Keine Finanzierung Agenturen unterstützt diese Arbeit.

1. die Beispiellösung
<ol>
	<li>Berechnen Sie die Reinigung Grenze (CL) für ein Medikament basierend auf die maximale zulässige Übertragung (MACO) nach den Kriterien der therapeutischen Dosis. Hinweis: Hier wurde die Reinigung Grenze (CL) für Medikament A berechnet 2,4 µg pro 50 cm2 basiert auf der maximal zulässigen Übertragung (MACO) nach den Kriterien der therapeutischen Dosis sein. Die Reinigung Überprüfung wird die 50 %, 100 % und 150 % Grenze Reinigung ausgeführt. Die Reinigung Überprüfung wurde für zwei Formulierungen (2,5 % und 60 % w/w Droge Last) bewertet.</li>
</ol>
2. Reinigung für Gutscheine
<ol>
	<li>Erster Ansatz<ol>
		<li>Reinigen Sie die Coupons von Spül- und abwischen der Oberfläche für 10-15 s zweimal mit Wasser und zweimal mit Methanol, jede Einzahlung, die Rückstände zu beseitigen. Führen Sie diesen Prozess in der Haube, wie Methanol giftig und sehr volatil ist.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Fortgeschrittenen Ansatz<ol>
		<li>Verwendung von clean-in-Place-Lösungen<ol>
			<li>Legen Sie die Sonikator bei Raumtemperatur. Die Sonikator hat keine Leistungsanpassung Einstellung, daher wird die Zeit eingestellt, um ausreichende Reinigungsergebnisse zu geben.</li>
			<li>Die Coupons in Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC) Grade Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in 0,1 % alkalischen Reinigungslösung in HPLC Grade Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in HPLC Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in 0,1 % sauren Reinigungslösung in HPLC Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in HPLC Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Verwendung von Säure-Base-Peroxid Hinweis: Dies ist eine alternative Methode, die Verwendung von Säure, base und Peroxid anstatt basische und saure Reinigungsmittel enthalten.<ol>
			<li>Legen Sie die Sonikator bei Raumtemperatur. Die Sonikator hat keine Leistungsanpassung Einstellung, daher wird die Zeit eingestellt, um ausreichende Reinigungsergebnisse zu geben.</li>
			<li>Die Coupons in Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Tauchen Sie die Coupons in 0,1 M Natronlauge und 2 min. lang beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Tauchen Sie die Coupons in 0,1 M Salzsäure und 2 min. lang beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
			<li>Tauchen Sie die Coupons in 0,1 mg/mL NaNo2 und 2 min. lang beschallen.</li>
			<li>Die Coupons in Wasser tauchen und für 2 min beschallen.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
(3) abtupfen Verfahren
<ol>
	<li>Befestigen Sie die Edelstahl-Coupons auf der Unterseite des 250 mL (oder 500 mL) Kunststoff Becher mit einem doppelseitigem Klebeband.</li>
	<li>Halten Sie den Becher, Spick und schrubben Prozesse einfach zu machen. Dies minimiert auch einige unerwünschte Unfälle wie z.B. Überschreitung der Ecke beim schrubben.</li>
	<li>Die Infusion eines definierten Volumens bei einer bestimmten Konzentration und Formulierung (z.B. 200 µL von 12 µg/mL bei 2,5 % w/w Droge A Last) in einem whirly Muster auf der Oberfläche des Gutscheins mit der Pipette eine positive Verschiebung.</li>
	<li>Warten Sie, bis die Oberfläche des Gutscheins trocken ist (~ 3-10 min, je nach der Volatilität der Probe).</li>
	<li>Tauchen Sie einen trockenen Tupfer in eine Ampulle mit 2 mL Verdünnungsmittel (Methanol: Ameisensäure 100:0.2 Volumen/Volumen).</li>
	<li>Entfernen Sie überschüssiges Lösungsmittel durch den Tupfer gegen die Innenseite der Flasche drücken.</li>
	<li>Wischen Sie die Oberfläche des Gutscheins mit sogar, überlappenden Seite-an-Seite-Strichen fest, bis Bereich insgesamt 50 cm2 Test mit einer Seite von einem feuchten Tupfer abgewischt wird.</li>
	<li>Wiederholen Sie den Wischvorgang (Schritt 3.7) mit der gleichen Seite des Tupfers.</li>
	<li>Wischen Sie die vier Kanten des Coupon zweimal.</li>
	<li>Drehen Sie den Tupfer auf die andere Seite und drehen Sie den Gutschein 90° im Uhrzeigersinn oder gegen den Uhrzeigersinn zu; so, die Drehrichtung des schrubben um 90°.</li>
	<li>Wiederholen Sie die abtupfen Bewegung wie in Schritten 3,7-3,9. Schneiden Sie nach der Probenahme der Oberfläche den Tupfer Kopf mit einer Schere in die Durchstechflasche Lösungsmittel.</li>
	<li>Wiederholen Sie das Abtupfen mit einem zweiten Tupfer beim Drehen des Gutscheins 90° in die gleiche Richtung ausgewählt, bevor.</li>
	<li>Beschallen Sie die Fläschchen mit zwei Tupfer Köpfe für 5 min, dann Wirbel für 10 s.</li>
	<li>Übertragen Sie die Lösung in einer HPLC Vials und beschriften Sie sie als funktionierende Lösung.</li>
</ol>
4. Berechnung der Erholung
<ol>
	<li>Probenrückgewinnung<ol>
		<li>Bereiten Sie die Control-Lösungen durch das Mischen von 200 µL des Gutscheins Spick Lösungen mit 1.800 µL des Verdünnungsmittels.</li>
		<li>Führen Sie das Chromatographie-System gemäß den in Tabelle 1aufgeführten Bedingungen.</li>
		<li>Die Erholung der Tupfer funktionierende Lösung basierend auf die relative Fläche unter Gipfel der funktionierende Lösungen zu berechnen (AW) aber auch die Kontrolllösung (C).</li>
		<li>Wiederholen Sie den Vorgang auf drei Coupons und berechnen Sie die durchschnittliche Recovery zusammen mit relative Standardabweichung (SRel). Hinweis: Alle hier verwendeten analytischen Methoden wurden nach den ICH Q2(R1)-Richtlinien validiert. Die Chromatographie Bedingungen sind im Bereich Material aufgeführt.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Validation of cleaning processes (7/93). Guide to inspections validation of cleaning processes. , (2004).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 320-12-08, Gulf Pharmaceuticals. , (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 320-12-058, Novartis Internationsl AG. , (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 05-10, Teva Parenterals Medicines, Inc. , (2009).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 320-14-09, Tianjin Zhongan Pharmaceutical Co., Ltd. , (2014).</li><li>Mantel, M., Wightman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+the+surface+chemistry+on+the+wettability+of+stainless+steel.">Influence of the surface chemistry on the wettability of stainless steel.</a> Surf Interface Anal. 21, 595-605 (1994).</li><li>Odaka, K., Ueda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+outgassing+rate+on+surface+oxide+layer+thickness+in+type+304+stainless+steel+before+and+after+surface+oxidation+in+air.">Dependence of outgassing rate on surface oxide layer thickness in type 304 stainless steel before and after surface oxidation in air.</a> Vacuum. 47, 689-692 (1996).</li><li>Kerber, S. J., Tverberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stainless+Steel+Surface+Analysis.">Stainless Steel Surface Analysis.</a> Adv. Mater. Processes. , 33-36 (2000).</li><li>Kusumaningrum, H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+foodborne+pathogens+on+stainless+steel+surfaces+and+cross-contamination+to+foods.">Survival of foodborne pathogens on stainless steel surfaces and cross-contamination to foods.</a> Int J Food Microbiol. 85, 227-236 (2003).</li><li>Liu, L., Pack, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleaning+verification+assays+for+highly+potent+compounds+by+high+performance+liquid+chromatography+mass+spectrometry:+Strategy,+validation,+and+long-term+performance.">Cleaning verification assays for highly potent compounds by high performance liquid chromatography mass spectrometry: Strategy, validation, and long-term performance.</a> J Pharmaceut. Biomed. 43, 1206-1212 (2007).</li><li>Lambropoulos, J., Spanos, G. A., Lazaridis, N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+validation+of+an+HPLC+assay+for+fentanyl,+alfentanil,+and+sufentanil+in+swab+samples.">Development and validation of an HPLC assay for fentanyl, alfentanil, and sufentanil in swab samples.</a> J Pharmaceut. Biomed. 23, 421-428 (2000).</li><li>Chisti, Y., Moo-Young, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clean-in-place+systems+for+industrial+bioreactors:+Design,+validation+and+operation.">Clean-in-place systems for industrial bioreactors: Design, validation and operation.</a> J. Ind. Microbiol. 13, 201-207 (1994).</li><li>Haidar Ahmad, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleaning+verification:+Exploring+the+effect+of+the+cleanliness+of+stainless+steel+surface+on+sample+recovery.">Cleaning verification: Exploring the effect of the cleanliness of stainless steel surface on sample recovery.</a> J Pharmaceut. Biomed. 134, 108-115 (2017).</li></ol>

Keine finanziellen Interessen oder Interessenkonflikte bestehen.

Der größten Anteil an niedrig und Variable Rückforderungen von API-Rückständen aus Edelstahl Gutscheine wurde auf das Fehlen eines klar definierten Verfahrens zur Reinigung der Oberflächen Coupon zurückgeführt. Reinigung der Oberfläche des Coupons führte konsistente, präzise Spike Recovery und reproduzierbare Ergebnisse. Mit der Demonstration des hohen Rückforderungen aus Edelstahl Gutscheine sollte die eigentliche Reinigung Überprüfungsergebnisse aus der Fertigungseinrichtungen mit validierten Methoden gen...

Die Sauberkeit nicht dedizierte Geräte überprüft werden, bevor seine spätere Freigabe zur Verwendung bei der Herstellung von Zwischenprodukten und aktive pharmazeutische Wirkstoffe (APIs), am Produkt umstellen, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden. Reinigungsverfahren sollte enthalten ausreichende Angaben zu ermöglichen, jede Art von Ausrüstung in eine reproduzierbare und effektive Weise zu reinigen, und diese Verfahren sollten gemäß der US Food and Drug Administration (FDA) Anforderungen1überprüft werden. Zahlreiche Abmahnungen wegen unzureichender Reinigung2,3,4, Fehler beim Überprüfen der Reinigungsmethode Überprüfung und Nichtbeachtung Reinigungsverfahren5 wurde von der FDA ausgestellt. 21 CFR §211.67 beschreibt die Voraussetzungen für die erfolgreiche Reinigung Überprüfung.
Es ist der Standard in der Industrie, dass die Validierung der analytischen Verfahren zur Reinigung/Überprüfung auf Edelstahl-Coupons mit der gleichen Oberfläche/Ausführung der Produktionsanlagen durchgeführt wird. Edelstahl-Gutscheine (z.B. 50 cm2) werden verwendet, um Ausrüstung Oberflächen zur Reinigung Überprüfung Experimente im Labor darstellen. Bei der Entwicklung und Validierung analytischer Methoden ist die Probe von Interesse (d.h. die Rückstände, die von der Oberfläche des Gerätes wiederhergestellt werden sollen) an die Ziel-Rückstände auf den Edelstahl Gutschein bestimmt durch die maximale zulässige Übertragung (MACO) Grenze gespickt. Dieses Niveau wird bestimmt basierend auf akzeptablen Grenzwert definiert als das Limit bei dem ein Patient ohne gesundheitsschädliche Auswirkungen (No-observed-negative-Effekt-Level, NOAEL-Wert) ausgesetzt bekommen kann.
Der Analyst oder Herstellung Betreiber führen die schrubben muss eine strukturierte Vorgehensweise, um sicherzustellen, dass Rückforderungen unabhängig davon sind, wer die swabbing führt reproduzierbar folgen. Das Verfahren sollte explizit detail der Tupfer-Typ, Anzahl der Tupfer verwendet, das Verdünnungsmittel, die Menge des verwendeten Lösungsmittels, das genaue geschwungene Muster, die Anzahl der Schläge, die an der Oberfläche der Probenahme, der Zeitaufwand schrubben/Gewinnung von Proben, die Methode der Erkennung (Ultraviolett, Fluoreszenz, Massenspektrometrie, gesamten organischen Kohlenstoffs, etc.), die Extraktiontechnik des Materials aus dem Tupfer Kopf angewendet , etc..
Neben Rolle der oben genannten Faktoren, die Probenrückgewinnung, die Oberfläche des Gutscheins und somit die Oberfläche des Gerätes beeinflussen auch eine. Die Oberfläche des Gutscheins kann geändert werden, durch die Ablagerung von einer Dünnschicht des Materials auf der Oberfläche oder durch Änderung der Oxidationsstufe eines oder mehrerer Elemente aus Edelstahl (z.B.Fe, Cr und Ni)6,7,8. Die Regeneration von der Oberfläche des Edelstahl-Gutscheine wieder in seinen ursprünglichen Zustand ist entscheidend für den Erfolg des quantitativen swapping-Prozesses. Studien, die Edelstahl-Gutscheine in denen nicht ordentlich gereinigt wurden, zeigten eine Variabilität Verwertung einschließlich Analyst zu anderen Drogen oder verschiedene Spike Ebenen9,10,11. Die Standardabweichung bei der Beitreibung von zehn Wiederholungen auf einem Coupon kann bis zu 14 % und 26 % auf fünf Gutscheine9sein. Es ist wichtig zu beachten, dass die relative Standardabweichung (SRel) Werte mit zunehmender Anzahl der Wiederholungen oder mit zunehmender Anzahl der Gutscheine verwendet (d.h., fünf Gutscheine statt einen fünfmal auf dem gleichen Gutschein)11erhöht. In solchen Fällen kann die Variabilität als Zufallsrisiko ausgelegt werden. Dennoch können ihre Ergebnisse durch unsere Feststellung erklärt werden, dass die Sauberkeit der Oberfläche des Gutscheins die Erholung auswirkt. Die in diesem Dokument beschriebenen Ergebnisse zeigen eine deutliche Zunahme der Recovery-Ergebnissen und Abnahme Variabilität nach ordnungsgemäße Reinigung der Oberfläche von Edelstahl-Coupons.
Clean-in-Place (CIP) ist eine automatisierte Möglichkeit der Reinigung der Oberfläche von Geräten, die eine minimale beinhaltet oder ohne Demontage des Gerätes. Während die CIP-Reinigung Prozess wird ein festgelegtes Verfahren der aufeinander folgenden waschen mit einem Sockel, gefolgt von einer Säure ausgeführt, um organische und anorganische Rückstände zu entfernen. Tenside, Komplexbildner Verbindungen oder Komplexbildner werden in der Regel die CIP-Lösungen zur Verbesserung der Effizienz der Reinigung jedes Produkt von der Oberfläche des Geräts hinzugefügt. Die Effizienz der Reinigung hängt von mehrere Parameter einschließlich der Auswahl und Konzentration von der CIP-Lösungen (d. h., Art und Zusammensetzung der Base, Säure und Tenside), die Reinigungszeit, Temperatur (in der Regel 60-80 ° C), Art der Kontamination und das Vorhandensein von schwer zu reinigenden Teile12. Basierend auf dem Typ des Arzneimittels wurden CIP-Lösungen 100 und 200 ausgewählt, um verwenden Sie zur Reinigung der Edelstahl Antwortscheine für Überprüfung, Reinigung, da es den KVP-Prozess verwendet für die Reinigung der Produktionsanlagen simuliert.
Diese Studie berichtet von dem Einfluss der verschiedenen Faktoren, die die Rückgewinnung von pharmazeutische Rückstände aus der Oberfläche von Edelstahl-Coupons und empfiehlt die best Practices für analytische Reinigung Methodenentwicklung für kleine Moleküle, therapeutischen Proteinen und Antikörpern. Der Mangel an einer klar definierten Verfahren, das konsequent Coupon Oberfläche gereinigt wurde als den größten Anteil an niedrig und Variable Einziehungen gekennzeichnet. Hohe und reproduzierbare Recovery wurde erzielt, wenn die Oberfläche des Gutscheins13richtig gereinigt wurde.

<table style="border-collapse:collapse;width:964pt" width="1285">
	<colgroup>
		<col style="width:265pt" width="353" />
		<col style="width:401pt" width="535" />
		<col style="width:250pt" width="333" />
		<col style="width:48pt" width="64" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td height="21" style="width:265pt;height:15.75pt" width="353">stainless steel coupons</td>
			<td class="xl67" style="width:401pt" width="535">&#160;GlobePharma (New Brunswick, NJ ).&#160;</td>
			<td class="xl16" style="width:250pt" width="333">SS316-20RA-50cm2</td>
			<td style="width:48pt" width="64"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl16" height="21" style="height:15.75pt">Clean in place solutions (CIP100 and CIP200)&#160;</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">were obtained from Steris Corporation (Mentor, OH)</td>
			<td>1D10BG</td>
			<td>Alkaline detergent and acid detergent, respectively</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl16" height="21" style="height:15.75pt">Positive displacement pipettes</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">Gilson (Middleton, WI).&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34" style="height:25.5pt">
			<td height="34" style="height:25.5pt">HPLC grade water</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">Millipore Milli-Q Advantage Water Purification System (Darmstadt, Germany)&#160; or from Honeywell Burdick &#38; Jackson (Muskegon, Michigan)</td>
			<td>7732-18-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl16" height="21" style="height:15.75pt">HPLC grade Methanol</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">EMD</td>
			<td>MX0475-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17" style="height:12.75pt">
			<td height="17" style="height:12.75pt">glacial acetic acid&#160;</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">EMD</td>
			<td>MAX0073P5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl16" height="21" style="height:15.75pt">HPLC grade Acetonitrile&#160;</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">J.T. Baker (Avantor Performance Materials, Center Valley, PA)</td>
			<td>75-05-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17" style="height:12.75pt">
			<td height="17" style="height:12.75pt">Trifluoroacetic acid</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">J.T. Baker (Avantor Performance Materials, Center Valley, PA)</td>
			<td>75-05-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="height:15.75pt">Chromatography column Zorbax Eclipse</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">&#160;XDB-C18, 4.6 x 100 mm, 3.5 &#181;m HPLC column</td>
			<td>UNSPSC &#8211; 41115709</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl16" height="21" style="height:15.75pt">Vanquish UHPLC system&#160;</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">Thermo Fisher Scientific, Germering, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl16" height="21" style="height:15.75pt">Branson B8510 Ultrasonic cleaner&#160;</td>
			<td class="xl68" style="width:401pt" width="535">Branson Ultrasonics (Danbury, CT, USA)</td>
			<td>model (8510-D7H)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

failure of cleaning verification in pharmaceutical industry due to uncleanliness of stainless steel surface

Das Ziel dieser Arbeit ist es, die Parameter zu identifizieren, die die Rückgewinnung von pharmazeutische Rückstände aus der Oberfläche von Edelstahl-Coupons zu beeinflussen. Eine Reihe von Faktoren wurden bewertet, einschließlich Droge Produktebenen Spike, spiking Verfahren, Wirkstoff-Hilfsstoff-Verhältnisse, Analyst, Analyst Variabilität, Intraday-Variabilität und Reinigungsverfahren der Coupons. Das Fehlen eines klar definierten Verfahrens, die konsequent die Coupon-Oberfläche gereinigt wurde als den größten Anteil an niedrig und Variable Einziehungen gekennzeichnet. Bewertung der Reinigung der Oberfläche der Coupons mit clean-in-Place (CIP) gab hohe Rückgewinnung (&#62; 90 %) und reproduzierbare Ergebnisse (SRel≤4 %) unabhängig von den Bedingungen, die bereits bewertet wurden. Der Ansatz wurde erfolgreich eingesetzt zur Reinigung Überprüfung von kleinen Molekülen (MW &#60; 1.000 Da) sowie große Biomoleküle (MW bis zu 50.000 Da).

Repräsentative Ergebnisse von den ersten Versuchen zur Reinigung Überprüfung für Medikament A sind in Tabelle 2zusammengefasst. Bevor die Gutscheine nach dem detaillierten Verfahren im experimentellen Teil gereinigt wurden, wurden inkonsistente Ergebnisse auf verschiedene Spike Ebenen, für verschiedene Verhältnisse der API/Hilfsstoff, verschiedene Analysten und sogar für den gleichen Analytiker an verschiedenen Tagen erhalten. Die beobachtete Variabilität in den E...

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Failure of Cleaning Verification in Pharmaceutical Industry Due to Uncleanliness of Stainless Steel Surface

Das Fehlen einer klar definierten Verfahren, das konsequent Coupon Oberflächen gereinigt wurde als den größten Anteil an niedrig und Variable Erholungen in der Reinigung Überprüfung identifiziert. Dieses Manuskript beschreibt das korrekte Protokoll der Reinigung Edelstahl Gutscheine.

Mangelnde Reinigung Überprüfung in der pharmazeutischen Industrie wegen Unreinheit des Edelstahl-Oberfläche

The aim of this work is to identify the parameters that affect the recovery of pharmaceutical residues from the surface of stainless steel coupons. A ...

failure-cleaning-verification-pharmaceutical-industry-due-to

Research

JoVE Journal

Chemistry

8.1K Aufrufe.  Novartis Pharmaceuticals Corporation. Das Fehlen einer klar definierten Verfahren, das konsequent Coupon Oberflächen gereinigt wurde als den größten Anteil an niedrig und Variable Erholungen in der Reinigung Überprüfung identifiziert. Dieses Manuskript beschreibt das korrekte Protokoll der Reinigung Edelstahl Gutscheine.

Serie: Failure of Cleaning Verification in Pharmaceutical Industry Due to Uncleanliness of Stainless Steel Surface

A Method to Manipulate Surface Tension of a Liquid Metal via Surface Oxidation and Reduction

Controlling interfacial tension is an effective method for manipulating the shape, position, and flow of fluids at sub-millimeter length scales, where interfacial tension is a dominant force. A variety of methods exist for controlling the interfacial tension of aqueous and organic liquids on this scale; however, these techniques have limited utility for liquid metals due to their large interfacial tension.
Liquid metals can form soft, stretchable, and shape-reconfigurable components in electronic and electromagnetic devices. Although it is possible to manipulate these fluids via mechanical methods (e.g., pumping), electrical methods are easier to miniaturize, control, and implement. However, most electrical techniques have their own constraints: electrowetting-on-dielectric requires large (kV) potentials for modest actuation, electrocapillarity can affect relatively small changes in the interfacial tension, and continuous electrowetting is limited to plugs of the liquid metal in capillaries.
Here, we present a method for actuating gallium and gallium-based liquid metal alloys via an electrochemical surface reaction. Controlling the electrochemical potential on the surface of the liquid metal in electrolyte rapidly and reversibly changes the interfacial tension by over two orders of magnitude ( &#820;500 mN/m to near zero). Furthermore, this method requires only a very modest potential (&#60; 1 V) applied relative to a counter electrode. The resulting change in tension is due primarily to the electrochemical deposition of a surface oxide layer, which acts as a surfactant; removal of the oxide increases the interfacial tension, and vice versa. This technique can be applied in a wide variety of electrolytes and is independent of the substrate on which it rests.

We present a method to control the interfacial energy of a liquid metal in an electrolyte via electrochemical deposition (or removal) of a surface oxide layer. This simple method can control the capillary behavior of gallium-based liquid metals by tuning the interfacial energy rapidly, significantly, and reversibly using modest voltages.

Eine Methode, die Oberflächenspannung eines Liquid Metal manipulieren via Oberfläche Oxidation und Reduktion

Controlling interfacial tension is an effective method for manipulating the shape, position, and flow of fluids at sub-millimeter length scales, where ...

Forschung

Chemie

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

Here, we describe a protocol developed by our group that uses low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) to measure the average content of fluorinated drugs in their formulated drug product forms: tablets or capsules. This method is specific to fluorinated drugs because it detects only the content of fluorine, avoiding interference from the excipients that lack fluorine. The advantages of measuring the active content of fluorinated drugs using low-field 19F TD-NMR versus high-field 19F solid-state (SS) NMR are the simplicity of the method; the low cost; and the non-destructive nature of the technique, with all samples recoverable in intact forms (e.g., powders, tablets, and capsules), making this technique affordable for any laboratory.
We have tested the method with three fluorinated drug products available on the market - cinacalcet, lansoprazole, and ciprofloxacin - with doses ranging from 15 to 500 mg. The results of the analyses, measured by low-field 19F TD-NMR, supported the reported label claims for the average drug content.
Based on the simplicity and reproducibility of the analysis, we envision this methodology being implemented in any laboratory, including manufacturing plants, as a process analytical technology (PAT) tool in the pharmaceutical industry.

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

A simple and non-destructive technique that measures the average content of drug substances in formulated drug products containing fluorine using low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) is presented here. The technique can be applied to the development and manufacturing of drugs in the pharmaceutical industry.

Anwendung und Methodik der zerstörungsfreien 19F Zeitbereich NMR-Technik den Inhalt in Fluor-haltige Arzneimittel zu messen

Here, we describe a protocol developed by our group that uses low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) to measure the ...

Observation and Analysis of Blinking Surface-enhanced Raman Scattering

From a single molecule at a silver nanoaggregate junction, blinking surface-enhanced Raman scattering (SERS) is observed. Here, a protocol is presented on how to prepare the SERS-active silver nanoaggregate, record a video of certain blinking spots in the microscopic image, and analyze the blinking statistics. In this analysis, a power law reproduces the probability distributions for bright events relative to their duration. The probability distributions for dark events are fitted by a power law with an exponential function. The parameters of the power law represent molecular behavior in both bright and dark states. The random walk model and the speed of the molecule across the entire silver surface can be estimated. It is difficult to estimate even when using averages, autocorrelation functions, and super-resolution SERS imaging. In the future, power law analyses should be combined with spectral imaging, because the origins of blinking cannot be confirmed by this analysis method alone.

This protocol describes the analysis of blinking surface-enhanced Raman scattering due to the random walk of a single molecule on a silver surface using power laws.

Beobachtung und Analyse der Oberfläche-enhanced Raman-Streuung zu blinken

From a single molecule at a silver nanoaggregate junction, blinking surface-enhanced Raman scattering (SERS) is observed. Here, a protocol is presented on ...

Synthesis of a Thiol Building Block for the Crystallization of a Semiconducting Gyroidal Metal-sulfur Framework

We present a method for preparing thioester molecules as the masked form of the thiol linkers and their utilization for accessing a semiconducting and porous metal-dithiolene network in the highly ordered single crystalline state. Unlike the highly reactive free-standing thiols, which tend to decompose and complicate the crystallization of metal-thiolate open frameworks, the thioester reacts in situ to provide the thiol species, serving to mitigate the reaction between the mercaptan units and the metal centers, and to improve crystallization consequently. Specifically, the thioester was synthesized in a one-pot procedure: an aromatic bromide (hexabromotriphenylene) reacted with excess sodium thiomethoxide under vigorous conditions to first form the thioether intermediate product. The thioether was then demethylated by the excess thiomethoxide to provide the thiolate anion that was acylated to form the thioester product. The thioester was conveniently purified by standard column chromatography, and then used directly in the framework synthesis, wherein NaOH and ethylenediamine serve to revert in situ the thioester to the thiol linker for assembling the single-crystalline Pb(II)-dithiolene network. Compared with other methods for thiol synthesis (e.g., by cleaving alkyl thioether using sodium metal and liquid ammonia), the thioester synthesis here uses simple conditions and economical reagents. Moreover, the thioester product is stable and can be conveniently handled and stored. More importantly, in contrast to the generic difficulty in accessing crystalline metal-thiolate open frameworks, we demonstrate that using the thioester for in situ formation of the thiol linker greatly improves the crystallinity of the solid-state product. We intend to encourage broader research efforts on the technologically important metal-sulfur frameworks by disclosing the synthetic protocol for the thioester as well as the crystalline framework solid.

Here, we present a one-pot, transition-metal-free synthesis of thiols and thioesters from aromatic halides and sodium thiomethoxide, followed by the preparation of single crystals of a metal-dithiolene network using thiol species generated in situ from the more stable and tractable thioester.

Synthese von Thiol Baustein für die Kristallisation eines halbleitenden Gyroidal Metall-Schwefel-Rahmens

We present a method for preparing thioester molecules as the masked form of the thiol linkers and their utilization for accessing a semiconducting and ...

Chemoselective Preparation of 1-Iodoalkynes, 1,2-Diiodoalkenes, and 1,1,2-Triiodoalkenes Based on the Oxidative Iodination of Terminal Alkynes

We present the chemoselective synthesis of 1-(iodoethynyl)-4-methylbenzene, 1-(1,2-diiodovinyl)-4-methylbenzene, and 1-methyl-4-(1,2,2-triiodovinyl)benzene as representative examples for the practical chemoselective preparation of 1-iodoalkynes, 1,2-diiodoalkenes, and 1,1,2-triiodoalkenes from the chemoselective iodination of terminal alkynes mediated by hypervalent-iodine reagents. The chemoselectivity was confirmed by using p-tolylethyne as a model substrate to screen a variety of iodine sources and/or the hypervalent-iodine reagents. A combination of tetrabutylammonium iodide (TBAI) and (diacetoxyiodo)benzene (PIDA) selectively generates 1-iodoalkynes, while a combination of KI and PIDA generates 1,2-diiodoalkenes. A one-pot synthesis based on both TBAI-PIDA and KI-PIDA yields the corresponding 1,1,2-triiodoalkenes. These protocols were subsequently applied to the synthesis of synthetically important aromatic and aliphatic 1-iodoalkynes, 1,2-diiodoalkenes, and 1,1,2-triiodoalkenes, which were obtained in good yield with excellent chemoselectivity.

Herein, detailed protocols for the oxidative iodination of terminal alkynes using hypervalent-iodine reagents are presented, which chemoselectively afford 1-iodoalkynes, 1,2-diiodoalkenes, and 1,1,2-triiodoalkenes.

Chemische Herstellung von 1-Iodoalkynes, 1,2-Diiodoalkenes und 1,1,2-Triiodoalkenes basierend auf den oxidativen Jodierung von Terminal Alkinen

We present the chemoselective synthesis of 1-(iodoethynyl)-4-methylbenzene, 1-(1,2-diiodovinyl)-4-methylbenzene, and ...

Synthesis and Structure Determination of &#181;-Conotoxin PIIIA Isomers with Different Disulfide Connectivities

Peptides with a high number of cysteines are usually influenced regarding the three-dimensional structure by their disulfide connectivity. It is thus highly important to avoid undesired disulfide bond formation during peptide synthesis, because it may result in a completely different peptide structure, and consequently altered bioactivity. However, the correct formation of multiple disulfide bonds in a peptide is difficult to obtain by using standard self-folding methods such as conventional buffer oxidation protocols, because several disulfide connectivities can be formed. This protocol represents an advanced strategy required for the targeted synthesis of multiple disulfide-bridged peptides which cannot be synthesized via buffer oxidation in high quality and quantity. The study demonstrates the application of a distinct protecting group strategy for the synthesis of all possible 3-disulfide-bonded peptide isomers of &#181;-conotoxin PIIIA in a targeted way. The peptides are prepared by Fmoc-based solid phase peptide synthesis using a protecting group strategy for defined disulfide bond formation. The respective pairs of cysteines are protected with trityl (Trt), acetamidomethyl (Acm), and tert-butyl (tBu) protecting groups to make sure that during every oxidation step only the required cysteines are deprotected and linked. In addition to the targeted synthesis, a combination of several analytical methods is used to clarify the correct folding and generation of the desired peptide structures. The comparison of the different 3-disulfide-bonded isomers indicates the importance of accurate determination and knowledge of the disulfide connectivity for the calculation of the three-dimensional structure and for interpretation of the biological activity of the peptide isomers. The analytical characterization includes the exact disulfide bond elucidation via tandem mass spectrometry (MS/MS) analysis which is performed with partially reduced and alkylated derivatives of the intact peptide isomer produced by an adapted protocol. Furthermore, the peptide structures are determined using 2D nuclear magnetic resonance (NMR) experiments and the knowledge obtained from MS/MS analysis.

Cysteine-rich peptides fold into distinct three-dimensional structures depending on their disulfide connectivity. Targeted synthesis of individual disulfide isomers is required when buffer oxidation does not lead to the desired disulfide connectivity. The protocol deals with the selective synthesis of 3-disulfide-bonded peptides and their structural analysis using NMR and MS/MS studies.

Synthese und Strukturaufklärung von µ-vor PIIIA Isomere mit verschiedenen Disulfid Verschaltungen

Peptides with a high number of cysteines are usually influenced regarding the three-dimensional structure by their disulfide connectivity. It is thus ...

Surface Properties of Synthesized Nanoporous Carbon and Silica Matrices

In this work, we report the synthesis and characterization of ordered nanoporous carbon material (also called ordered mesoporous carbon material [OMC]) with a 4.6 nm pore size, and ordered silica porous matrix, SBA-15, with a 5.3 nm pore size. This work describes the surface properties of nanoporous molecular sieves, their wettability, and the melting behavior of D2O confined in the differently ordered porous materials with similar pore sizes. For this purpose, OMC and SBA-15 with highly ordered nanoporous structures are synthesized via impregnation of the silica matrix by applying a carbon precursor and by the sol-gel method, respectively. The porous structure of investigated systems is characterized by an N2 adsorption-desorption analysis at 77 K. To determine the electrochemical character of the surface of synthesized materials, potentiometric titration measurements are conducted; the obtained results for OMC shows a significant pHpzc shift toward the higher values of pH, relative to SBA-15. This suggests that investigated OMC has surface properties related to oxygen-based functional groups. To describe the surface properties of the materials, the contact angles of liquids penetrating the studied porous beds are also determined. The capillary rise method has confirmed the increased wettability of the silica walls relative to the carbon walls and an influence of the pore roughness on the fluid/wall interactions, which is much more pronounced for silica than for carbon mesopores. We have also studied the melting behavior of D2O confined in OMC and SBA-15 by applying the dielectric method. The results show that the depression of the melting temperature of D2O in the pores of OMC is about 15 K higher relative to the depression of the melting temperature in SBA-15 pores with a comparable 5 nm size. This is caused by the influence of adsorbate/adsorbent interactions of the studied matrices.

Here we report the synthesis and characterization of ordered nanoporous carbon (with a 4.6 nm pore size) and SBA-15 (with a 5.3 nm pore size). The work describes the surface and textural properties of nanoporous molecular sieves, their wettability, and the melting behavior of D2O confined in the materials.

Oberflächeneigenschaften von synthetisierten nanoporöse Carbon und Silica-Matrizen

In this work, we report the synthesis and characterization of ordered nanoporous carbon material (also called ordered mesoporous carbon material [OMC]) ...

Bio-inspired Polydopamine Surface Modification of Nanodiamonds and Its Reduction of Silver Nanoparticles

Surface functionalization of nanodiamonds (NDs) is still challenging due to the diversity of functional groups on the ND surfaces. Here, we demonstrate a simple protocol for the multifunctional surface modification of NDs by using mussel-inspired polydopamine (PDA) coating. In addition, the functional layer of PDA on NDs could serve as a reducing agent to synthesize and stabilize metal nanoparticles. Dopamine (DA) can self-polymerize and spontaneously form PDA layers on ND surfaces if the NDs and dopamine are simply mixed together. The thickness of a PDA layer is controlled by varying the concentration of DA. A typical result shows that a thickness of ~5 to ~15 nm of the PDA layer can be reached by adding 50 to 100 &#181;g/mL of DA to 100 nm ND suspensions. Furthermore, the PDA-NDs are used as a substrate to reduce metal ions, such as Ag[(NH3)2]+, to silver nanoparticles (AgNPs). The sizes of the AgNPs rely on the initial concentrations of Ag[(NH3)2]+. Along with an increase in the concentration of Ag[(NH3)2]+, the number of NPs increases, as well as the diameters of the NPs. In summary, this study not only presents a facile method for modifying the surfaces of NDs with PDA, but also demonstrates the enhanced functionality of NDs by anchoring various species of interest (such as AgNPs) for advanced applications.

A facile protocol is presented to functionalize the surfaces of nanodiamonds with polydopamine.

Bio-inspirierte Polydopamine Oberflächenmodifizierung von Nano-Diamanten und der Reduktion von Silber-Nanopartikeln

Surface functionalization of nanodiamonds (NDs) is still challenging due to the diversity of functional groups on the ND surfaces. Here, we demonstrate a ...

Efficient Construction of Drug-like Bispirocyclic Scaffolds Via Organocatalytic Cycloadditions of &#945;-Imino &#947;-Lactones and Alkylidene Pyrazolones

Bispirocyclic scaffolds are one of the important structural subunits in many natural products that exhibit diverse and attractive biological activities. Recently, we have developed an efficient organocatalytic strategy, which provides facile access to a variety of enantiomerically enriched bispiro[&#947;-butyrolactone-pyrrolidin-4,4&#39;-pyrazolone] skeletons. In this paper, we demonstrate a detailed protocol for the asymmetric synthesis of drug-like bispirocyclic compounds with two spirocyclic carbon centers via an organocatyltic 1,3-dipolar cycloaddition reaction. Spirocyclization synthons &#945;-imino &#947;-lactones and alkylidene pyrazolones are prepared first, which are then subjected to a cycloaddition reaction in the presence of a bifunctional squaramide organocatalyst to afford the desired bispirocycles in high yields and excellent stereoselectivities. Chiral high-performance liquid chromatography (HPLC) is carried out to determine the enantiomeric purity of the products, and the d.r. value is examined by proton nuclear magnetic resonance (1H NMR). The absolute configuration of the product is assigned according to an X-ray crystallographic analysis. This synthetic strategy allows scientists to prepare a diversity of bispirocyclic scaffolds in high yields and excellent diastereo- and enantioselectivities.

Enantiomerically enriched bispiro[&#947;-butyrolactone-pyrrolidin-4,4&#39;-pyrazolone] skeletons are asymmetrically synthesized through a simple organocatalytic 1,3-dipolar cycloaddition reaction.

Energieeffizientes bauen Drogen wie Bispirocyclic Gerüste über Organocatalytic Cycloadditions von α-Imino γ-Lactone und Alkylidene Pyrazolones

Bispirocyclic scaffolds are one of the important structural subunits in many natural products that exhibit diverse and attractive biological activities. ...

Chemical Inactivation of the E3 Ubiquitin Ligase Cereblon by Pomalidomide-based Homo-PROTACs

The immunomodulatory drugs (IMiDs) thalidomide and its analogs, lenalidomide and pomalidomide, all FDA approved drugs for the treatment of multiple myeloma, induce ubiquitination and degradation of the lymphoid transcription factors Ikaros (IKZF1) and Aiolos (IKZF3) via the cereblon (CRBN) E3 ubiquitin ligase for proteasomal degradation. IMiDs have recently been utilized for the generation of bifunctional proteolysis targeting chimeras (PROTACs) to target other proteins for ubiquitination and proteasomal degradation by the CRBN E3 ligase. We designed and synthesized pomalidomide-based homobifunctional PROTACs and analyzed their ability to induce self-directed ubiquitination and degradation of CRBN. Here, CRBN serves as both, the E3 ubiquitin ligase and the target at the same time. The homo-PROTAC compound 8 degrades CRBN with a high potency with only minimal remaining effects on IKZF1 and IKZF3. CRBN inactivation by compound 8 had no effect on cell viability and proliferation of different multiple myeloma cell lines. This homo-PROTAC abrogates the effects of IMiDs in multiple myeloma cells. Therefore, our homodimeric pomalidomide-based compounds may help to identify CRBN&#8216;s endogenous substrates and physiological functions and investigate the molecular mechanism of IMiDs.

This work describes the synthesis and characterization of a pomalidomide-based, bifunctional homo-PROTAC as a novel approach to induce ubiquitination and degradation of the E3 ubiquitin ligase cereblon (CRBN), the target of thalidomide analogs.

Chemische Inaktivierung des E3 Ubiquitin Ligase Cereblon durch Pomalidomid-basierte Homo-PROTACs

The immunomodulatory drugs (IMiDs) thalidomide and its analogs, lenalidomide and pomalidomide, all FDA approved drugs for the treatment of multiple ...