Dr. Khan bestätigt Zuschüsse aus NIH/NICHD K12HD052892, Alpha-1-Stiftung, Stiftung Hillman und Pittsburgh Leber Research Center. Dr. Michalopoulos erkennt Zuschüsse aus NIH/NIDDK P01DK096990. Wir freuen uns über die hervorragende und großzügige technische Hilfe von Anne Orr. Wir sind auch für den Zugriff auf die Transplantation/Nagetier Mikrochirurgie-Labor Dr. David A. Geller dankbar.

Alle Verfahren wurden im Einklang mit ethischen Richtlinien des institutionellen Animal Care und Verwendung von der University of Pittsburgh durchgeführt.
1. grundlegende Techniken und gemeinsame Verfahren
<ol><li>Autoklav alle mikrochirurgische Ausrüstung vor dem Gebrauch.</li>
	<li>Um zu vermeiden, die Maus zu töten, indem Anästhesie, prüfen Sie sorgfältig ihre Atmung.</li>
	<li>Tippen Sie auf Organe und Darm möglichst wenig schädigen Organe und verursacht Blutungen zu vermeiden. Drücken Sie blutende Punkte mit feuchten Wattestäbchen oder Gaze Schwämme.</li>
	<li>Verwenden Sie nasse Wattestäbchen für sanfte Manipulation der Organe. Nass, Vlies-Gaze Schwämme sind in zwei Größen verwendet, 3,5 × 3,5 cm und 6,0 × 6,0 cm. verwenden Sie die kleinere ganze Leber zurückziehen. Verwenden Sie den größeren, um den kleinen und großen Darm zu wickeln.</li>
</ol>(2) präoperativen Vorbereitung
<ol><li>Verwenden Sie männliche c57/b6 Mäuse 8-12 Wochen alt (wenn Körpergewicht ist ca. 20-35 g) für teilweise Gallengang Ligatur.</li>
	<li>Erlauben Sie die Mäuse freien Zugang zu Wasser und Nahrung bis zum Induktion der Anästhesie.</li>
</ol>3. teilweise Gallengang-Ligatur-Operation
<ol><li>Die Maus zu betäuben, indem man das Tier in eine Induktion-Kammer mit einer Mischung aus 1,5-2,0 % Isofluran und 1 L/min Sauerstoff. Überwachen Sie das Tier durch die Beobachtung der Atemfrequenz sorgfältig. Wenn die Atmung des Tieres einem Atemzug pro Sekunde beträgt, ist die Maus gut betäubt. Da vorderen Gliedmaßen Rückzug Reflex schneller verschwindet, ziehen Sie die hinteren Gliedmaßen Fuß sowie um völlige Fehlen der Reflex-Entzug zu bestätigen zu. Augen sollten mit einem ophthalmologischen Schmier Mittel zu Hornhautgeschwüren geschmiert werden. Beachten Sie die erste Dosis Schmerzmittel kann präoperativ gegeben werden, zur Stimulation der Schmerz-Rezeptoren zu verhindern.</li>
	<li>Rasieren Sie die Bauchdecke mit Haarschneidemaschinen, und platzieren Sie den Mauszeiger auf dem OP-Tisch unter dem Operationsmikroskop. Fixieren Sie alle Glieder an den Tisch mit Klebeband. Verwenden Sie Isofluran Inhalation zur Wartung der Maus unter Vollnarkose.<ol>
<li>Anpassen des Verdampfers Isoflurane und 2,0-3,0 % Isofluran für Induktion.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Verwendung von sterilen Tupfer desinfizieren die Bauchwand zuerst mit 0,3-0,5 mL Povidon-Jod angewendet topisch, gefolgt von 70 % Ethanol. Tier sollte mit einem sterilen Tuch abgedeckt werden.</li>
	<li>Machen Sie einen langen Mittellinie Bauchschnitt aus dem Xiphoid um das Schambein mit der Schere und Adson Pinzette. Nachdem Sie haben den Bauchschnitt, reduzieren Isofluran auf 0,8-1,0 % für die Wartung.</li>
	<li>Setzen Sie die Bauchhöhle mit einem Micro-Retraktor aus. Das Xiphoid mit Moskito-Zange halten und in Richtung zum Kopf der Maus einfahren. Fixieren Sie die Moskito-Zange mit weichem Ton.</li>
	<li>Einzuflößen 1-2 mL erwärmten (37 ° C) sterilisiert Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung (PBS) in die Bauchhöhle, nicht zu verletzen, Bauchorgane. Halten Sie den Dünndarm mit feuchten Wattestäbchen und ziehen sie sanft in Richtung zum Kopf der Maus. Schneiden Sie die Bänder zwischen den kleinen Därmen und Retroperitoneum, nicht zu verletzen, den Dünndarm (Abbildung 1A).</li>
	<li>Wickeln Sie den kleinen und großen Darm mit einem Schwamm nass, Vlies-Gaze. Legen Sie sie auf den kaudalen Teil der Bauchhöhle. Steril drapiert Feld zur Vermeidung von Kontaminationen können Darm verpackt in sterile Gaze auferlegt werden.</li>
	<li>Sanft Einfahren der gesamten Leber in Richtung der Xiphoid mithilfe einen kleinen nassen Vlies Gaze-Schwamm, setzen die hepatische Hilum und Hepato-Zwölffingerdarm Ligament (Abbildung 1 b).</li>
	<li>Überprüfen Sie die Anatomie des hepatischen Hilum bestätigen. Hauptgallengang befindet sich auf der Bauchseite der Pfortader. Standorte der rechten und linken hepatischen Gallenwege, die in den wichtigsten biliären Zusammenfluss bei der hepatischen Hilum entwässern zu bestätigen.</li>
	<li>Identifizieren Sie der linken hepatischen Gallenwege die Kanalisation den linken Lappen, und umschließen Sie es mit einer 10-0-Nylon-Naht mit der stumpfen Seite einer Naht-Nadel (Abbildung 2A). Nicht zu verletzen, der Pfortader, der Leberarterie und Leber Oberfläche.</li>
	<li>Verbinden Sie den linken Gallengang mit 10: 0 Nylon. (Abb. 2 b).</li>
	<li>Legen Sie den kleinen und großen Darm in der gleichen Position wie vor der Operation mit feuchten Wattestäbchen.</li>
	<li>Bestätigen Sie, dass es keine Darm Torsion und intraabdominellen Blutung, dann schließen Sie den Muskel und die Haut in zwei Schichten mit 4-0 Vicryl. Geflochtene Naht (Vicryl) diente zur Schließung der Haut, aber Monofilament wird bevorzugt, um die Wahrscheinlichkeit einer Infektion zu verringern. Hinweis: Schließen Sie Faszie durch kontinuierliche Naht von Xiphoid bis Schambein und die Haut durch kontinuierliche Naht vom Schambein zum Xiphoid.</li>
	<li>Narkose nach dem Schließen des Schnittes zu stoppen.</li>
</ol>4. postoperative Behandlung und Nachsorge
<ol><li>Gerade nach der Operation, kneifen die Rückenhaut der Maus und Spritzen Buprenex (0,1 mg/kg) und Cefazolin (100 mg/kg) subkutan, gefolgt von Buprenex Injektion alle 12 h für 3 Tage und Cefazolin alle 24 h für 3 Tage bzw.11,12 ,13. Beachten Sie die erste Dosis Schmerzmittel kann präoperativ gegeben werden, zur Stimulation der Schmerz-Rezeptoren zu verhindern. Cefazolin und andere perioperative Antibiotika sind nur für Immunsystem unterdrückt Tiere, wie Sie in Transplantation Studien notwendig. Hinweis: Wenn die Operation erfolgreich durchgeführt wird, die Maus in der Regel erholt sich innerhalb von 30 min. Aktivität der Mäuse werden fast identisch mit dem präoperativen Zustand.</li>
	<li>Überprüfen Sie die Mäuse täglich für alle Zeichen der Bedrängnisses.<ol>
<li>Die Mäuse durch zervikale Dislokation unter Vollnarkose für die Beschaffung von Leber und anderen Gewebeproben zu definierten Zeitpunkten (d. h., 7, 14, 21 Tage) nach pBDL zu opfern.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
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Die Autoren haben keine Angaben.

Obwohl cBDL die häufigste experimentelle Technik für obstruktive Cholestase ist, kann es mehrere Herausforderungen bei Nagetieren präsentieren. Abhängig von der Anzahl der postoperativen Tage benötigt, um einen Endpunkt zu erreichen können die Tiere erhebliche Morbidität und Mortalität mit fortschreitender Zeit erleben. Der Grad der Gewebeverletzung und biliären Nekrose wird weiter verschärft, bei der Arbeit mit einigen transgenen Mausmodellen der Lebererkrankung, die abnorme Leberparenchym und Funktion zu Stud...

Chirurgische Modelle der akuten Leberschädigung und Reparatur, wie teilweise Hepatektomie oder Gallengang Ligatur (cBDL), wurden seit Jahrzehnten bei Nagetieren zur Leberregeneration und Pathobiologie1,2zu studieren. In cBDL ist der Hauptgallengang (die alle Galle in der Leber produziert Kanalisation) ligiert, was obstruktive Cholestase, Entzündung und Fibrose in den ersten 2-3 Wochen nach der Operation, mit eventuellen Progression zur Leberzirrhose3. Gallengang Proliferation, Transdifferenzierung und Induktion von resident Leber Vorläuferzellen sind auch Funktionen von cBDL4,5. Obwohl cBDL spezifische Mechanismen der obstruktiven Cholangiopathy die gut-gekennzeichneten mit reproduzierbaren Ergebnissen in Wildtyp Mäusen und in dieser Stämme mit normalen Leber6,7,8 verdeutlicht, die Verfahren kann in einigen transgenen Mausmodellen von Lebererkrankungen, erfordern mehr Tiere als auf Grund der höheren Morbidität und Mortalität der biliären Obstruktion im Laufe der Zeit zu erwarten technisch anspruchsvoll sein. Diese Technik ist auch vorteilhaft für das Studium transgener Mäuse mit zugrunde liegenden Leber-Krankheit, die den Stress des längere Zeit Kurs Experimente nach cBDL sonst nicht tolerieren könnten.
pBDL bieten eine sinnvolle Alternative zu helfen, diese Herausforderungen zu überwinden. Erste pBDL Studien in Wildtyp Mäusen mit dem Ziel, lokal handelnde und systemische Mediatoren der Entzündung9zu unterscheiden. In pBDL die wichtigsten biliären Zusammenfluss der rechten und linken hepatischen Gallenwege über den Gallengang wird sorgfältig auf die Hilum visualisiert und nur die linken hepatischen Gallenwege ist um eine lokalisierte obstruktive Cholestase generieren ligiert. pBDL bietet mehrere Vorteile, cBDL. In pBDL dient der unligated Rechte Lappen als identisch übereinstimmenden interne Kontrolle für die aufgespaltenen linke Lappen, die gleichen systemische Effekte, wie Ernährungszustand oder zirkulierenden Faktoren ausgesetzt. Obwohl systemische Pro-inflammatorischen Mediatoren anwesend waren, Osawa Et Al. beobachtet weniger Fibrose und Nekrose in der unligated Lappen, aber erhöhte Entzündungszellen und transformierende Wachstumsfaktor β Ausdruck in der aufgespaltenen Lappen-9.
In jüngerer Zeit, umdefiniert pBDL, um Leber parenchymal einbehaltene Galle10zu untersuchen. Mithilfe der gleichen Tier für interne Kontrolle (unligated "Schein") und Versuchsgruppen halbiert pBDL effektiv die Anzahl der Tiere pro Experiment, welches wiederum kostengünstiger ist. Die Mäuse vertragen die Auswirkungen der pBDL viel besser, so dass der ideale Zeitpunkt Kurs experimentieren (≥2 Wochen) in der aufgespaltenen Lappen erreicht werden können. Vor allem pBDL direkte intrahepatischen Auswirkungen der obstruktiven Cholestase unterscheiden kann und Galle Komponenten in der aufgespaltenen Lappen, im Vergleich zu der unligated Kontrolle Lappen beibehalten. Insgesamt ist die pBDL eine attraktive Methode, Lappen-spezifische Effekte der lokalisierten Cholestase in der Leber zu studieren.

<table><tbody><tr><td>Microscope-Leica Wild M650, 6&amp;ndash;40&amp;times; magnification</td><td>Leica Microsystems</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Tec 3 isoflurane funnel fill vaporizer</td><td>General Anesthetic Services</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Stevens Tenotomy Scissors</td><td>Accurate Surgical &amp;amp; Scientific Instruments Corporation</td><td>ASSI.9193</td><td></td></tr><tr><td>Adson Forceps</td><td>Fine science tools</td><td>11006-12</td><td></td></tr><tr><td>Mosquito classic delicate hemostatic forceps</td><td>Codman</td><td>30-4472</td><td></td></tr><tr><td>Micro-retractor</td><td>Murdock; Roboz Surgical Instrument</td><td>RS-6550</td><td></td></tr><tr><td>Nonwoven gauze sponges</td><td>Fisherband</td><td>870-PC-DBL</td><td></td></tr><tr><td>Puritan 6&amp;rdquo; Small Cotton Swab w/Wooden Handle</td><td>Puritan Medical Products Company</td><td>868-WCS</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS Forceps - Standard Tips/Straight/Inox/13.5cm</td><td>Fine science tools</td><td>11203-23</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS Forceps - Standard Tips/Angled 45&amp;deg;/Inox/13.5cm</td><td>Fine science tools</td><td>11203-25</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 3mm Cutting Edge</td><td>Fine science tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Microneedle holder</td><td>Aesculap Surgical Instruments</td><td>FD231R</td><td></td></tr><tr><td>Micro AROSuture, sterile 10-0 nylon suture, 70 &amp;micro;m, TAP points</td><td>AROSurgical Instruments Corporation</td><td>T4A10N07</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J662H</td><td></td></tr><tr><td>5-ml Syringe</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Falcon tissue culture dish, 60 &amp;times; 15 mm</td><td>Corning</td><td>353002</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane, United States Pharmacopeia (USP) liquid for inhalation, 250 ml</td><td>Piramal Healthcare</td><td>NDC 66794-017-25</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex injectable (buprenorphine hydrochloride)</td><td>Reckitt Benckiser Pharmaceuticals</td><td>NDC 12496-0757-1</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolin for injection , USP</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>NDC 63323-238-61</td><td></td></tr><tr><td>PVP scrub solution (povidone&amp;ndash;iodine 7.5%)</td><td>Medline</td><td>NDC 12496-0757-1</td><td></td></tr><tr><td>70% Ethanol</td><td>Decon Labs</td><td>2716</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate Buffered Saline Without Calcium or Magnesium</td><td>LONZA</td><td>17-516F</td><td></td></tr><tr><td>Sirius Red</td><td>Sigma</td><td>365548</td><td></td></tr><tr><td>Hematolxylin</td><td>Fisher (Richard-Allan Scientific)</td><td>22-050-111 (7211)</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Anatech (Fisher)</td><td>832 (NC9686037)</td><td></td></tr><tr><td>Formalin</td><td>Fisher</td><td>SF100-20</td><td></td></tr></tbody></table>

partial bile duct ligation in the mouse: a controlled model of localized obstructive cholestasis

Bei Nagetieren ist komplette Gallengang Ligatur (cBDL) der Hauptgallengang eine etablierte chirurgische Methode zur Untersuchung obstruktiver Cholestase und Gallengang Verbreitung. Langzeitexperimente können jedoch zu erhöhter Morbidität und Mortalität führen. In ausgewählten Mausstämme mit zugrunde liegenden Lebererkrankung können sinnvolle Vergleiche auch mit Ligatur der einer einzelnen Leberlappen, erfolgen die tierischen Verluste und Kosten reduzieren können. Hier beschreiben wir teilweise Gallengang Ligatur (pBDL) in der Maus, in der nur die linken hepatischen Gallengang ligiert ist, verursacht biliären Obstruktion in der linke Lappen aber nicht die restlichen Lappen. Mit sorgfältiger mikrochirurgische Technik können pBDL Experimente kostengünstig sein, da der unligated Lappen als interne Kontrolle, die aufgespaltenen Lappen dient, wenn Sie den gleichen Bedingungen in der selben Tier ausgesetzt. Im Gegensatz zu cBDL ist eine separate Schein betrieben Kontrollgruppe nicht notwendig. pBDL ist sehr nützlich um direkt vergleichen lokalisiert versus systemische Wirkungen von Cholestase und anderen Gewinnrücklagen Galle Komponenten. pBDL kann auch als eine neuartige Methode zu untersuchen, Mechanismen, die im Zusammenhang mit Medikamenten und Zellwanderung verwendet werden.

Für dieses typische Experiment war pBDL in dreifacher Ausfertigung PiZ transgenen Mäusen durchgeführt, die die menschliche Leber Krankheit gefunden (A1AT) Alpha1-Antitrypsin-Mangel zu rekapitulieren. Die PiZ-Maus overexpresses ein Transgen, bestehend aus mehreren genomische Fragmente von DNA, die kodierenden Bereiche des menschlichen A1AT Mutation und Förderer zusammen mit Introns und ~ 2 Kilobases der vor- und nachgelagerten flankierenden Regionen14enthal...

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Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis

Hier präsentieren wir Ihnen teilweise Gallengang Ligatur als chirurgische Modell der Leberschädigung und Regeneration bei Nagetieren.

Partielle Gallengang Ligation in der Maus: eine kontrollierte Modell der lokalisierten obstruktive Cholestase

In rodents, complete bile duct ligation (cBDL) of the common bile duct is an established surgical technique for studying obstructive cholestasis and bile ...

partial-bile-duct-ligation-mouse-controlled-model-localized

Research

JoVE Journal

Biology

15.5K Aufrufe.  Jichi Medical University. Hier präsentieren wir Ihnen teilweise Gallengang Ligatur als chirurgische Modell der Leberschädigung und Regeneration bei Nagetieren.

Serie: Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and affect the nutritional status and surgical outcomes. Study of the pathophysiological changes occurring in the liver and other organs is of importance. Various studies have been done in cholestatic rat models.
We used a reversible cholestatic rat model in our recent study looking at the role of methylprednisolone in the ischemia reperfusion injury. Various techniques for creation of a reversible cholestatic model have been described. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.
This model can be used in various studies, such as looking at the changes in nutritional, physiological, pathological, histological and immunological changes in the gastrointestinal tract. This model can also be used to see the effects of cholestasis and various therapeutic interventions on major hepatic surgeries.

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.

Erstellung von Reversible Cholestatische Rattenmodell

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

Forschung

Medizin

Determining Bile Duct Density in the Mouse Liver

Mouse is broadly used as a model organism to study biliary diseases. To evaluate the development and function of the biliary system, various techniques are used, including serum chemistry, histological analysis, and immunostaining for specific markers. Although these techniques can provide important information about the biliary system, they often do not present a full picture of bile duct (BD) developmental defects across the whole liver. This is in part due to the robust ability of the mouse liver to drain the bile even in animals with significant impairment in biliary development. Here we present a simple method to calculate the average number of BDs associated with each portal vein (PV) in sections covering all lobes of mutant/transgenic mice. In this method, livers are mounted and sectioned in a stereotypic manner to facilitate comparison among various genotypes and experimental conditions. BDs are identified via light microscopy of cytokeratin-stained cholangiocytes, and then counted and divided by the total number of PVs present in liver section. As an example, we show how this method can clearly distinguish between wild-type mice and a mouse model of Alagille syndrome. The method presented here cannot substitute for techniques that visualize the three-dimensional structure of the biliary tree. However, it offers an easy and direct way to quantitatively assess BD development and the degree of ductular reaction formation in mice.

We present a rather simple and sensitive method for accurate quantification of bile duct density in the mouse liver. This method can aid in determining the effects of genetic and environmental modifiers and the effectiveness of potential therapies in mouse models of biliary diseases.

Bestimmung der Gallengangsdichte in der Mausleber

Mouse is broadly used as a model organism to study biliary diseases. To evaluate the development and function of the biliary system, various techniques ...

Entwicklungsbiologie

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well as to excrete bilirubin and other metabolic products. In the liver, the experimental obstruction of the extrahepatic biliary system initiates a complex cascade of pathological events that leads to cholestasis and inflammation resulting in a strong fibrotic reaction originating from the periportal fields. Therefore, surgical ligation of the common bile duct has become the most commonly used model to induce obstructive cholestatic injury in rodents and to study the molecular and cellular events that underlie these pathophysiological mechanisms induced by inappropriate bile flow. In recent years, different surgical techniques have been described that either allow reconnection or reanastomosis after bile duct ligation (BDL), e.g., partial BDL, or other microsurgical methods for specific research questions. However, the most frequently used model is the complete obstruction of the common bile duct that induces a strong fibrotic response after 21 to 28 days. The mortality rate can be high due to infectious complications or technical inaccuracies. Here we provide a detailed surgical procedure for the BDL model in mice that induce a highly reproducible fibrotic response in accordance to the 3R rule for animal welfare postulated by Russel and Burch in 1959.

Disruption of bile flow results in severe inflammatory cholestatic liver injury with a characteristic time-dependent sequence of morphological alterations. Here we present a protocol for the surgical ligation of the common bile duct in mice that allows to induce a strong fibrotic response after 21 to 28 days.

Gallengang-Ligation in Mice: Induktion von Entzündungsleber-Verletzung und Fibrose von obstruktiver Cholestase

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice

Biliary atresia (BA) is a severe type of cholangitis with high mortality in children of which the etiology is still not fully understood. Viral infections may be one possible cause. The typical animal model used for studying BA is established by inoculating a neonatal mouse with a rhesus rotavirus. Silver nanoparticles have been shown to exert antibacterial and antiviral effects; their function in the BA mouse model is evaluated in this study. Currently, in BA animal experiments, the methods used to improve the symptoms of BA mice are generally symptomatic treatments given via food or other drugs. The aim of this study is to demonstrate a new method for ameliorating BA syndrome in mice by the intraperitoneal injection of silver nanoparticles and to provide detailed methods for preparing the silver nanoparticle gel formulation. This method is simple and widely applicable and can be used to research the mechanism of BA, as well as in clinical treatments. Based on the BA mouse model, when the mice exhibit jaundice, the prepared silver nanoparticle gel is injected intraperitoneally to the surface of the lower liver. The survival status is observed, and biochemical indicators and liver histopathology are examined. This method allows a more intuitive understanding of both the establishment of the BA model and novel BA treatments.

This article describes in detail a method based on silver nanoparticles for ameliorating biliary atresia syndrome in an experimental biliary atresia mouse model. A solid understanding of the reagent preparation process and the neonatal mouse injection technique will help familiarize researchers with the method used in neonatal mouse model studies.

Eine Silber Nanopartikel-Methode für bessernde biliären Atresie-Syndrom bei Mäusen

Biliary atresia (BA) is a severe type of cholangitis with high mortality in children of which the etiology is still not fully understood. Viral infections ...

Immunologie und Infektion

A Mouse Model of Chronic Liver Fibrosis for the Study of Biliary Atresia

Biliary atresia (BA) is a fatal disease involving obstructive jaundice, and it is the most common indication for liver transplantation in children. Due to the complex etiology and unknown pathogenesis, there are still no effective drug treatments. At present, the classic BA mouse model induced by rhesus rotavirus (RRV) is the most commonly used model for studying the pathogenesis of BA. This model is characterized by growth retardation, jaundice of the skin and mucosa, clay stools, and dark yellow urine. The histopathology shows severe liver inflammation and obstruction of the intrahepatic and extrahepatic bile ducts, which are similar to the symptoms of human BA. However, the livers of end-stage mice in this model lack fibrosis and cannot fully simulate the characteristics of liver fibrosis in clinical BA. The presented study developed a novel BA mouse model of chronic liver fibrosis by injecting 5-10 &#181;g of anti-Ly6G antibody four times, with gaps of 2 days after each injection. The results showed that some of the mice successfully formed chronic BA with typical fibrosis after the time lapse, meaning these mice represent a suitable animal model for the virus-induced liver fibrosis mechanistic study of BA and a platform for developing future BA treatments.

We established a mouse model of chronic liver fibrosis, which provides a suitable animal model for the virus-induced liver fibrosis mechanistic study of biliary atresia (BA) and a platform for future BA treatments.

Ein Mausmodell der chronischen Leberfibrose zur Untersuchung der Gallengangsatresie

Biliary atresia (BA) is a fatal disease involving obstructive jaundice, and it is the most common indication for liver transplantation in children. Due to ...

A Mouse Model for Chronic Pancreatitis via Bile Duct TNBS Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. Several rodent models have been developed to study CP, of which the bile duct 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) infusion model replicates the features of neuropathic pain seen in CP. However, bile duct drug infusion in mice is technically challenging. This protocol demonstrates the procedure of bile duct TNBS infusion for generation of a CP mouse model. TNBS was infused into the pancreas through the ampulla of Vater in the duodenum. This protocol optimized drug volume, surgical techniques, and drug handling during the procedure. TNBS-treated mice showed features of CP as reflected by bodyweight and pancreas weight reductions, changes in pain-associated behaviors, and abnormal pancreatic morphology. With these improvements, mortality associated with TNBS injection was minimal. This procedure is not only critical in generating pancreatic disease models but is also useful in local pancreatic drug delivery.

Chronic pancreatitis (CP) is a disease characterized by inflammation and fibrosis of the pancreas, often associated with intractable abdominal pain. This article focuses on refining the technique to generate a mouse model of CP via bile duct infusion with 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS).

Ein Mausmodell für chronische Pankreatitis mittels Gallengangs-TNBS-Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. ...

Extrahepatic Bile Duct and Gall Bladder Dissection in Nine-Day-Old Mouse Neonates

The dissection of murine neonatal bile ducts has been described as difficult. The main aim of the described standard operating procedure is the isolation of the extrahepatic bile duct (EBD) in mouse neonates without damaging the bile duct during preparation. Because of its exceptionally close preparation compared to the cholangiocytes cell line and harvesting of the entire extrahepatic bile duct system (EBDS), the described approach is extremely useful in researching animal models of newborn bile duct disorders, such as biliary atresia. After euthanasia, the peritoneal cavity was accessed, and the bile duct system, duodenum, and liver were extracted with the unique En-bloc-Resection (EbR). The extracted sample is placed on a foam mat, and the EBD is dissected from contaminating cells atraumatically without necessary touch. The dissection of the entire EBDS is a significant advantage of this method. Caution must be taken due to the small size and amount of bile duct tissue. Using the described technique, there is no damage to the cholangiocytes. Further, the purity of the technique is reproducible (n = 10). Therefore, optimally comparable samples can be harvested. Furthermore, no bile duct tissue is harmed, because any contact with the bile duct system can be avoided during preparation, leaving the bile fluid inside the gall bladder. Most importantly, while performing the final gall bladder and bile duct dissection, atraumatic microinstruments were used only slightly lateral of the bile duct without squeezing it. This is the key to a clean and intact sample, and essential for further histological investigation or the isolation of cholangiocytes. To summarize, the described innovative dissection technique enables especially inexperienced operators with the necessary equipment to isolate the EBDS as cleanly as possible.

For the observation of murine neonatal bile duct disorders, an intact bile duct and efficient preparation are required. Therefore, a new approach for isolating the entire extrahepatic bile duct system in murine neonates was successfully developed while maintaining the integrity of the bile duct.

Extrahepatische Gallengangs- und Gallenblasendissektion bei neun Tage alten Maus-Neugeborenen

The dissection of murine neonatal bile ducts has been described as difficult. The main aim of the described standard operating procedure is the isolation ...

<meta charset="utf8"></head><body>Untersuchung der Leberregeneration von ALLPS in Tiermodellen für die stufenweise Hepatektomie

A Mouse Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy Procedure Aided by Microscopy

Hepatectomy is widely regarded as the primary treatment for hepatic malignancies; yet, postoperative liver failure remains a major cause of perioperative mortality, severely impacting patient outcomes. In a robust hepatic environment, the future liver remnant (FLR) must exceed 25%, and in cases of cirrhosis, this requirement increases to over 40%. The inadequacy of FLR is currently a major obstacle in the progression of hepatic surgery.
Traditional methods to enhance FLR hypertrophy mainly focus on portal vein embolization (PVE), but its effectiveness is considerably limited. In recent years, there have been numerous reports on a novel biphasic hepatectomy method involving hepatic partitioning and portal vein ligation, known as associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy (ALPPS). ALPPS surpasses PVE in efficiently and considerably inducing FLR hypertrophy. However, the detailed mechanisms driving ALPPS-facilitated hepatic regeneration are not fully understood. Thus, replicating ALPPS in animal models is crucial to thoroughly investigate the molecular mechanisms of hepatic regeneration, offering valuable theoretical and practical insights.

<meta charset="utf8"></head><body>Autor im Rampenlicht: Förderung der Leberregenerationsforschung durch ALPPS-Mausmodell

Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) has been shown to result in remarkable liver regeneration after several weeks post first-stage surgery. Animal models that have undergone ALPPS have been developed to explore potential liver regeneration ability and achieve favorable clinical outcomes.

Ein Mausmodell der zugehörigen Leberpartition und der Pfortaderligatur für ein gestuftes Hepatektomieverfahren mit Hilfe der Mikroskopie

Hepatectomy is widely regarded as the primary treatment for hepatic malignancies; yet, postoperative liver failure remains a major cause of perioperative ...

Partielle Gallengang Ligation in der Maus: eine kontrollierte Modell der lokalisierten obstruktive Cholestase

Zusammenfassung

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Extrahepatische Gallengangs- und Gallenblasendissektion bei neun Tage alten Maus-Neugeborenen

Ein Mausmodell der zugehörigen Leberpartition und der Pfortaderligatur für ein gestuftes Hepatektomieverfahren mit Hilfe der Mikroskopie

Ein Mausmodell der zugehörigen Leberpartition und der Pfortaderligatur für ein gestuftes Hepatektomieverfahren mit Hilfe der Mikroskopie

Ein Mausmodell der zugehörigen Leberpartition und der Pfortaderligatur für ein gestuftes Hepatektomieverfahren mit Hilfe der Mikroskopie