Critical aspects of metastatic diseases, such as the complex neural microenvironment and stromal cell interaction, cannot be entirely replicated with in vitro assays; thus, animal models are critical for investigating and understanding the effects of therapeutic intervention. However, most brain tumor xenografting methods do not produce brain metastases consistently in terms of the time frame and tumor burden. Brain metastasis models generated by intracardiac injection of cancer cells can result in unintended extracranial tumor burden and lead to non-brain metastatic morbidity and mortality. Although intracranial injection of cancer cells can limit extracranial tumor formation, it has several caveats, such as the injected cells frequently form a singular tumor mass at the injection site, high leptomeningeal involvement, and damage to brain vasculature during needle penetration. This protocol describes a mouse model of brain metastasis generated by internal carotid artery injection. This method produces intracranial tumors consistently without the involvement of other organs, enabling the evaluation of therapeutic agents for brain metastasis.

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Most brain metastasis mouse models are complicated by systemic metastases confounding analysis of mortality and therapeutic intervention outcomes. Presented here is a protocol for internal carotid injection of cancer cells that produces consistent intracranial tumors with minimal systemic tumors.

Modélisation des métastases cérébrales par injection de cellules cancéreuses dans l’artère carotide interne

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Critical aspects of metastatic diseases, such as the complex neural ...

Intracranial Cannula Implantation for Serial Locoregional Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Infusions in Mice

Pediatric CNS tumors are responsible for the majority of cancer-related deaths in children and have poor prognoses, despite advancements in chemotherapy and radiotherapy. As many tumors lack efficacious treatments, there is a crucial need to develop more promising therapeutic options, such as immunotherapies; the use of chimeric antigen receptor (CAR) T cell therapy&#160;directed against CNS tumors is of particular interest. Cell surface targets such as B7-H3, IL13RA2, and the disialoganglioside GD2 are highly expressed on the surface of several pediatric and adult CNS tumors,&#160;raising the opportunity to use CAR T cell therapy against these and other surface targets. To evaluate the repeated locoregional delivery of CAR T cells in preclinical murine models, an indwelling catheter system that recapitulates indwelling catheters currently being used in human clinical trials was established. Unlike stereotactic delivery, the indwelling catheter system allows for repeated dosing without the use of multiple surgeries. This protocol describes the intratumoral placement of a fixed guide cannula that has been used to successfully test serial CAR T cell infusions in orthotopic murine models of pediatric brain tumors. Following orthotopic injection and engraftment of the tumor cells in mice, intratumoral placement of a fixed guide cannula is completed on a stereotactic apparatus and secured with screws and acrylic resin. Treatment cannulas are then inserted through the fixed guide cannula for repeated CAR T cell delivery. Stereotactic placement of the guide cannula can be adjusted to deliver CAR T cells directly into the lateral ventricle or other locations in the brain. This platform offers a reliable mechanism for the preclinical testing of repeated intracranial infusions of CAR T cells and other novel therapeutics for these devastating pediatric tumors.

Intracranial Cannula Implantation for Serial Locoregional Chimeric Antigen Receptor CAR T Cell Infusions in Mice

Central nervous system (CNS) tumors are the leading cause of cancer-related death in children, and locoregional immune-based therapies are increasingly being tested for patients in clinical trials. This protocol describes methods for locoregional cannula implantation in mice for the preclinical evaluation of immunotherapeutic infusions targeting CNS tumors.

Implantation intracrânienne de canules pour des perfusions de lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique (CAR) locorégional en série chez la souris

Pediatric CNS tumors are responsible for the majority of cancer-related deaths in children and have poor prognoses, despite advancements in chemotherapy ...

<meta charset="utf8"></head><body>Réparation de l’artère carotide commune après injection dans un modèle murin

Facilitating Repeat Intracarotid Injections in Mouse Models by a Novel Injection Site Repair Technique

Given recent advances in the delivery of novel antitumor therapeutics using endovascular selective intraarterial delivery methods in neuro-oncology, there is an urgent need to develop methods for intracarotid injections in mouse models, including methods to repair the carotid artery in mice after injection to allow for subsequent injections. We developed a method of intracarotid injection in a mouse model to deliver therapeutics into the internal carotid artery (ICA) with two alternative procedures. 
During injection, the needle is inserted into the common carotid artery (CCA) after tying a suture around the external carotid artery (ECA) and injected therapeutics are delivered into the ICA. Following injection, the common carotid artery (CCA) can be ligated, which limits the number of intracarotid injections to one. The alternative procedure described in this article includes a modification where intracarotid artery injection is followed by injection site repair of the CCA, which restores blood flow within the CCA and avoids the complication of cerebral ischemia seen in some mouse models. 
We also compared the delivery of bone marrow-derived human mesenchymal stem cells (BM-hMSCs) to intracranial tumors when delivered through intracarotid injection with and without injection site repair following the injection. Delivery of BM-hMSCs does not differ significantly between the methods. Our results demonstrate that injection site repair of the CCA allows for repeat injections through the same artery and does not impair the delivery and distribution of injected material, thus providing a model with greater flexibility that more closely emulates intracarotid injection in humans.

<meta charset="utf8"></head><body>Pleins feux sur l’auteur : Faire progresser le traitement du glioblastome grâce à des stratégies d’administration intraartérielle pour les virus oncolytiques et le

Repair of the intracarotid artery in a mouse model after injection returns blood flow to the artery without negatively impacting the distribution of the injected material. Injection site repair facilitates subsequent injections through the same artery and prevents cerebral ischemia in mouse strains that lack a complete Circle of Willis.

Facilitation des injections intracarotidiennes répétées dans des modèles murins par une nouvelle technique de réparation du site d’injection

Given recent advances in the delivery of novel antitumor therapeutics using endovascular selective intraarterial delivery methods in neuro-oncology, there ...

Modeling Brain Tumor Metastasis via Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

<a href='https://app.jove.com/v/23284/modeling-brain-tumor-metastasis-via-internal-carotid-artery-injection'>Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)</a>In this video, an anesthetized mouse undergoes a surgical procedure in which cancer cells are injected into the common carotid artery (CCA) to facilitate targeted delivery to the brain. The procedure involves precise suturing and manipulation of the carotid arteries to direct the injected cells toward the internal carotid artery (ICA), promoting tumor formation in the brain over time.

Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)In this video, an anesthetized ...

Intracarotidienne Cancer Cell Injection pour produire des modèles de souris de Brain Métastase

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