Hypertrophe Narbenbildung ist ein abnormaler Prozess der Wundheilung, der zu einer übermäßigen Bildung von Narbengewebe führt. Die Schaffung menschenähnlicher fibrotischer Modelle kann dazu beitragen, Therapien zu entwickeln, um Narbenbildung zu verhindern und die Regeneration zu fördern. In den letzten zehn Jahren haben wir gezeigt, dass die mechanische Transduktion, bei der mechanische Reize in zelluläre Reaktionen umgewandelt werden, zu einer übermäßigen Narbenbildung führt.
Wir haben mechanische Reize gehemmt und festgestellt, dass es die Heilung und Regeneration in Großtiermodellen fördert, und haben auch seine Bedeutung für die Fremdkörperreaktion auf biomedizinische Implantate identifiziert. Nach einer Verletzung bilden Mäuse weniger Narben als Menschen, da sie eine lockerere und dünnere Haut haben und die darunter liegende Muskelschicht, der Musculus panniculus carnosus, die Wunde zusammenzieht. Wir haben ein Mausmodell entwickelt, das eine menschliche mechanische Belastung auf eine heilende Wunde ausübt, um ein menschenähnliches hypertrophes Narbenmodell zu erstellen.
Unser Protokoll zeichnet sich durch seine Einfachheit, Reproduzierbarkeit und Biomimikry aus. Indem wir mechanische Spannung auf Wunden ausüben, induzieren wir zuverlässig eine menschenähnlichere hypertrophe Narbenbildung, indem wir physiologische mechanische Transduktionswege nutzen, anstatt uns auf Verbrennungs- oder chemische Verletzungsmodelle zu verlassen. Dies spiegelt zuverlässig wider, wie sich hypertrophe Narbenbildung im Körper bildet, und ist daher sehr gut übertragbar.
Insgesamt untersucht unser Labor, wie die mechanische Signalübertragung pharmakologisch gesteuert werden kann, um die Fibrose in allen Organsystemen zu reduzieren. Konkret werden wir anhand dieses Modells andere Anti-Narben-Therapien untersuchen, wie z. B. geweberegeneratives Gerüst, Wundauflagen und Steroide. Platzieren Sie zunächst die betäubte Maus auf der Bedienfläche.
Führen Sie die Mausnase zur Aufrechterhaltung der Anästhesie in die Öffnung des Nasenkegels ein. Bestätigen Sie die Tiefe der Anästhesie durch das Fehlen einer Reaktion auf ein Zehenklemmen. Injizieren Sie mit einer 21-Gauge-Nadel 0,05 Milligramm pro Kilogramm Buprenorphin subkutan in die Schulter zur postoperativen Schmerzbehandlung.
Desinfizieren Sie den Rücken der Maus mit drei abwechselnden Runden Peeling auf Jod- oder Chlorhexidinbasis und Alkoholtupfer. Machen Sie nun mit einem Skalpell einen Schnitt in voller Dicke der dorsalen Mittellinie entlang des markierten Bereichs. Schließen Sie den Schnitt mit 5-0-Nähten in einem einfachen, unterbrochenen Muster, indem Sie die Wunde halbieren.
Schneide eine Telfa-Gaze in ein drei mal einen Zentimeter großes Stück. Legen Sie das Mullstück in die Mitte eines Folienkleberverbandes und tragen Sie ihn auf den Rücken auf, wobei Sie darauf achten, dass die Gaze den Schnitt bedeckt. Lege dann einen halbierten Verband auf den Bauch und wickle ihn umlaufend, bis er auf den Rückenverband trifft.
Nachdem Sie die Wunde verbunden haben, setzen Sie die Maus in einen separaten sterilen Käfig und überwachen Sie sie, bis sie sich vollständig von der Narkose erholt hat. Vier Tage nach dem Erstellen des dorsalen Mittellinienschnitts betäuben Sie die Maus und platzieren Sie sie auf einer Arbeitsplattform. Trennen Sie den Verband mit einer Pinzette vom Bauch der Maus, indem Sie das Werkzeug von Seite zu Seite gegen die Bauchseite führen.
Lassen Sie das Werkzeug zwischen dem Wickel und der Haut, um den Verband von der Haut abzuheben. Schneide dann mit einer Schere den Verband ab. Reinigen Sie den Rücken mit einem Alkoholtupfer.
Untersuchen Sie den Schnitt auf Wunddehiszenz oder Anzeichen einer Infektion. Bestreichen Sie anschließend die Arme des hypertrophen Narben- oder HTS-Geräts leicht mit medizinischem Kleber. Ziehen Sie mit einer Hand die Haut auf dem Mäuserücken in Querrichtung leicht straff.
Platzieren Sie dann mit Hilfe der anderen Hand das HTS-Gerät auf dem Rücken und stellen Sie sicher, dass der Schnitt gleich weit von jedem Arm entfernt ist und die Haut zwischen den Armen gleichmäßig straff ist. Befestigen Sie nach dem Trocknen vier Nähte um jeden Arm des Geräts und durch die Haut und stellen Sie sicher, dass die Nadel in Richtung des Schnitts austritt. Legen Sie nun drei Hautklammern um die Arme des Geräts und befestigen Sie es an der Haut.
Legen Sie dann das Telfa-Mullstück in die Mitte eines Folienklebeverbandes und tragen Sie ihn auf den Rücken der Maus auf, wobei Sie darauf achten, dass die Gaze den Schnitt bedeckt. Lege einen halbierten Verband auf den Bauch und wickle ihn umlaufend, bis er auf den Rückenverband trifft. Am nächsten Tag entfernen Sie die Nähte mit einer Dissektionsschere aus der Wunde.
Für die erste Dehnung des HTS-Geräts stecken Sie den HTS-Geräteschlüssel in das Gerät und drehen Sie ihn, um das Gerät zu erweitern, bis die Haut straff ist, aber nicht mehr die Gefahr eines Reißens besteht. Verbinden Sie zum Schluss die Maus wie zuvor gezeigt. Die Mäuse der Stretch-Gruppe wiesen im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant breitere Narben auf, mit einer maximalen Narbenbreite von 0,99 Millimetern am postoperativen Tag neun, die an postoperativen 15 und 19 Tagen signifikant breiter blieb.
