Un nuevo enfoque de supervisión Neovascularization del injerto en la encía humana

Resumen

Este estudio presenta un protocolo para la medición de la microcirculación en mucosa oral humana por proyección de imagen contraste punto de láser. El seguimiento de la cicatrización de heridas después de Vestibuloplastia combinado con un injerto de colágeno xenogénica se presenta en un caso clínico.

Resumen

Contraste de punto de laser imaging (pone) es un nuevo método para medir la perfusión de sangre superficial en grandes áreas. Puesto que es no invasiva y evita el contacto directo con la zona de medida, es adecuado para monitorear los cambios de flujo de sangre durante la cicatrización de heridas en pacientes humanos. Vestibuloplastia es la cirugía periodontal para el vestíbulo oral, con el objetivo de restaurar la profundidad vestibular con la ampliación simultánea de la encía queratinizada. En este caso clínico especial, un colgajo de espesor dividido fue elevado en el primer premolar superior y una matriz de colágeno xenogénica fue adaptada para el lecho receptor resultante. PONE fue utilizada para supervisar el re - y neovascularización de la prótesis y la mucosa circundante por un año. Se presenta un protocolo para el ajuste correcto de la medición de la microcirculación de la mucosa oral, destacando las dificultades y posibles fallos.

El estudio de caso clínico presentado demuestra que — siguiendo el protocolo adecuado — Empeoraron es un método conveniente y confiable para el seguimiento de la microcirculación en la curación de una herida en la mucosa oral humana y da información útil en la integración del injerto.

Introducción

Monitorear los cambios a largo plazo de la microcirculación gingival humano en una situación clínica es un tema candente en cirugía oral y periodontal. Sin embargo, una evaluación fiable de la perfusión puede ser difícil. Hay sólo unos pocos métodos que no invasiva medir los cambios en la circulación sanguínea de la mucosa humana. Dos de estas emplean a laser viga^1,2,3,4, pero de una manera diferente. Flujometría doppler láser (LDF) hace uso de Doppler shift en un láser de haz de^5,6, mientras que el contraste de punto láser método (pone) la proyección de imagen se basa en el patrón de punto de la luz retrorreflejada láser para medir la velocidad de la sangre las células⁷.

LDF mide solamente en un punto único y reproducible estandarización de la posición de los sensores es una tarea deseable pero difícil. Otro problema es que la sonda de la FDL es de pequeña diámetro (1 mm²). Medición en puntos predeterminados antes de la cirugía es demasiado específico y sea ciego a los cambios circulatorios postoperatorios, edema, extracción de tejido, tejido movimiento o el injerto implantado provocar cambios significativos en la geometría del postoperatorio de las afectadas tejidos blandos. La distancia de medición de LDF es menos de 1 mm que prohíbe el uso de una férula dental con un orificio preestablecido para la sonda en caso de cambio volumétrico del tejido. PONE no requiere ninguna herramienta especial para la localización y puede medir en zonas de varios cm². Como resultado, la cicatrización puede ser seguida en todo el sitio quirúrgico. Además, Empeoraron puede mostrar la perfusión de la sangre en imágenes con códigos de color en una fracción de segundo, con una resolución de hasta 20 μm.

El dispositivo pone presentado en este documento se utiliza principalmente para aplicaciones de investigación animal donde se desea alta resolución en áreas de pequeña medida. Sin embargo, puesto que la estructura y la histología de la mucosa oral humana son diferentes de zona a zona (adjunto encía, encía marginal, mucosa vestibular), circulación de la sangre es también heterogéneo⁸. Por lo tanto, pone alta resolución tiene una gran ventaja sobre normal-resolución pone que se utiliza generalmente en las pruebas humanas.

El instrumento pone emplea un láser invisible (longitud de onda 785 nm). La viga es divergida para iluminar el área de medición, creando un patrón de moteado. Una cámara CCD de imágenes el patrón moteado en la zona iluminada. La cámara CCD utilizada en este sistema tiene un área de imagen activa de 1386 x 1034 pixeles y su resolución está entre 20 – 60 μm/píxeles dependiendo del tamaño de la zona de medición y en la configuración del software (bajo, medio, alto). Puede tomar imágenes a una velocidad de 16 fotogramas por segundo, o incluso más, hasta 100 frames por segundo, si se reduce el tamaño de la imagen. Perfusión de la sangre es calculada por el software incorporado. Analiza las variaciones en el patrón moteado y cuantifica el contraste. El flujo resultante es de color para producir una imagen de perfusión. Según nuestros resultados anteriores, pone evalúa la perfusión sanguínea de la encía con buena repetibilidad y reproducibilidad⁹. Esto implica que es una herramienta confiable para monitorear los cambios en la microcirculación de la mucosa oral no sólo en experimentos a corto plazo, sino también en estudios a largo plazo para seguir la progresión de la enfermedad o herida curación¹⁰.

En este trabajo, presentamos un informe clínico del caso para demostrar que la alta resolución espacial de Empeoraron hace posible revelar el patrón de neovascularización de un injerto de colágeno xenogénica. Además, en este caso se indica que Empeoraron, debido a su alta confiabilidad, podría detectar sensible variación individual. Esto es importante como una variación anatómica local significativa y antecedentes sistémicos diferentes entre los casos dificultan la estandarización de la intervención quirúrgica en los ensayos clínicos de la cirugía periodontal.

Protocolo

Se empleó el método reportado en un ensayo clínico que se concedió la aprobación ética del Comité Húngaro del registro sanitario y centro de formación (número de autorización: 034310/2014/OTIG).

1. pone Setup

1. Encienda la computadora y cualquier periférico.
2. Encienda el instrumento pone a utilizar con el interruptor en la parte trasera.
3. Que el instrumento se caliente durante al menos 5 minutos. El instrumento está listo para la medición cuando ambos LEDs en el panel posterior han dejado de parpadear.
4. Inicie el software haciendo doble clic en el icono en el escritorio o mediante el menú de inicio.
5. Espere hasta que el amarillo y el LED verde del panel posterior ha dejado de parpadear, que indica que el láser está caliente e inicialización haya finalizado.
   Nota: Al iniciar el sistema, uno de vez en cuando se solicitará para llevar a cabo el procedimiento de verificación para el sistema.

2. el sistema verificación

1. Utilice el cuadro de calibración suministrado. Retire la tapa de la caja de calibración y agitarlo para evitar la sedimentación de la suspensión coloidal.
2. Deja la tapa de 30 s para evitar burbujas.
3. Colocar la tapa en la caja de calibración.
4. Haga clic en avanzada | Verificación | Verificar el instrumento.
5. Seleccione rutina verificación | Siguiente.
6. Gire la cabeza 90 º, sujete la caja de calibración usando los imanes integrados y haga clic en siguiente.
7. Introduzca la temperatura en el cuadro de texto, seleccione ° C y haga clic en Inicio.
8. Espere mientras el asistente finaliza el procedimiento de verificación.
9. Después de un procedimiento de verificación éxito cerrar al asistente haciendo clic en terminar.

3. participante preparación

1. Asegúrese de que la medición se realiza en una sala de control de temperatura (26 ° C).
2. Colocar al paciente en una posición supina cómoda en una silla dental y coloque una almohada vacío debajo de la cabeza (figura 1).
3. Deje reposar durante 15 minutos el paciente antes de toma cualquier medida.

4. microcirculación imagen medición

1. En el menú herramientas , seleccione y haga clic en Editor de proyectos. Una nueva ventana se abre en el que se pueden guardar los ajustes utilizados.
2. En el cuadro de proyectos, haga clic en nuevo para crear un nuevo proyecto. Introduzca el "Vestibulum" y haga clic en Aceptar.
3. En el cuadro de sitios, haga clic en nuevo para crear un nuevo sitio. Entrar en "Diente 14" y haga clic en Aceptar.
4. Debajo del panel de contenido de diente 14 agregar "10 cm" como la distancia requerida para la Distancia e Introduzca un ancho de 3 cm y una altura de 2 cm en los cuadros de medida.
5. Ajuste la resolución de la densidad de punto normal y la velocidad de fotogramas de 16 imágenes/s y tiempo , seleccione en el menú desplegable de duración para definir la duración de la grabación a 0:30.
6. Seleccione "Registro con ningún promedio" y fijar la tasa de captura de foto de color a 1 segundo.
7. Haga clic en "Aplicar" y "OK" para guardar los parámetros del proyecto.
8. En el menú archivo , seleccione y haga clic en nuevo registro. Se abrirá una nueva ventana de imagen y se mostrará el panel de configuración.
9. En Configuración de registro, seleccione "Vestibulum" para el proyecto y "Diente 14" para el 4.9. Sitio.
10. Abrir el menú desplegable de tema , haga clic en nuevo en el cuadro de diálogo Seleccionar objeto y escriba el nombre del paciente.
11. Haga clic en aceptar y escriba un nombre para la grabación en el campo Nombre de Rec : por ejemplo, día 1 (días transcurridos después de la operación) y el nombre del operador en el campo del operador .
12. Antes de comenzar la medición de imagen de la microcirculación, la presión arterial y pulso del paciente medida.
13. Evacuar el aire de la almohadilla de vacío para fijar la cabeza del paciente en una posición correspondiente al área bajo investigación.
14. Solicite a paciente que abra la boca.
15. Retraer labios suavemente por dos espejos dentales (figura 1).
16. Ajuste el cabezal del instrumento paralelo al área medido de la encía. Un built-in visible (650 nm) láser indicador facilita el posicionamiento del sensor en relación a la boca del paciente.
17. Ajuste la distancia de 10 cm moviendo el instrumento en relación con el tejido. La distancia se mide continuamente el dispositivo Empeoraron y se muestra por el software como trabajo distancia/medida valor bajo Configuración de imagen.
18. Instruir al sujeto a permanecer todavía durante la duración de la medida.
19. Haga clic en el botón Record para iniciar la grabación. El color de la ventana de imagen ahora cambia a rojo, indicando que la grabación está en curso. El panel de configuración es reemplazado por el panel de grabación. Grabación se detiene automáticamente después de 30 s. Cuando termine la grabación, el color de los cambios de la ventana de la imagen en azul y en el panel de grabación se reemplaza por el panel de revisión.
20. Quitar espejos dentales y permita que el paciente cierre la boca y tragar.
21. Cambiar a la imagen en directo pulsando el botón reanudar la grabación .
22. Repetir dos veces los pasos de 4.14 a 4.21.
23. Cierre el archivo. Los datos se guardan automáticamente.
24. Medir la presión arterial y pulso después de las mediciones Empeoraron.

5. análisis fuera de línea

1. Analizar las imágenes de Empeoraron con el software incorporado. Ir a imagen o dividir vista (figura 2).
2. Definir regiones de interés (ROI). Nota: los valores de perfusión de píxeles en un ROI son promediados y define como el valor del flujo de sangre del retorno de la inversión, expresada en un valor arbitrario llamado unidad de perfusión de punto láser (LSPU).
3. Seleccione la forma deseada de retorno de la inversión dentro de la paleta de herramientas ROI de la derecha.
4. Seleccione la opción de aplicar en la paleta de herramientas ROI, que se aplica a las operaciones de retorno de la inversión a todas las imágenes de la grabación.
5. Dibujar el ROI haciendo clic y manteniendo pulsado el botón del ratón en la imagen de intensidad, arrastrando el ROI al tamaño deseado y soltar el ratón botón (clic y doble clic para ROIs de forma libre). Ajustar la posición del ROI, redimensionar o girar, si es necesario.
6. Repita los pasos de 5.3. a 5.5 tantas veces como el número deseado de ROIs (figura 3).
7. Definir períodos de interés (TOI). Esto permite un promedio de perfusión en un retorno de la inversión durante un período definido de tiempo (figura 2).
8. Vaya a vista de gráfico o Split. Seleccione el botón de la herramienta de añadir TOI.
9. Haga clic en y mantenga presionado en el gráfico en la posición donde desea la TOI a comenzar y arrastre el cursor hasta la posición final deseada. Luego suelte el botón del ratón.
10. Exportar datos de la tabla de valor medio para la transformación posterior.
11. Construir las curvas de flujo de sangre por un conveniente software utilizado para el análisis estadístico.

Resultados

Vestibuloplastia es la cirugía periodontal para el vestíbulo oral, con el objetivo de aumentar la profundidad vestibular, la zona de encía queratinizada y espesor de tejido blando para mayor estética y función. El colgajo de espesor dividido apicalmente reposicionado combinado con una matriz de colágeno es un procedimiento frecuente Vestibuloplastia. Matriz de colágeno xenogénica es una alternativa al injerto gingival autógeno para aumentar la cantidad de encía queratinizada

Discusión

El objetivo de este estudio fue introducir una nueva técnica para el control de la neovascularización de un injerto de encía humana. Según nuestros resultados anteriores, pone evalúa la perfusión sanguínea de la encía con buena repetibilidad y reproducibilidad⁹, cuando se cumple la aplicación estricta de cada paso del protocolo previsto como un requisito crítico. PONE es considerado como una técnica semicuantitativa que requiere calibración periódicamente para asegurar la exactitud y ...

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
PeriCam PSI-HR	Perimed AB, Stockholm, Sweden		The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue.
PIMSoft	Perimed AB, Stockholm, Sweden		PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion.
Geistlich Mucograft	Geistlich, Switzerland		It's a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It's indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage.
Omron M4	Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan		Blood pressure monitor, which gives accurate readings.
Nikon D5200	Nikon Corportation, Tokyo, Japan		Taking intra oral photos
MS Excel	Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA		The software used for data management
IBM SPSS Statistics 25	IBM Corp., Armonk, NY, USA		The software used for statistical analysis