Die Autoren bedanken sich bei allen Lebensmittelsicherheit Labor Studenten und Freiwilligen, die mit dieser Studie geholfen haben. Diese Forschung wurde von einem USDA National Integrated Food Safety Initiative (NIFSI) Zuschuss (Auszeichnung # 10507316) finanziert.

1. Standardkurve <ol><li> Wiegen 37,5 mg Leuchtstoffpulver und in 6 ml 200 Proof-Ethanol lösen. Stellen Sie 2-fach serielle Verdünnungen von dieser Lösung in 200 Proof-Ethanol. </li><li> Vortex alle Proben für 10 sec und die Extinktion bei 370 nm auf. </li><li> Berechnen Sie die Menge an fluoreszierendem Pulver pro 1 ml 200 Proof-Ethanol. </li><li> Vorbereitung der Standardkurve (Konzentration in mg / ml auf der y-Achse und die Absorption bei 370 nm auf der X-Achse), um die Absorption, basierend auf Fluoreszenzpulverkonzentration zeigen. </li></ol> 2. Impfen Deli Fleisch (Bologna) mit Leuchtstoffpulver <ol><li> Schneiden Sie das Fleisch in deli ca. 100 mm dicken Proben mit einem sauberen Messer und Schneidebrett. Vorbereitung drei Proben, die mit A, B und C. </li><li> Probe A Coat gleichmäßig mit Leuchtstoffpulver mit einem leicht feuchten, sauberen Schwamm. Verbreiten Sie das Pulver auf der Fleischprobe gleichmäßig. Inokulieren keine Proben B und C mit der Leuchtstoffpulver. </li&gt; <li> Wickeln Sie die Proben mit Plastikfolie und beschriften Sie die Leuchtstoffpulver beschichtet Probe als &quot;A&quot; und die verbleibenden zwei Proben B und C mit Klebeband. </li><li> Die Proben werden in der deli Fall oder Kühlschrank bei 4 ° C in der Mock-Küche, wo das Experiment durchgeführt wird gehalten. </li></ol> 3. Mock Deli Kitchen Vorbereitung <ol><li> Geben sauberen Handschuhen und 70% Ethanol-Spray in der Küche. </li><li> Montieren schwarz Kompaktleuchtstofflampen mit 13 W Glühbirnen rund um den Slicer-Bereich. </li><li> Bereiten Sie eine 5 cm x 5 cm Ausschnitt aus Aluminiumfolie, die als Vorlage für einen Abstrich zu dienen. </li><li> Bereiten Sie 15 ml Röhrchen mit 6 ml 95% Ethanol. </li></ol> 4. Video-Setup Berg drei Videokameras an strategischen Stellen, um alle Bereiche des Mock deli in der gleichen Zeit zu beobachten. Schalten Sie die Kamera, bevor die Simulation der Slicer-Verfahren (wie in Protokoll Nr. 5 erklärt) und die Ergebnisse gleichzeitig zu analysieren (wieerklärt in Protokoll Nr. 7). 5. Simulation Deli Slicing Verfahren, um Kreuzkontamination verfolgen Zur Verbesserung der Stichprobengröße und Variation zu integrieren, führen diese Studie durch die Rekrutierung von Teilnehmern nach der Genehmigung des Protokolls vom Institutional Review Board der jeweiligen Institution. Der Teilnehmer kann ein Student, oder auch nicht haben Erfahrung im Einzelhandel deli Umgebungen. Stellen Sie sicher, dass jeder Teilnehmer trägt Handschuhe, wenn sie die deli eingeben. Nehmen Sie ein &quot;Vorher&quot;-Bild unter Schwarzfluoreszenzlicht, gefolgt von einem &quot;nach&quot;-Bild nach Abschluss der Studie. Stellen Sie klare schriftliche und mündliche Anweisungen, um jedem Teilnehmer wie folgt: <ol><li> Zum Kühlschrank. </li><li> Fleisch mit &quot;A&quot; entfernen. </li><li> Packen Sie Fleisch und sparen Plastikfolie. </li><li> Legen Sie Fleisch auf Schlitten Tablett Schneidemaschine. </li><li> Sichern Sie Fleisch mit Fleisch Griff. </li><li> Schalten Sie das Gerät einschalten. </li><li> Stellen slicer Index Knopf auf &quot;2&quot;. </li><li> Scheibe und verzichten 5 Stücke Fleisch auf deli Papier. </li><li> Schalten Sie den Netzschalter aus und lassen Sie Fleisch Griff. </li><li> Zeigen Fleischscheiben in Kunststoffbeutel mit der Aufschrift &quot;A&quot;. </li><li> Rewrap Fleisch &quot;A&quot; und zurück zum Kühlschrank. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 2-11 mit Fleisch mit der Bezeichnung &quot;B&quot; und &quot;C&quot;. </li></ol> 6. Quantifizierung der Leuchtstoffpulver Quantifizierung der fluoreszierenden Pulver nach Abschluss der Mock Slicing (Abschnitt 5.4) in der Feinkostküche. Dazu gehen Sie folgendermaßen vor: <ol><li> Verwenden Sie die sterile 5 cm x 5 cm Aluminiumfolie Schablone und legen Sie es auf den in Abbildung 1 markierten Bereiche. </li><li> Verwenden Sie eine sterile Calciumalginat Wattestäbchen in 95% Ethanol getränkten Tupfer die Gegend, und legen in 6 ml 95% Ethanol in einem sterilen Polypropylenröhrchen. </li><li> Wirbel das Rohr gründlich und in ein Glasküvetten die Extinktion bei 370 nm abgelesen. </li><li> Siehe die standard-Kurve, die Menge an Leuchtstoffpulver (y) unter Verwendung der folgenden Gleichung bestimmen: y = mx + b wobei x die Absorptionsfähigkeit ist, m die Steigung der Standardkurve und b der Achsenabschnitt. </li><li> Zur Normalisierung der Daten, die Berechnung der Prozent Fluoreszenzpulver pro Fläche abgetastet unter Verwendung der folgenden Formel: </li></ol><img src="/files/ftp_upload/51402/51402eq1.jpg" alt="Formel 1" /> 7. Videoanalyse Videotape die Teilnehmer, wie sie vollständige Aufgaben von 5,1 bis 5,12. Synchronisieren und speichern Sie die Videoaufnahmen auf DVD-Discs, so dass alle Winkel können gleichzeitig angezeigt werden. Sehen Sie die Videos, die Anzahl der Hand berührt (die Anzahl der Freiwilligen Bereiche berühren, in der Mock-Feinkostladen) auf verschiedenen Oberflächen in der Umwelt Feinkostladen (4 verschiedene Forscher die kompletten Daten unabhängig voneinander eingestellt analysieren) aufzeichnen.

<ol>
	<li>Sheen, S., Hwang, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mathematical+modeling+the+cross-contamination+of+Escherichia+coli+O157:+H7+on+the+surface+of+ready-to-eat+meat+product+while+slicing.">Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing.</a> Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).</li><li>Crandall, P., Neal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimizing+the+risk+of+Listeria+monocytogenes+in+retail+delis+by+developing+employee+focused,+cost+effective+training.">Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).</li><li>Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+and+chemical+control+of+Salmonella+in+ready-to-eat+products.">Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).</li><li>Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precut+prepackaged+lettuce:+a+risk+for+listeriosis?.">Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis?.</a> Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).</li><li>Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. 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N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+incidence+and+transmission+of+Listeria+monocytogenes+in+ready-to-eat+products+in+retail+and+food+service+environments.">A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments.</a> J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+risk+assessment+of+relative+risk+to+public+health+from+foodborne+Listeria+monocytogenes+among+selected+categories+of+ready-to-eat+foods.">Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods.</a> , .</li><li>Endrikat, S., Gallagher, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+risk+assessment+for+Listeria+monocytogenes+in+prepackaged+versus+retail-sliced+deli+meat.">A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat.</a> J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).</li><li>Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+public+health+impact+of+Listeria+monocytogenes+product-to-product+and+environment-to-product+contamination+of+deli+meats+at+retail.">Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail.</a> J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).</li><li>Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Handwashing+Technique+Analysis.">Handwashing Technique Analysis.</a> Patent number 5900067. , (1999).</li><li>Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+and+relative+quantification+of+cross-contamination+within+a+mock+retail+delicatessen+environment.">Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment.</a> Food Control. 31, 116-124 (2013).</li><li>Xiao, M., Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+and+System+for+Fecal+Detection.">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5821546. , (1998).</li><li>Waldroup, A., Kirby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+and+System+for+Fecal+Detection.">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5621215. , (1997).</li><li>Ashby, K. D., Wen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+of+dietary+porphyrins+as+a+basis+for+real-time+detection+of+fecal+contamination+on+meat.">Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat.</a> J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).</li><li>Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+protein+marked+Escherichia+coli+biotype+I+strains+as+surrogates+for+enteric+pathogens+in+validation+of+beef+carcass+interventions.">Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions.</a> J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).</li><li>Byrd, J., Hargis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+marker+for+the+detection+of+crop+and+upper+gastrointestinal+leakage+in+poultry+processing+plants.">Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants.</a> Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).</li><li>Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+Listeria+monocytogenes+during+mechanical+slicing+of+turkey+breast+bologna,+and+salami..">Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami..</a> J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).</li></ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Das Ziel dieser Studie war es zu zeigen, wie bakterielle Kreuzkontamination konnte in einem Einzelhandels deli Umgebung, um Strategien zu kontrollieren und reduzieren das Risiko von lebensmittelbedingten Erkrankungen zu entwickeln auftreten. Der Einzelhandels deli Umgebung einen besonders hohen Risiko für L. monocytogenes. Die USDA-FSIS berichtet, dass Deli Fleisch auf den Einzelhandel in Scheiben geschnitten hat ein sieben mal höher Verbindung mit Listeriose, dass Deli Fleisch in Scheiben geschnitten und in ...

Kreuzkontamination von lebensmittelbedingten Krankheitserreger in der Zubereitung von Speisen Umwelt, vor allem im Händlerbereich, ist ein wichtiges Anliegen aufgrund einer erhöhten Gefahr von Lebensmittelvergiftungen aus einer Vielzahl von Quellen, einschließlich der Fleisch sowie Gemüse 05.01. Am häufigsten bakteriellen Krankheitserregern in das Retail-Umfeld durch kontaminierte Lebensmittel 6. Ready-to-eat Lebensmitteln auf Einzelhandelsebene hergestellt werden, sind von besonderer Bedeutung, da es in der Regel keine weitere Intervention oder Behandlung (dh Kochen oder Heizen) vor dem Verzehr 7. Außerdem auf kontaminierten Lebensmitteln vorhanden RTE Erreger können dann auf andere Lebensmittel oder Lebensmittelkontaktflächen im Retail-Umfeld übertragen werden. Während Kreuzkontamination kann in praktisch jeder Art von Lebensmitteleinzel Umgebung auftreten, sind von besonderem Interesse Feinkostläden speziell wegen der Assoziation von RTE Wurstwaren mit dem Erreger Listeria monocytogenen 2. Auf der Grundlage einer Risikobewertung analysiert von der US Food and Drug Administration (FDA) und der US-Landwirtschaftsministerium für Lebensmittelsicherheit und Kontrolle Service (USDA-FSIS) durchgeführt wurde, sind kontaminierte Wurst wahrscheinlich für 90% der Fälle von Listeriose verantwortlich - eine seltene noch schwere Krankheit beim Menschen verursacht durch L. monocytogenes - in den Vereinigten Staaten 8. Im Allgemeinen haben die Wurstwaren im Einzelhandel und Food-Service-Betriebe, in Scheiben geschnitten mit einem höheren Risiko verbunden gewesen L. monocytogenes im Vergleich zu presliced ​​Wurst in einem USDA geprüft Anlage durch den Hersteller 9. Dies könnte wegen der erhöhten Wahrscheinlichkeit der Einschleppung von Krankheitserregern von Lebensmitteln umgehen, eingehenden Rohstoffe oder verarbeiteten Lebensmitteln, die sich möglicherweise kontaminierten Nachbehandlung 7 sein. Insgesamt entfallen Listeriose für etwa 28% der geschätzten Todesfälle durch Lebensmittelvergiftungen verursacht pro Jahr in den USA Aufgrund der inerhöhtes Risiko von L. monocytogenes in Wurst auf Einzelhandelsebene in Scheiben geschnitten, hat die deli Aufschnittmaschine sich als wichtiger Faktor für die Oberflächen Übertragung von Krankheitserregern im Einzelhandel 2,10 identifiziert worden. Wie Sheen 1 angedeutet, ist der letzte Schneidbearbeitungsschritt vor dem Verzehr, daher sollte die deli Aufschnittmaschine als ein kritischer Kontrollpunkte sowohl für das Verständnis und die Kreuzkontamination verhindert werden 1. Das Ziel dieser Studie war es, eine Methodik, um eine Kontamination im Einzelhandel deli-Umgebung mit einer Leuchtstoffpulver, wie Glo Keimbahn zu entwickeln. Dies ist eine fluoreszierende Verbindung, die verwendet wurde, um bakterielle Kontamination und Hygienepraktiken 11,12 simulieren. Diese Studie wurde konzipiert, um Erreger Übertragung durch kontaminierte Fleisch an die Schneidemaschine, die Umgebung und andere Wurstwaren zu verfolgen. Es ist wichtig, die Wege der cont verstehenAminierung beide wirksame Interventionen und Unterrichtsmaterial für den Einzelhandel Mitarbeiter und Führungskräfte zu entwickeln. Ein ähnlicher Ansatz verwendet werden, um Krankheitserreger Übertragung in andere Verarbeitungsumgebungen (z. B. Geflügel und Rind), Betriebe und Krankenhäuser zu simulieren.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="637">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Glo-Germ Powder</td>
			<td style="width:71px;">Glo Germ Co</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Purchased from vendor</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Ethanol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">E7023</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Permanent markets</td>
			<td style="width:71px;">Sharpie</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td colspan="2">Purchased from stationary store</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Gloves</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82026-424</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Deli Meat</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td colspan="2">Bologna Chub from regular grocery store</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Cutting Board</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td colspan="2">A regukar kitchen cutting board</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Knife</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>A regular kitchen knife&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">5 x 5 cm sterile templates</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td colspan="2">Aluminium foil templates cut into 5x 5 cm templates and sterilized&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">15 ml polypropylene centrifuge tubes</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">89039-664</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:71px;">Puritan</td>
			<td style="width:119px;">25-806</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Glass cuvettes</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">470019-186</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Vortex</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">58816-121</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Flip camera</td>
			<td style="width:71px;">Flip Ultra HD</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Purchased online</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Deli slicer</td>
			<td style="width:71px;">Bizerba</td>
			<td style="width:119px;">SE-12</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Deli refrigerator</td>
			<td style="width:71px;">True company</td>
			<td style="width:119px;">TDBD-722</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Scale</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">Spectrophotometer</td>
			<td style="width:71px;">Milton Roy Spectronic 20D</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tracking microbial contamination in retail environments using fluorescent powder - a retail delicatessen environment example

Kreuzkontamination von lebensmittelbedingten Krankheitserreger im Retail-Umfeld ist eine bedeutende Problem der öffentlichen Gesundheit einen Beitrag zu einem erhöhten Risiko für Lebensmittelvergiftungen. Ready-to-eat (RTE) verarbeiteten Lebensmitteln wie Wurst, Käse, und in einigen Fällen frischen Produkten, im lebensmittelbedingten Krankheitsausbrüchen durch Kontamination mit Krankheitserregern wie Listeria monocytogenes beteiligt. In Bezug auf L. monocytogenes, deli Aufschnittmaschinen sind oft die Hauptquelle der Kreuzkontamination. Das Ziel dieser Studie war es, eine fluoreszierende Verbindung verwenden, um bakterielle Verunreinigungen zu simulieren und verfolgen diese Verunreinigung im Einzelhandel Einstellung. Ein Mock deli Küche wurde entwickelt, um die Einzelhandelsumgebung zu simulieren. Deli Fleisch wurde mit der fluoreszierenden Verbindung geimpft und Freiwilligen wurden rekrutiert, um eine Reihe von Aufgaben ähneln denen eines Lebensmitteleinzelhandel Mitarbeiter erwartet abzuschließen. Die Freiwilligen wurden angewiesen, in Scheiben schneiden, verpacken und lagern Sie das Fleisch in einem Feinkostladen Kühlschrank. Das PotentialKreuzkontamination in der Schein Einzelhandel durch Abtupfen bestimmten Bereichen und Messen der optischen Dichte der aufgewischt Bereich mit einem Spektralphotometer verfolgt. Die Ergebnisse zeigten, dass der Kühlschrank (dh deli Fall) Griff und verschiedene Bereiche auf der Schneidemaschine hatte das höchste Risiko für eine Kreuzkontamination. Die Ergebnisse dieser Studie verwendet werden, um gezieltere Schulungsmaßnahmen Material für Beschäftigte im Einzelhandel zu entwickeln. Darüber hinaus könnten auch ähnliche Methoden verwendet werden, um mikrobielle Kontamination der Lebensmittelproduktionsumgebungen (z. B. kleine Betriebe), Krankenhäuser, Pflegeheime, Kreuzfahrtschiffe und Hotels zu verfolgen.

Abbildung 1 stellt die Bereiche der Schneidemaschine, die abgetupft wurden, nachdem die Freiwilligen abgeschlossen, die zugewiesenen Aufgaben. Die Freiwilligen wurden auf Video aufgezeichnet, um die mittlere Frequenz der Handkontakt auf diesen verschiedenen Oberflächen zu analysieren. Die Häufigkeit der Handkontakt wurde von vier verschiedenen Beobachtern analysiert und gemittelt. Diese Ergebnisse sind in Fig. 2 gezeigt. Die Daten zeigen, dass das Fleisch Griff, Deli Fleisch-Wrapper, ...

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Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

Das Ziel dieser Studie war es, das Potenzial Kreuzkontamination Mechanismus von lebensmittelbedingten Krankheitserreger Listeria monocytogenes in einem Einzelhandels deli Einstellung zu demonstrieren. Diese Methode kann zu einer Vielzahl von unterschiedlichen Umgebungen angewendet, um Infektion mit Krankheitserregern zu verfolgen.

Tracking-Mikrobielle Kontamination in Einzelhandelsumgebungen mit fluoreszierenden Pulver - Ein Feinkost Einzelhandel Beispiel Umwelt

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

tracking-microbial-contamination-retail-environments-using

Research

JoVE Journal

Environment

11.0K Aufrufe.  University of Houston.  Das Ziel dieser Studie war es, das Potenzial Kreuzkontamination Mechanismus von lebensmittelbedingten Krankheitserreger Listeria monocytogenes in einem Einzelhandels deli Einstellung zu demonstrieren. Diese Methode kann zu einer Vielzahl von unterschiedlichen Umgebungen angewendet, um Infektion mit Krankheitserregern zu verfolgen. 

Serie: Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

Determination of Microbial Extracellular Enzyme Activity in Waters, Soils, and Sediments using High Throughput Microplate Assays

Much of the nutrient cycling and carbon processing in natural environments occurs through the activity of extracellular enzymes released by microorganisms. Thus, measurement of the activity of these extracellular enzymes can give insights into the rates of ecosystem level processes, such as organic matter decomposition or nitrogen and phosphorus mineralization. Assays of extracellular enzyme activity in environmental samples typically involve exposing the samples to artificial colorimetric or fluorometric substrates and tracking the rate of substrate hydrolysis. Here we describe microplate based methods for these procedures that allow the analysis of large numbers of samples within a short time frame. Samples are allowed to react with artificial substrates within 96-well microplates or deep well microplate blocks, and enzyme activity is subsequently determined by absorption or fluorescence of the resulting end product using a typical microplate reader or fluorometer. Such high throughput procedures not only facilitate comparisons between spatially separate sites or ecosystems, but also substantially reduce the cost of such assays by reducing overall reagent volumes needed per sample.

Microplate based procedures are described for the colorimetric or fluorometric analysis of extracellular enzyme activity. These procedures allow for the rapid assay of such activity in large numbers of environmental samples within a manageable time frame.

Bestimmung mikrobieller extrazelluläre Enzymaktivität in Wasser, Böden und Sedimente mit hohem Durchsatz Mikrotiterplatten-Assays

Much of the nutrient cycling and carbon  processing in natural environments occurs through the activity of extracellular  enzymes released by ...

Forschung

Umwelt

Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms. Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear young, feed, or hide from natural enemies or harsh environmental conditions outside of the tree. Organisms that persist within the phloem habitat are difficult to observe given their location under bark. We provide a technique to preserve intact phloem and prepare it for experimentation with invertebrates and microorganisms. The apparatus is called a &#8216;phloem sandwich&#8217; and allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms. This technique has resulted in a better understanding of the feeding behaviors, life-history traits, reproduction, development, and interactions of organisms within tree phloem. The strengths of this technique include the use of inexpensive materials, variability in sandwich size, flexibility to re-open the sandwich or introduce multiple organisms through drilled holes, and the preservation and maintenance of phloem integrity. The phloem sandwich is an excellent educational tool for scientific discovery in both K-12 science courses and university research laboratories.

We provide a technique to preserve intact tree phloem and prepare it for observation. We create an apparatus called a phloem sandwich that allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms that inhabit phloem tissues.

Technik zur Untersuchung Gliederfüßer und Mikrobielle Gemeinschaften im Baum Tissues

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms.  Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear ...

An Aquatic Microbial Metaproteomics Workflow: From Cells to Tryptic Peptides Suitable for Tandem Mass Spectrometry-based Analysis

Meta-omic technologies such as metagenomics, metatranscriptomics and metaproteomics can aid in the understanding of microbial community structure and metabolism. Although powerful, metagenomics alone can only elucidate functional potential. On the other hand, metaproteomics enables the description of the expressed in situ metabolism and function of a community. Here we describe a protocol for cell lysis, protein and DNA isolation, as well as peptide digestion and extraction from marine microbial cells collected on a cartridge filter unit (such as the Sterivex filter unit) and preserved in an RNA stabilization solution (like RNAlater). In mass spectrometry-based proteomics studies, the identification of peptides and proteins is performed by comparing peptide tandem mass spectra to a database of translated nucleotide sequences. Including the metagenome of a sample in the search database increases the number of peptides and proteins that can be identified from the mass spectra. Hence, in this protocol DNA is isolated from the same filter, which can be used subsequently for metagenomic analysis.

This protocol is for the extraction and concentration of protein and DNA from microbial biomass collected from seawater, followed by the generation of tryptic peptides suitable for tandem mass spectrometry-based proteomic analysis.

Ein Aquatic Microbial Metaproteomik Workflow: Von der Zelle zum tryptischen Peptide Geeignet für Tandem-Massenspektrometrie-basierte Analyse

Meta-omic technologies such as metagenomics, metatranscriptomics and metaproteomics can aid in the understanding of microbial community structure and ...

Extraction and Analysis of Microbial Phospholipid Fatty Acids in Soils

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about the overall structure of terrestrial microbial communities. PLFA profiling has been extensively used in a range of ecosystems as a biological index of overall soil quality, and as a quantitative indicator of soil response to land management and other environmental stressors.
The standard method presented here outlines four key steps: 1. lipid extraction from soil samples with a single-phase chloroform mixture, 2. fractionation using solid phase extraction columns to isolate phospholipids from other extracted lipids, 3. methanolysis of phospholipids to produce fatty acid methyl esters (FAMEs), and 4. FAME analysis by capillary gas chromatography using a flame ionization detector (GC-FID). Two standards are used, including 1,2-dinonadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (PC(19:0/19:0)) to assess the overall recovery of the extraction method, and methyl decanoate (MeC10:0) as an internal standard (ISTD) for the GC analysis.

Phospholipid fatty acids provide information about the structure of soil microbial communities. We present methods for extraction from soil samples with a single-phase chloroform mixture, fractionation of extracted lipids using solid phase extraction columns, and methanolysis to produce fatty acid methyl esters, which are analyzed by capillary gas chromatography.

Extraktion und Analyse von Microbial Phospholipidfettsäuren in Böden

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about ...

Sampling, Sorting, and Characterizing Microplastics in Aquatic Environments with High Suspended Sediment Loads and Large Floating Debris

The ubiquitous presence of plastic debris in the ocean is widely recognized by the public, scientific communities, and government agencies. However, only recently have microplastics in freshwater systems, such as rivers and lakes, been quantified. Microplastic sampling at the surface usually consists of deploying drift nets behind either a stationary or moving boat, which limits the sampling to environments with low levels of suspended sediments and floating or submerged debris. Previous studies that employed drift nets to collect microplastic debris typically used nets with &#8805;300 &#181;m mesh size, allowing plastic debris (particles and fibers) below this size to pass through the net and elude quantification. The protocol detailed here enables: 1) sample collection in environments with high suspended loads and floating or submerged debris and 2) the capture and quantification of microplastic particles and fibers &lt;300 &#181;m. Water samples were collected using a peristaltic pump in low-density polyethylene (PE) containers to be stored before filtering and analysis in the lab. Filtration was done with a custom-made microplastic filtration device containing detachable union joints that housed nylon mesh sieves and mixed cellulose ester membrane filters. Mesh sieves and membrane filters were examined with a stereomicroscope to quantify and separate microplastic particulates and fibers. These materials were then examined using a micro-attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectrometer (micro ATR-FTIR) to determine microplastic polymer type. Recovery was measured by spiking samples using blue PE particulates and green nylon fibers; percent recovery was determined to be 100% for particulates and 92% for fibers. This protocol will guide similar studies on microplastics in high velocity rivers with high concentrations of sediment. With simple modifications to the peristaltic pump and filtration device, users can collect and analyze various sample volumes and particulate sizes.

Most microplastic research to date has occurred in marine systems where suspended solid levels are relatively low. Focus is now shifting to freshwater systems, which may feature high sediment loads and floating debris. This protocol addresses collecting and analyzing microplastic samples from aquatic environments that contain high suspended solid loads.

Probenahme, Sortieren und Charakterisierung Mikroplastik in aquatischen Umgebungen mit hohen abgehängte Sedimentfracht und große schwimmende Trümmer

The ubiquitous presence of plastic debris in the ocean is widely recognized by the public, scientific communities, and government agencies. However, only ...

Detection of 3-Nitrotyrosine in Atmospheric Environments via a High-performance Liquid Chromatography-electrochemical Detector System

3-nitrotyrosine (3-NT) is generated from the tyrosine residue in atmospheric bio-aerosol proteins via a reaction with ozone (O3) and nitrogen dioxide (NO2). Stable 3-NT is a specific marker for oxidative damage and is reported to have a promotive effect to elicit allergies. In the present study, we report the development of a highly sensitive assay to quantify 3-NT in air sampler filters to collect &#60; 2.5 &#181;m of particulate matter (PM2.5) from urban environmental air, including bio-aerosol. In this method, a 6 mm-diameter round hole was cut from the filters of air samplers and mixed with a nonspecific protease cocktail in order to hydrolyze proteins. Protein samples digested to the amino acid level were tested for 3-NT using a high-performance liquid chromatography-electrochemical detector (HPLC-ECD). The maximum 3-NT content was detected in a prefilter for PM of sizes from 4.5 to 7.3 &#956;m, with a detection limit of 1.13 pg/m3.

Detection of 3-Nitrotyrosine in Atmospheric Environments via a High-performance Liquid Chromatography-electrochemical Detector System

We present a method to detect 3-nitrotyrosine chemical modifications of atmospheric proteins with 6 mm-diameter rounds cut from air sampler prefilters using a high-performance liquid chromatography-electrochemical detector (HPLC-ECD).

Erkennung von 3-Nitrotyrosine in atmosphärischen Umgebungen über eine High-Performance Liquid Chromatography-elektrochemischen Detektor-System

3-nitrotyrosine (3-NT) is generated from the tyrosine residue in atmospheric bio-aerosol proteins via a reaction with ozone (O3) and nitrogen dioxide ...

Fluorescently Labeled Bacteria as a Tracer to Reveal Novel Pathways of Organic Carbon Flow in Aquatic Ecosystems

Elucidating trophic interactions, such as predation and its effects, is a frequent task for many researchers in ecology. The study of microbial communities has many limitations, and determining a predator, prey, and predatory rates is often difficult. Presented here is an optimized method based on the addition of fluorescently labelled prey as a tracer, which allows for reliable quantitation of the grazing rates in aquatic predatory eukaryotes and estimation of nutrient transfer to higher trophic levels.

Presented here is a protocol for a single-cell, epifluorescence microscopy-based technique to quantify grazing rates in aquatic predatory eukaryotes with high precision and taxonomic resolution.

Fluoreszierend markierte Bakterien als Tracer, um neuartige Wege des organischen Kohlenstoffflusses in aquatischen Ökosystemen zu enthüllen

Elucidating trophic interactions, such as predation and its effects, is a frequent task for many researchers in ecology. The study of microbial ...

Enrichment and Detection of Clostridium perfringens Toxinotypes in Retail Food Samples

Clostridium perfringens (C. perfringens) is a prolific toxin producer and causes a wide range of diseases in various hosts. C. perfringens is categorized into five different toxinotypes, A through E, based on the carriage of four major toxin genes. The prevalence and distribution of these various toxinotypes is understudied, especially their pervasiveness in American retail food. Of particular interest to us are the type B and D strains, which produce epsilon toxin, an extremely lethal toxin suggested to be the environmental trigger of multiple sclerosis in humans. To evaluate the presence of different C. perfringens toxinotypes in various food samples, we developed an easy method to selectively culture these bacteria without the use of an anaerobic container system only involving three culturing steps. Food is purchased from local grocery stores and transported to the laboratory under ambient conditions. Samples are minced and inoculated into modified rapid perfringens media (RPM) and incubated overnight at 37 &#176;C in a sealed, airtight conical tube. Overnight cultures are inoculated onto a bottom layer of solid Tryptose Sulfite Cycloserine (TSC) agar, and then overlaid with a top layer of molten TSC agar, creating a &#34;sandwiched&#34;, anaerobic environment. Agar plates are incubated overnight at 37 &#176;C and then evaluated for appearance of black, sulfite-reducing colonies. C. perfringens-suspected colonies are removed from the TSC agar using sterile eye droppers, and inoculated into RPM and sub-cultured overnight at 37 &#176;C in an airtight conical tube. DNA is extracted from the RPM subculture, and then analyzed for the presence of C. perfringens toxin genes via polymerase chain reaction (PCR). Depending on the type of food sampled, typically 15&#8211;20% of samples test positive for C. perfringens.

Enrichment and Detection of Clostridium perfringens Toxinotypes in Retail Food Samples

The objective of this protocol is to detect different Clostridium perfringens toxinotypes in locally purchased foods, particularly epsilon toxin producing strain types B and D, without the use of anaerobic chambers.

Anreicherung und Nachweis von Clostridium perfringens Toxinotypes in Einzelhandels-Lebensmittelproben

Clostridium perfringens (C. perfringens) is a prolific toxin producer and causes a wide range of diseases in various hosts. C. perfringens is categorized ...

In Situ Chemotaxis Assay to Examine Microbial Behavior in Aquatic Ecosystems

Microbial behaviors, such as motility and chemotaxis (the ability of a cell to alter its movement in response to a chemical gradient), are widespread across the bacterial and archaeal domains. Chemotaxis can result in substantial resource acquisition advantages in heterogeneous environments. It also plays a crucial role in symbiotic interactions, disease, and global processes, such as biogeochemical cycling. However, current techniques restrict chemotaxis research to the laboratory and are not easily applicable in the field. Presented here is a step-by-step protocol for the deployment of the in situ chemotaxis assay (ISCA), a device that enables robust interrogation of microbial chemotaxis directly in the natural environment. The ISCA is a microfluidic device consisting of a 20 well array, in which chemicals of interest can be loaded. Once deployed in aqueous environments, chemicals diffuse out of the wells, creating concentration gradients that microbes sense and respond to by swimming into the wells via chemotaxis. The well contents can then be sampled and used to (1) quantify strength of the chemotactic responses to specific compounds through flow cytometry, (2) isolate and culture responsive microorganisms, and (3) characterize the identity and genomic potential of the responding populations through molecular techniques. The ISCA is a flexible platform that can be deployed in any system with an aqueous phase, including marine, freshwater, and soil environments.

Presented here is the protocol for an in situ chemotaxis assay, a recently developed microfluidic device that enables studies of microbial behavior directly in the environment.

In Situ Chemotaxis Assay zur Untersuchung des mikrobiellen Verhaltens in aquatischen Ökosystemen

Microbial behaviors, such as motility and chemotaxis (the ability of a cell to alter its movement in response to a chemical gradient), are widespread ...

Evaluating the Impact of Hydraulic Fracturing on Streams using Microbial Molecular Signatures

Hydraulic fracturing (HF), commonly called &#34;fracking&#34;, uses a mixture of high-pressure water, sand, and chemicals to fracture rocks, releasing oil and gas. This process revolutionized the U.S. energy industry, as it gives access to resources that were previously unobtainable and now produces two-thirds of the total natural gas in the United States. Although fracking has had a positive impact on the U.S. economy, several studies have highlighted its detrimental environmental effects. Of particular concern is the effect of fracking on headwater streams, which are especially important due to their disproportionately large impact on the health of the entire watershed. The bacteria within those streams can be used as indicators of stream health, as the bacteria present and their abundance in a disturbed stream would be expected to differ from those in an otherwise comparable but undisturbed stream. Therefore, this protocol aims to use the bacterial community to determine if streams have been impacted by fracking. To this end, sediment, and water samples, from streams near fracking (potentially impacted) and upstream or in a different watershed of fracking activity (unimpacted) must be collected. Those samples are then subjected to nucleic acid extraction, library preparation, and sequencing to investigate microbial community composition. Correlational analysis and machine learning models can subsequently be employed to identify which features are explanative of variation in the community, as well as identification of predictive biomarkers for fracking&#39;s impact. These methods can reveal a variety of differences in the microbial communities among headwater streams, based on the proximity to fracking, and serve as a foundation for future investigations on the environmental impact of fracking activities.

Here, we present a protocol to investigate the impacts of hydraulic fracturing on nearby streams by analyzing their water and sediment microbial communities.

Bewertung der Auswirkungen von Hydraulic Fracturing auf Bäche mit mikrobiellen molekularen Signaturen

Hydraulic fracturing (HF), commonly called &#34;fracking&#34;, uses a mixture of high-pressure water, sand, and chemicals to fracture rocks, releasing oil ...