Die Autoren danken Herrn Pascal Lejeune für seine technische Unterstützung bei allen Verfahren.

Das vorgestellte Protokoll wird für Stuten verwendet, die im Pferdekrankenhaus vorgestellt werden, und folgt den institutionellen Tierpflegerichtlinien.
HINWEIS: Führen Sie eine Photoablation der Endometriumzysten vor dem Anestrus durch: Hitzen, die Ende Juli oder August beobachtet werden, scheinen daher am zuverlässigsten zu sein. Führen Sie dieses Verfahren nicht zu spät in der Brutzeit durch, da es die Anzahl der zur Behandlung einer potenziellen Endometritis verfügbaren Östrusse begrenzen kann.
1. Während des vorhergehenden Östrus
<ol><li>Führen Sie eine vollständige Zucht-Soliditätsuntersuchung der Stute durch, einschließlich einer Endometriumbiopsie1 (hier nicht beschrieben), um sicherzustellen, dass die Stute nach dem Eingriff möglicherweise schwanger werden kann.</li>
	<li>Im Falle einer schlechten Endometriumbiopsie-Staging nach Kenneys Klassifikation1, geben Sie dem Embryotransfer oder intrazytoplasmatischen Spermieninjektionsprogramm (ICSI) den Vorzug gegenüber der Photoabalation von Endometriumzysten.</li>
</ol>2. Während des vorhergehenden Diestrus
<ol><li>Sobald das Rektum leer ist, zählen, messen und kartieren Sie Endometriumzysten der Stute in der Gebärmutter mit transktaler Sonographie, die durch rektale Palpation mit einer linearen 7,5- oder 5-MHz-Rektalsonde und Bremssätteln auf dem Bildschirm geführt wird (Abbildung 3) in einem Streitbestand.</li>
	<li>Verabreichen Sie 250 μg Cloprostenol intramuskulär, um Östrus innerhalb von 2 oder 3 Tagen nach dem Tag 6\u20127 nach dem Eisprung zu induzieren.</li>
	<li>Führen Sie täglich eine gemeinsame Routine-Sonographie und Zervixpalpation durch, um Östruszeichen zu beobachten, einschließlich signifikanter Endometriumödeme, Antralfollikel von 35 mm und erweichtem und geöffnetem Gebärmutterhals.</li>
</ol>3. Vorbereitung, wenn die Stute in Hitze ist
<ol><li>Beschränken Sie den Zugang zum Operationssaal auf Personen, die eine Augenschutzbrille tragen.</li>
	<li>Nach der Entleerung des Rektums den Schwanz einwickeln und die Vulva aseptisch mit Jod-Povidon reinigen.</li>
	<li>Um eine einfache Manipulation und den Komfort der Stute zu gewährleisten, verabreichen Sie Detomidin (10 μg/kg) und Butorphanol (0,1 mg/kg) intravenös in der Vena jugularis mit einer 21 G Nadel.</li>
	<li>Installieren Sie pro Vagina den Embryo-Entnahmekatheter durch den Gebärmutterhals und insuffieren Sie den Ballon mit 40 ml Luft.</li>
	<li>Die Gebärmutter mit 1,5 l steriler Kochsalzlösung (0,9% NaCl) infundieren, um die Gebärmutter aufzublasen.</li>
	<li>Entleeren Sie den Ballon und entfernen Sie den Katheter.</li>
	<li>Führen Sie das Endoskop aseptisch durch den Gebärmutterhals in einer sterilen Hülse.</li>
</ol>4. Technik
<ol><li>Verbinden Sie die 600 μm Quarzfaser mit einem Diodenlaser, der bei 980 nm arbeitet. Stellen Sie die Leistung im dauerbetriebenen Modus auf 20\u201225 W ein.</li>
	<li>Die flexible Quarzfaser wird über den Biopsiekanal eines Videoendoskops mit einem Durchmesser von 10 mm geleitet, bis 3\u20124 cm freie Faser auf dem Bildschirm identifiziert werden können. Mindestens 10 mm vom Ende der Faser sollten sichtbar sein.</li>
	<li>Aktivieren Sie den Laser, um die Zyste ideal an ihrer Spitze zu punktieren: Ein spezielles Pedal ist auf dem Gerät verfügbar, um die Hände frei zu halten. In einigen Fällen sind mehrere Punktionen an verschiedenen Stellen notwendig, um eine vollständige Entleerung der Zyste zu erreichen. Die zystische Flüssigkeit wird passiv in die Gebärmutter abgelassen.</li>
	<li>Nachdem die Zystenschleimhaut um die Faser kollabiert ist, setzen Sie den Laser ein, bis die Membran schrumpft.</li>
	<li>Führen Sie während des Eingriffs so oft wie nötig eine transrektale Sonographie der Gebärmutter durch, um zu bestätigen, dass Endometriumzysten verschwunden sind.</li>
</ol>5. Postoperative Behandlungen
<ol><li>Allgemeine Antibiotikabehandlung: 22.000 UI / kg Penicillin-Procain-Suspension, intramuskulär, zweimal täglich, für 3 Tage.</li>
	<li>Führen Sie direkt nach dem Eingriff eine Gebärmutterspülung wie oben beschrieben durch (siehe Schritte 3.4-3.6).<ol>
<li>Sammeln Sie die in die Gebärmutter infundierte Flüssigkeit vor dem endoskopischen Eingriff durch einen sterilen Manschettenkatheter.</li>
		<li>Spülen Sie die Gebärmutter mit aufeinanderfolgenden Instillationen von 1 L steriler isotonischer Lösung (0,9% NaCl), bis eine klare Flüssigkeit gesammelt wird.</li>
		<li>Am Ende des Verfahrens 20 IE Oxytocin intravenös verabreichen.</li>
		<li>Führen Sie am Tag danach eine transrektale Ultraschallaufnahme der Gebärmutterstute durch: Intraluminale freie Flüssigkeit wird häufig beobachtet (siehe Schritt 2.1).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Solange freie intralumine Flüssigkeit durch transrektale Sonographie und bis zum Ende der Hitze beobachtet wird, führen Sie täglich Uterusspülungen mit dem oben beschriebenen Verfahren durch (Schritte 3.4-3.6). Manchmal wird serumartige, klare und gelb gefärbte Flüssigkeit für mehrere Tage gesammelt. HINWEIS: Wiederholte intramuskuläre Injektionen von Oxytocin (20 IE) alle 4 h oder weniger, wenn sich die Stute im Östrus befindet, kann eine Flüssigkeitsansammlung vermeiden und das Risiko einer bakteriellen Kontamination in der Gebärmutter verringern.</li>
	<li>Führen Sie während des folgenden Diestrus eine transktale Uterussonographie durch, um das Verschwinden von Endometriumzysten und das Fehlen von intraluminaler freier Flüssigkeit zu bestätigen. HINWEIS: Wenn freie intraluminale Flüssigkeit beobachtet wird, wird eine Prostaglandin-Injektion empfohlen, um einen neuen Östrus zu induzieren, eine eventuelle nachfolgende Endometritis zu diagnostizieren und zu behandeln.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Kenney, R. M., Ganjam, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selected+pathological+changes+of+the+mare+uterus+and+ovary.">Selected pathological changes of the mare uterus and ovary.</a> Journal of Reproduction and Fertility. (23), 335-339 (1975).</li><li>Bracher, V., Mathias, S., Allen, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Videoendoscopic+evaluation+of+the+mare's+uterus:+II.+Findings+in+subfertile+mares.">Videoendoscopic evaluation of the mare's uterus: II. Findings in subfertile mares.</a> Equine Veterinary Journal. 24 (4), 279-284 (1992).</li><li>Kaspar, B., Kahn, W., Laging, C., Leidl, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometrial+cysts+in+the+mare.+1.+Post-mortem+studies:+occurrence+and+morphology.">Endometrial cysts in the mare. 1. Post-mortem studies: occurrence and morphology.</a> Tier&#228;rztliche Praxis. 15 (2), 161-166 (1987).</li><li>Leidl, W., Kaspar, B., Kahn, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometrial+cysts+in+the+mare.+2.+Clinical+studies:+occurrence+and+significance.">Endometrial cysts in the mare. 2. Clinical studies: occurrence and significance.</a> Tier&#228;rztliche Praxis. 15 (3), 281-289 (1987).</li><li>Mather, E. C., Refsal, K. R., Gustafsson, B. K., Seguin, B. E., Whitmore, H. 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S., Zent, W., Holder, R., Asbury, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+as+an+adjunct+to+pregnancy+assessments+in+the+mare.">Ultrasonography as an adjunct to pregnancy assessments in the mare.</a> Journal of the American Veterinary Medical Association. 184 (3), 328-334 (1984).</li><li>LeBlanc, M., Mc Kinnon, A. O., Mc Kinnon, A. O., Squires, E. L., Vaala, W. E., Varner, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Equine Reproduction Vol. 2. , 2620-2642 (2011).</li><li>van Ittersum, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electrosurgical+treatment+of+endometrial+cysts+in+the+mare.">The electrosurgical treatment of endometrial cysts in the mare.</a> Tijdschr Diergeneeskd. 124 (21), 630-633 (1999).</li><li>Rambags, B. P., Stout, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcervical+endoscope-guided+emptying+of+a+transmural+uterine+cyst+in+a+mare.">Transcervical endoscope-guided emptying of a transmural uterine cyst in a mare.</a> Vet Record. 156 (21), 679-682 (2005).</li><li>Blikslager, A. T., Tate, L. P., Weinstock, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neodymium:yttrium+aluminum+garnet+laser+irradiation+on+endometrium+and+on+endometrial+cysts+in+six+mares.">Effects of neodymium:yttrium aluminum garnet laser irradiation on endometrium and on endometrial cysts in six mares.</a> Veterinary Surgery. 22 (5), 351-356 (1993).</li><li>Bartmann, C. P., Stief, B., Schoon, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+injury+and+wound+healing+of+the+endometrium+subsequent+to+minimally+invasive+transendoscopic+use+of+Nd:YAG-laser-and+electrosurgery+in+horses.">Thermal injury and wound healing of the endometrium subsequent to minimally invasive transendoscopic use of Nd:YAG-laser-and electrosurgery in horses.</a> Dtsch Tierarztl Wochenschr. 110 (7), 271-280 (2003).</li><li>Conley, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+the+reproductive+endocrinology+of+the+pregnant+and+parturient+mare.">Review of the reproductive endocrinology of the pregnant and parturient mare.</a> Theriogenology. 86 (1), 355-365 (2016).</li><li>Guzeloglu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+enzymes+and+receptors+of+leukotriene+pathway+genes+in+equine+endometrium+during+the+estrous+cycle+and+early+pregnancy.">Expression of enzymes and receptors of leukotriene pathway genes in equine endometrium during the estrous cycle and early pregnancy.</a> Theriogenology. 80 (2), 145-152 (2013).</li><li>Senger, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pathways to pregnancy and parturition, 3rd edn. , (2015).</li></ol>

Alle Autoren sind voll an der Equine Clinic der Universität Lüttich beschäftigt und haben keine Interessenkonflikte mit einem Unternehmen, das eines der oben genannten Produkte handelt.

Hysteroskopie und Laser-Photoablation von Endometriumzysten ist ein einfaches Verfahren, um große intraluminale Zysten in der Stute zu reduzieren, wie zuvor vorgeschlagen14. Technisch wird diese Methode verbessert, wenn sie an einer Stute in Östrus durchgeführt wird. Das Aufblasen der Gebärmutter mit steriler Kochsalzlösung verbesserte die Sichtbarkeit im Vergleich zur Luftfüllung und kontinuierlichen Aspiration während des Verfahrens.  Kleine intraparietale Zysten (<10 mm) sind schwierige...

Endometriumzysten bei Stuten wurden in den siebziger Jahren von Kenney1histopathologisch beschrieben. In den späten achtziger Jahren führte die Verwendung von Hysteroskopie und Ultraschall zu ihrer klinischen Beschreibung und half, ihre Folgen für die Fruchtbarkeit zu verstehen2,3,4,5.
In den frühen Stadien wurden Endometriumzysten mit einer Degeneration des Endometriums in Verbindung gebracht, die jetzt Endometrosis1,3,4,6,7,8 genannt wird, und es wird derzeit akzeptiert, dass kleine (<1 cm) Zysten mit Endometriumdrüsenfibrose zusammenhängen, wenn größere Zysten mit lymphatischer Dilatation zusammenhängen6 . Diese großen Zysten stören am ehesten die Migration von Pferdeembryonen zwischen Tag 6,5 und Tag 17, wodurch die Fruchtbarkeit verringert wird, indem sie die mütterliche Erkennung beeinträchtigen1,3,4,6,8. Endometriumzysten können auch die frühe Schwangerschaftsdiagnose beeinträchtigen, insbesondere wenn sie rund sind und eine ähnliche Größe wie ein embryonales Vesikel3,4,6,9 haben (siehe Abbildung 1). So können sie möglicherweise das Intervall zwischen zwei Inseminationen erhöhen, indem sie die erste Embryo-Sonographie und die Zwillingsstationsbeurteilung verzögern (siehe Abbildung 2). Endometriumzysten können auch mechanisch die Flüssigkeitsansammlung während der Uterusspülung stören, die zur Behandlung von Endometritis oder zur Entnahme des Embryos durchgeführt wird. Folglich haben Endometriumzysten Auswirkungen auf die Fruchtbarkeit der beobachteten Stute, mit möglichen wirtschaftlichen Folgen in Zuchtbetrieben.
Neben Versuchen, die zugrunde liegende Endometrosis10zu behandeln, wurden endoskopisch geführte fokale Behandlungen von Zysten vorgeschlagen. Elektrochirurgische Kauterisation wurde beschrieben, aber Hitzeeinwirkung könnte das Endometrium um die Zyste11verletzen . Die Aspiration der Zyste ist nur dann effizient, wenn die sezernierende Struktur zum Zeitpunkt der Punktion nicht mehr aktiv ist12. Die Laserbestrahlung mit einem 980 nm Diodenlaser mit einer Kontaktfaser scheint kleinere nachfolgende Endometriumnarben zu zeigen6,13. Die Verbesserung von Lasergeräten und -verfahren6 ermöglicht es uns nun, diese sichere und effiziente Technik in der klinischen Praxis von Pferden vorzuschlagen. Stutenbesitzer müssen jedoch über die Grenzen dieser Option informiert werden. Die Photoablation der Zysten erhöht die Embryonenerkennung bei einigen Stuten, wird in einigen Fällen die Schwangerschaftsdiagnose vorantreiben und könnte die negative mechanische Wirkung von Endometriumzysten auf die Uterusspülung zur Behandlung von Endometritis oder zur Sammlung von Embryonen begrenzen. Es wird jedoch niemals die begleitende zugrunde liegende Endometriose oder Endometritis behandeln.
Dieser Bericht zielt darauf ab, ein effizientes Verfahren zur Durchführung einer hysteroskopisch geführten Diodenlaserzystenablation bei Stuten zu beschreiben. Vorbereitung und Verfahren werden für eine klinische Anwendung praktisch beschrieben.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:664px;" width="663">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:214px;">Butorphanol</td>
			<td style="width:121px;">Animedica</td>
			<td style="width:161px;">Morphasol 10 mg/mL</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:214px;">Detomidine</td>
			<td style="width:121px;">Dechra</td>
			<td style="width:161px;">Domidine 10 mg/mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:214px;">Endoscope</td>
			<td style="width:121px;">Olympus</td>
			<td style="width:161px;">Vet 170-10 SN2012729</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:214px;">Endoscope Vid&#233;o Tower</td>
			<td style="width:121px;">Olympus</td>
			<td style="width:161px;">CLE-E &#38; CV-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:214px;">Laser device</td>
			<td style="width:121px;">Wuhan Giga Optronics</td>
			<td style="width:161px;">Velas II-60B GA19-V3186</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:214px;">NaCl 0.9%</td>
			<td style="width:121px;">Baxter</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:214px;">P&#233;nicilline-proca&#239;ne</td>
			<td style="width:121px;">Kela</td>
			<td style="width:161px;">PENI-Kel 300.00 UI/ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:214px;">Ultrasonography</td>
			<td style="width:121px;">Aloka</td>
			<td style="width:161px;">Aloka 500 &#38; 5mHz transrectal probe</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endoscopy guided photoablation of endometrial cysts using a 980 nm laser with a contact fiber in mares

Bei Stuten sind Endometriumzysten mit Endometriose assoziiert und können zu mütterlichem Erkennungsversagen führen oder Schwangerschaftsdiagnosen beeinträchtigen und verzögern. Historische Behandlungen waren invasiv und hatten nachteilige Auswirkungen auf das Endometrium. Hysteroskopisch geführte Lasertherapie ist einfach und effektiv für die Endometriumzystenresektion, ohne schädliche Auswirkungen auf das Endometrium.
Ein 110 cm langes und 1,0 cm breites Endoskop wird nach der Vulvareinigung durch den offenen Gebärmutterhals einer östrous stute steril in die Gebärmutter eingeführt. Der Uterus wird langsam mit weniger als 1 L physiologischer Lösung infundiert und die Laserfaser wird in den Biopsiekanal des Endoskops eingeführt. Zysten werden dann mit dem 980 nm Diodenlaser mit einer Kontaktfaser auf 20\u20122 5W im kontinuierlichen Modus kauterisiert. Jede Zyste wird punktiert, bis die Zyste vollständig entleert und die Zystenwand um die Faser geschrumpft ist. Uterusspülungen mit steriler Kochsalzlösung werden direkt nach der Operation durchgeführt und für ein oder zwei Tage als entzündungsfreie Flüssigkeit beobachtet werden.
Dieses Verfahren ist einfach und schnell durchzuführen, ohne offensichtliche schädliche Auswirkungen. Die Zystenresektion erleichtert die Ultraschall-Schwangerschaftsdiagnose und könnte in einigen Fällen die ordnungsgemäße Embryomigration in den Uterushörnern zwischen Tag 6,5 und 17 wiederherstellen. Diese Behandlung verbessert jedoch nicht die zugrunde liegenden histologischen Läsionen im Zusammenhang mit Endometriose. Diese Überlegungen sollten dem Züchter vor diesem Verfahren klar zum Ausdruck gebracht werden.

Operationen wurden an Stuten mit Zysten mit Durchmessern über 15 mm durchgeführt. Wenn jedoch auch andere kleinere Zysten vorhanden waren, wurde eine Photoablation der anderen Zysten versucht. Im Allgemeinen befanden sich diese großen Zysten an der Verzweigung oder der Basis der Hörner. Einige von ihnen waren jedoch im Körper der Gebärmutter vorhanden und wurden gleich behandelt.
Nach unserer Erfahrung sind intraluminale Zysten mit dem Endoskop sehr einfach zu lokalisieren. Darüber hina...

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Endoscopy Guided Photoablation of Endometrial Cysts using a 980 nm Laser with a Contact Fiber in Mares

Ziel dieses Berichts ist es, die Photoablation von Endometriumzysten in der Stute mit einem endoskopischen Lasergerät zu beschreiben und das Interesse und die Grenzen dieses neuen Ansatzes zur Bewältigung von Problemen mit niedriger Fruchtbarkeit zu diskutieren.

Endoskopiegeführte Photoablation von Endometriumzysten mit einem 980-nm-Laser mit einer Kontaktfaser in Stuten

In mares, endometrial cysts are associated with endometriosis and can cause maternal recognition failure or compromise and delay pregnancy diagnoses. ...

endoscopy-guided-photoablation-endometrial-cysts-using-980-nm-laser

Research

JoVE Journal

Medicine

4.2K Aufrufe.  Liège University. Ziel dieses Berichts ist es, die Photoablation von Endometriumzysten in der Stute mit einem endoskopischen Lasergerät zu beschreiben und das Interesse und die Grenzen dieses neuen Ansatzes zur Bewältigung von Problemen mit niedriger Fruchtbarkeit zu diskutieren.

Serie: Endoscopy Guided Photoablation of Endometrial Cysts using a 980 nm Laser with a Contact Fiber in Mares

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a significant obstacle to pharmaceutical treatments of brain disorders as it limits the passage of molecules from the vasculature into the brain tissue to molecules less than approximately 500 Da in size6. FUS induced BBB disruption (BBBD) is temporary and reversible4 and has an advantage over chemical means of inducing BBBD by being highly localized. FUS induced BBBD provides a means for investigating the effects of a wide range of therapeutic agents on the brain, which would not otherwise be deliverable to the tissue in sufficient concentration. While a wide range of ultrasound parameters have proven successful at disrupting the BBB2,5,7, there are several critical steps in the experimental procedure to ensure successful disruption with accurate targeting. This protocol outlines how to achieve MRI-guided FUS induced BBBD in a rat model, with a focus on the critical animal preparation and microbubble handling steps of the experiment.

Microbubble-mediated focused ultrasound disruption of the blood-brain barrier (BBB) is a promising technique for non-invasive targeted drug delivery in the brain1-3. This protocol outlines the experimental procedure for MRI-guided transcranial BBB disruption in a rat model.

MRI-geführten Störung der Blut-Hirn-Schranke mit Hilfe der transkraniellen fokussiertem Ultraschall in einem Rattenmodell

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

Forschung

Medizin

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and cardiac arrest. This elevation may result in further neurological injury, in the form of transtentorial herniation1,2,3,4, midbrain compression, neurological deficit or increased cerebral infarct2,4. Current therapies are often inadequate to control elevated ICP in the clinical setting5,6,7 . Thus there is a need for accurate methods of ICP measurement in animal models to further our understanding of the basic mechanisms and to develop new treatments for elevated ICP.
In both the clinical and experimental setting ICP cannot be estimated without direct measurement. Several methods of ICP catheter insertion currently exist. Of these the intraventricular catheter has become the clinical 'gold standard' of ICP measurement in humans8. This method involves the partial removal of skull and the instrumentation of the catheter through brain tissue. Consequently, intraventricular catheters have an infection rate of 6-11%9. For this reason, subdural and epidural cannulations have become the preferred methods in animal models of ischemic injury. 
Various ICP measurement techniques have been adapted for animal models, and of these, fluid-filled telemetry catheters10 and solid state catheters are the most frequently used11,12,13,14,15. The fluid-filled systems are prone to developing air bubbles in the line, resulting in false ICP readings. Solid state probes avoid this problem (Figure 1). An additional problem is fitting catheters under the skull or into the ventricles without causing any brain injury that might alter the experimental outcomes. Therefore, we have developed a method that places an ICP catheter contiguous with the epidural space, but avoids the need to insert it between skull and brain. 
An optic fibre pressure catheter (420LP, SAMBA Sensors, Sweden) was used to measure ICP at the epidural location because the location of the pressure sensor (at the very tip of the catheter) was found to produce a high fidelity ICP signal in this model. There are other manufacturers of similar optic fibre technologies13 that may be used with our methodology. Alternative solid state catheters, which have the pressure sensor located at the side of the catheter tip, would not be appropriate for this model as the signal would be dampened by the presence of the monitoring screw. 
Here, we present a relatively simple and accurate method to measure ICP. This method can be used across a wide range of ICP related animal models.

A novel technique to record the pressures within the skull is described. The minimally invasive method uses a fibre-optic pressure sensing system to accurately measure intracranial pressure (ICP) in anaesthetized rats without causing significant brain trauma. The technique may be used in a wide range of experimental models.

Epidurale Intrakranielle Druckmessung in Ratten mit einem LWL-Druckaufnehmer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Background 
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered advancements to decrease the occurrence this injury.&#160;The current model demonstrates reproducible lower&#160;extremity paralysis following thoracic aortic occlusion.
Methods 
Adult male C57BL6 mice were anesthetized with isoflurane. Through a cervicosternal incision the aorta was exposed. The descending thoracic aorta and left subclavian arteries were identified without entrance into pleural space. Skeletonization of these arteries was followed by immediate closure (Sham) or occlusion for 4 min (moderate ischemia) or 8 min (prolonged ischemia). The sternotomy and skin were closed and the mouse was transferred to warming bed for recovery.&#160; Following recovery, functional analysis was obtained at 12 hr intervals until 48 hr.
Results 
Mice that underwent sham surgery showed no observable hind&#160;limb deficit. Mice subjected to moderate ischemia for 4 min had minimal functional deficit at 12 hr followed by progression to complete paralysis at 48 hr. Mice subjected to prolonged ischemia had an immediate paralysis with no observable hind-limb movement at any point in the postoperative period. There was no observed intraoperative or post&#160;operative mortality.
Conclusion 
Reproducible lower extremity paralysis whether immediate or delayed can be achieved in a murine model. Additionally, by using a median sternotomy and careful dissection, high survival rates, and reproducibility can be achieved.

The lack of mechanistic understanding of spinal cord ischemia-reperfusion injury has hindered further adjuncts to prevent paraplegia following high risk aortic operations. Thus, the development of animal models is imperative. This manuscript demonstrates reproducible lower extremity paralysis following thoracic aortic occlusion in a murine model.

Reproduzierbare Paraplegie von thorakalen Aorta Occlusion in einem Mausmodell der Spinal Cord Ischämie-Reperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The molecular mechanisms leading to cyst formation in PKD remain somewhat unclear, but many genes are thought to be involved. Wnt5a is a non-canonical glycoprotein that regulates a wide range of developmental processes. Wnt5a works through the planar cell polarity (PCP) pathway that regulates oriented cell division during renal tubular cell elongation. Defects of the PCP pathway have been found to cause kidney cyst formation. Our paper describes a method for developing a zebrafish cystic kidney disease model by knockdown of the wnt5a gene with wnt5a antisense morpholino (MO) oligonucleotides. Tg(wt1b:GFP) transgenic zebrafish were used to visualize kidney structure and kidney cysts following wnt5a knockdown. Two distinct antisense MOs (AUG - and splice-site) were used and both resulted in curly tail down phenotype and cyst formation after wnt5a knockdown. Injection of mouse Wnt5a mRNA, resistant to the MOs due to a difference in primary base pair structure, rescued the abnormal phenotype, demonstrating that the phenotype was not due to &#8220;off-target&#8221; effects of the morpholino. This work supports the validity of using a zebrafish model to study wnt5a function in the kidney.

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

We describe a method of generating a possible zebrafish model of polycystic kidney disease. We used Tg(wt1b:GFP) fish to visualize kidney structure. Knockdown of wnt5a was by morpholino injection. Pronephric cyst formation after wnt5a knockdown was observed in this GFP transgenic zebrafish.

Eine mögliche Zebrafisch-Modell der Kidney Disease: Knockdown von<em&gt; Wnt5a</em&gt; Ursachen Zysten in Zebrafisch-Nieren

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The ...

Semi-automated Analysis of Mouse Skeletal Muscle Morphology and Fiber-type Composition

For years, distinctions between skeletal muscle fiber types were best visualized by myosin-ATPase staining. More recently, immunohistochemical staining of myosin heavy chain (MyHC) isoforms has emerged as a finer discriminator of fiber-type. Type I, type IIA, type IIX and type IIB fibers can now be identified with precision based on their MyHC profile; however, manual analysis of these data can be slow and down-right tedious. In this regard, rapid, accurate assessment of fiber-type composition and morphology is a very desirable tool. Here, we present a protocol for state-of-the-art immunohistochemical staining of MyHCs in frozen sections obtained from mouse hindlimb muscle in concert with a novel semi-automated algorithm that accelerates analysis of fiber-type and fiber morphology. As expected, the soleus muscle displayed staining for type I and type IIA fibers, but not for type IIX or type IIB fibers. On the other hand, the tibialis anterior muscle was composed predominantly of type IIX and type IIB fibers, a small fraction of type IIA fibers and little or no type I fibers. Several image transformations were used to generate probability maps for the purpose of measuring different aspects of fiber morphology (i.e., cross-sectional area (CSA), maximal and minimal Feret diameter). The values obtained for these parameters were then compared with manually-obtained values. No significant differences were observed between either mode of analysis with regards to CSA, maximal or minimal Feret diameter (all p &#62; 0.05), indicating the accuracy of our method. Thus, our immunostaining analysis protocol may be applied to the investigation of effects on muscle composition in many models of aging and myopathy.

Immunohistochemical staining of myosin heavy chain isoforms has emerged as the state-of-the-art discriminator of skeletal muscle fiber-type (i.e., type I, type IIA, type IIX, type IIB). Here, we present a staining protocol along with a novel semi-automated algorithm that facilitates rapid assessment of fiber-type and fiber morphology.

Semi-automatische Analyse von Maus Skelettmuskulatur Morphologie und Fasertyp Zusammensetzung

For years, distinctions between skeletal muscle fiber types were best visualized by myosin-ATPase staining. More recently, immunohistochemical staining of ...

A Mobile Outside-in Technique of Transforaminal Lumbar Endoscopy for Lumbar Disc Herniations

Percutaneous endoscopic transforaminal lumbar discectomy (PETLD) has now become a standard of care for the management of lumbar disc disease. There are two techniques for the introduction of a working cannula with respect to disc&#8212;outside-in and inside-out. The aim of this prospective study is to describe the technical aspects of a novel mobile outside-in method in dealing with different types of disc prolapse. A total of 184 consecutive patients with unilateral lower limb radiculopathy due to lumbar disc prolapse were operated on with the mobile outside-in technique of PETLD. Their clinical outcomes were evaluated based on the type of disc prolapse they had, a visual analog scale (VAS) leg pain score, the Oswestry Disability Index (ODI), and the Macnab criteria. The completeness of the decompression was documented with a postoperative magnetic resonance imaging. The mean age of the patients was 50 &#177; 16 years and the male/female ratio was 2:1. The mean follow-up was 19 &#177; 6 months. A total of 190 lumbar levels were operated on (L1&#8211;L2: n = 4, L2&#8211;L3: n = 17, L3&#8211;L4: n = 27, L4&#8211;5: n = 123, and L5&#8211;S1: n = 19). Divided into types, the patient distribution was central: n = 14, paracentral: n = 74, foraminal: n = 28, far lateral: n = 13, superior-migrated: n = 8, inferior migrated: n = 38, and high canal compromise: n = 9. The mean operative time was 35 &#177; 12 (25 - 56) min and the mean hospital stay was 1.2 &#177; 0.5 (1&#8211;3) days. The VAS score for leg pain improved from 7.5 &#177; 1 to 1.7 &#177; 0.9. The ODI improved from 70 &#177; 8.3 to 23 &#177; 5. According to the Macnab criteria, 75 patients (40.8%) had excellent results, 104 patients (56.5%) had good results, and 5 patients (2.7%) had fair results. Recurrence (including early and late) was seen in 15 out of the 190 levels that were operated on (7.89%). This article presents a novel outside-in approach that relies on a precise landing within the foramen in a mobile manner and does not solely depend upon the enlargement of the foramen. It is more versatile in application and useful in the management of all types of disc prolapse, even in severe canal compromise and high migration.

Here we present a protocol of a novel outside-in technique of transforaminal endoscopic discectomy for lumbar disc herniations. The technical aspects of the technique, the wide indications of use, and the results of the treatment in 184 patients are described in detail.

Eine Mobile Outside-in Technik der Transforaminal Lumbar Endoskopie für Lenden-Disc Bandscheibenvorfälle

Percutaneous endoscopic transforaminal lumbar discectomy (PETLD) has now become a standard of care for the management of lumbar disc disease. There are ...

Enucleation of the Prostate for the Treatment of Benign Prostatic Hyperplasia Using a 980 nm Diode Laser

In the aging male population, the occurrence of lower urinary tract symptoms (LUTS) caused by benign prostatic hyperplasia (BPH) is a common problem. Here, we introduce a new technique called 980 nm diode laser enucleation (DiLEP) to treat BPH1. Diode lasers can absorb both water and hemoglobin at the same time, so they are good for cutting and hemostasis2. The diode laser was approved by the FDA in 2007, and has been used in the treatment of BPH because of its effective cutting and hemostasis effect3. DiLEP presents several advantages over other techniques, such as TURP, HoLEP, and PVP. During the procedure, we define the boundary of a high-volume prostate and separate it into three lobes with a diode laser by burning two rings and one groove (like a Cupid&#39;s arrow). Compared to other procedures, mDiLEP has fewer intraoperative complications, a shorter learning curve, and achieves more tissue resection.

Here, we present a protocol for modified 980 nm diode laser enucleation to treat large volume benign prostatic hyperplasia.

Enukleation der Prostata zur Behandlung der gutartigen Prostatahyperplasie mit einem 980 nm Diodenlaser

In the aging male population, the occurrence of lower urinary tract symptoms (LUTS) caused by benign prostatic hyperplasia (BPH) is a common problem. ...

Evaluation of Cerebral Blood Flow Autoregulation in the Rat Using Laser Doppler Flowmetry

When investigating the body&#39;s mechanisms for regulating cerebral blood flow, a relative measurement of microcirculatory blood flow can be obtained using laser Doppler flowmetry (LDF). This paper demonstrates a closed skull preparation that allows cerebral blood flow to be assessed without penetrating the skull or installing a chamber or cerebral window. To evaluate autoregulatory mechanisms, a model of controlled blood pressure reduction via graded hemorrhage can be utilized while simultaneously employing LDF. This enables the real time tracking of the relative changes in the blood flow in response to reductions in arterial blood pressure produced by the withdrawal of circulating blood volume. This paradigm is a valuable approach to study cerebral blood flow autoregulation during reductions in arterial blood pressure and, with minor modifications in the protocol, is also valuable as an experimental model of hemorrhagic shock. In addition to evaluating autoregulatory responses, LDF can be used to monitor the cortical blood flow when investigating metabolic, myogenic, endothelial, humoral, or neural mechanisms that regulate cerebral blood flow and the impact of various experimental interventions and pathological conditions on cerebral blood flow.

This article demonstrates the use of laser Doppler flowmetry to evaluate the ability of the cerebral circulation to autoregulate its blood flow during reductions in arterial blood pressure.

Auswertung der zerebralen Blutfluss-Autoregulation in der Ratte mit Laser-Doppler-Flowmetrie

When investigating the body&#39;s mechanisms for regulating cerebral blood flow, a relative measurement of microcirculatory blood flow can be obtained ...

Fertility Sparing Procedure using Carbon Dioxide Fiber Laser Vaporization of Ovarian Endometrioma

The surgical management of endometrioma is still a matter of debate. Cystectomy, which is recognized as the standard technique, seems to be associated with a potential reduction in the ovarian reserve due to the inadvertent removal and thermal damage of healthy ovarian tissue. New ablative techniques with reduced tissue penetration depth and less thermal spread to the surrounding parenchyma may represent a viable alternative to cystectomy. For these reasons, the aim of this manuscript is to demonstrate the ablation of the endometrioma capsule using a CO2 fiber laser technique and discuss the clinical outcomes. Once the cyst has been drained and washed, a biopsy is taken. After cyst eversion, vaporization of the inner surface of the cyst is performed using a CO2 fiber laser. The technique is simple and reproducible as even young surgeons without any surgical experience were more confident in performing laser CO2 vaporization instead of cystectomy. The positive effects of CO2 technology are reported in a randomized controlled trial, where the postoperative changes in the antral follicular count (AFC) and antimullerian hormone (AMH) levels were compared between patients who had their endometrioma excised (cystectomy) and those who had undergone endometrioma vaporization with CO2 laser. The patients treated with CO2 laser showed significantly increased AFC without a reduction in serum AMH levels as compared to the cystectomy group, in which both parameters were significantly reduced. The postoperative pregnancy rate was also assessed, and comparable pregnancy rates were found after both treatments. On the contrary, patients treated with the CO2 fiber laser technique had more favorable in-vitro fertilization (IVF) outcomes compared to cystectomy.
In conclusion, the CO2 fiber laser technique may represent a viable alternative to cystectomy in the surgical treatment of endometrioma in terms of ovarian preservation, pregnancy rates, and IVF outcomes. Moreover, it has the advantage of being independent of the surgeon's skills and personal experience.

In this protocol, CO2 fiber laser technique is demonstrated for the surgical treatment of ovarian endometriosis, which represents a viable alternative in terms of fertility preservation with the major advantage of not being dependent on the surgeon's skills and personal experience.

Fruchtbarkeitsschonendes Verfahren mit Kohlendioxidfaser-Laserverdampfung des ovariellen Endometrioms

The surgical management of endometrioma is still a matter of debate. Cystectomy, which is recognized as the standard technique, seems to be associated ...

Arthroskopischer doppelter posteromedialer Zugang zur Exzision von PCL-Zysten

Arthroscopic Excision of Posterior Cruciate Ligament Cysts Using a Double Posteromedial Approach

Cruciate ligament cysts of the knee are a rare condition. Posterior cruciate ligament cysts of the knee are less common than anterior cruciate ligament cysts. In patients with asymptomatic isolated cruciate ligament cysts of the knee, conservative treatment is recommended. Symptomatic cruciate ligament cysts of the knee are mostly manifested as knee hyperflexion pain, straightening pain, knee discomfort after standing for a long time or walking for a long time, etc., which seriously affects the quality of life, surgical treatment can be performed. The surgical treatments can be divided into ultrasound-guided cyst puncture and fluid extraction procedure and arthroscopic cystectomy. Cysts are mostly lobulated with a multi-layer cyst wall, cyst fluid extraction does not remove the cyst wall completely but simply extracts cyst fluid, leading to a high recurrence rate. Arthroscopic surgery can completely remove the cyst wall with little trauma, a low recurrence rate, and fast postoperative recovery, so arthroscopic resection is the most common and preferred method of treatment. Since posterior cruciate ligament cysts mostly occur posterior to the ligament, we remove the cyst wall by adding a double posteromedial approach to the knee joint, and the cyst wall is removed under direct vision, which is simple to operate, the cyst wall is completely cleared, the trauma is small, the postoperative recovery is fast, and there is no recurrence. Here, 8 posterior cruciate ligament cysts were removed with complete postoperative symptom relief, no surgical complications, and no recurrence at 1-year follow-up.

Autor im Rampenlicht: Doppelter posteromedialer Ansatz zur Behandlung von Zysten des hinteren Kreuzbandes

We present a surgical approach to treat posterior cruciate ligament cysts by an arthroscopic double posteromedial approach.

Arthroskopische Exzision von Zysten des hinteren Kreuzbandes mit einem doppelten posteromedialen Zugang

Cruciate ligament cysts of the knee are a rare condition. Posterior cruciate ligament cysts of the knee are less common than anterior cruciate ligament ...