Dieses Protokoll ermöglicht es Forschern, unterschiedliche Fraktionen einer Zelle ohne den Einsatz von spezialischen Geräten, teuren Reagenzien oder komplexen Techniken zu erhalten. Der Hauptvorteil dieses Protokolls ist die Einfachheit der Techniken, die es veränderbar und einfach durchzuführen machen. Demonstrieren das Verfahren werden Matt Deragon, Rob Haluska und Alexa Hodges.Drei Absolventen aus meinem Labor. Um mit der Zentrifugieren der vorbereiteten Zellsuspension zu beginnen, um ein Pellet zu erzeugen. Entfernen Sie den Überstand und hängen Sie das Pellet bei Raumtemperatur PBS wieder auf. Zentrifugieren Sie die Zellsuspension bei 400 xg für zehn Minuten. Entfernen Sie dann den Überstand und hängen Sie das Zellpellet in eiskaltem Puffer wieder auf. Puffer Vorbereiten Eine Lösung gemäß dem Textprotokoll. Zentrifugieren Sie die Zellsuspension bei 400 xg für zehn Minuten und entfernen Sie den Überstand. Das Pellet in Puffer Eine Lösung auf eine Endkonzentration von 200 Millionen Zellen pro ml und Pipette sanft auflösen, um klumpenweise aufzubrechen. Nach dieser Inkubation wird die Zellsuspension an einem Ende über Endrotator bei 4