Ein zuverlässiges schweinisches Faszien-Hautlappenmodell für vaskularisierte Komposit-Allografts Bioengineering-Studien

Unser Protokoll beschreibt das klinische Ereignis fasziokutane Lappen bei Schweinen. Der Hauptvorteil dieser Technik ist die Zuverlässigkeit der Hautvaskularisation. Die Operationstechnik bietet ein geeignetes Werkzeug, um vaskularisierte Kompositflugzeuge in Maschinenperfusion, Tissue Engineering und Immunologie in einem großen Tiermodell zu untersuchen.

Um zu beginnen, tasten Sie den Puls der Stammarterie, der etwa drei Fingerbreiten medial von der Patella entfernt sein sollte, und markieren Sie ihn. Identifizieren und zeichnen Sie die Grenzen der Klappe. Die obere Grenze ist ein Zugang parallel zur Leistenfalte, drei Zentimeter darunter.

Und die laterale Grenze ist eine Achse von der vorderen oberen Beckenwirbelsäule zum medialen Teil der Patella. Zeichnen Sie eine ovale Klappe von 10 Zentimetern Durchmesser, zentriert auf dem Stammstiel, und enthalten in den angegebenen Klappengrenzen. Machen Sie einen acht Zentimeter großen Hautschnitt am distalen Teil des Pedikels auf dem Lappen-Wahrzeichen.

Öffnen Sie die Faszie und sezieren Sie stumpf, um die Arteria saphena und ihre beiden Venae comitantes freizulegen. Führen Sie eine doppelte Ligatur durch und trennen Sie sie in einem Bündel. Schneiden Sie die restliche Haut des Lappens mit einer Klinge ein.

Verwenden Sie Kauter, um das Unterhautgewebe und die umgebende Faszie zu öffnen. Führen Sie mit einer bipolaren Pinzette eine gründliche Hämostase durch. Um ein versehentliches Anziehen und Stören der perforierenden Gefäße zu vermeiden, befestigen Sie die Hautkomponente des Lappens mit drei null nicht resorbierbaren Nähten an der darunter liegenden Faszie.

Befreien Sie den Lappen von der Grazilis, indem Sie die Faszie vom Muskel weg sezieren. Setzen Sie die Pedikeldissektion fort, indem Sie den Stammgefäßen die Femurgefäße hinunter folgen. Führen Sie einen senkrechten Schnitt durch, der die Leistenfalte mit dem proximalen Teil des Lappens verbindet.

Machen Sie einen 12 Zentimeter großen Schnitt in der Leistenfalte. Heben Sie die Verbindungshaut ab und öffnen Sie die Unterhautschicht. Skelettieren Sie die Femurgefäße und legieren Sie sie distal zum Saphenast in zwei separaten Bündeln.

Setzen Sie die Dissektion der Femurgefäße von distal nach proximal fort, bis das Niveau des Leistenbandes erreicht ist. Trennen Sie die Oberschenkelarterie von der Vene und isolieren Sie sie mit Gummigummis. Um den zweiten Stammlappen zu ernten, wiederholen Sie den gesamten Vorgang für die kontralaterale Hinterbeine.

Injizieren Sie dem Tier fünf Minuten lang 100 Einheiten pro Kilogramm intravenöses Heparin, bevor Sie mit dem nächsten Schritt fortfahren. Legieren Sie den Oberschenkelstiel möglichst proximal zum Leistenband und trennen Sie den Lappen vom Spenderschwein. Erweitern Sie die Enden des Femurgefäßes und führen Sie einen 20-Gauge-Angiokatheter in Arterie und Vene ein.

Verwenden Sie drei Null-Seidenbänder, um den Katheter an den Gefäßen zu befestigen. Spülen Sie langsam die Arterie der fasziokutanen Lappen mit 10 Milliliter von 100 Einheiten pro Milliliter Heparinsalzlösung, bis ein deutlicher venöser Abfluss beobachtet wird. Insgesamt wurden in dieser Studie 14 saphenöse fasziokutane Lappen geerntet.

Die durchschnittliche Klappenbeschaffungszeit betrug 47 Minuten. Die mittleren Arterien- und Venendurchmesser betrugen 2,25 Millimeter bzw. 3,56 Millimeter. Schließlich betrug die mittlere Pedikellänge 10,8 Zentimeter Nach jeder Lappenernte wurde unmittelbar nach der Heparin-Kochsalzlösung eine FCF-Angiographie durch intraarterielle Injektion von 10 Millimetern Kontrastmittel durchgeführt.

Dieser Schritt ermöglichte die Beurteilung der Vaskularisation des Hautpaddels. Das Wichtigste, woran Sie sich erinnern sollten, ist, die Hautkomponente des Lappens perfekt an der darunter liegenden Faszie zu befestigen, um eine Störung der perforierenden Gefäße zu vermeiden. Diese genaue Beschreibung der zuverlässigen und reproduzierbaren Klappenbeschaffungstechnik bietet ein wertvolles Werkzeug für VCA-Bioengineering-Studien an Schweinen.