새로운 접근 방식을 접목 Neovascularization 인간의 Gingiva에 모니터링

요약

이 연구는 레이저 반점 대비 이미징 여 인간의 구강 점 막에는 미세 측정 하기 위한 프로토콜을 소개 합니다. 모니터링 상처 치유 후 vestibuloplasty 함께 xenogenic 콜라겐 이식 임상 사례에 제공 됩니다.

초록

레이저 반점 대비 (LSCI) 이미징 큰 지역 표면 혈액 관류를 측정 하기 위한 새로운 방법입니다. 이후 비-침략 적 측정된 지역와 직접 접촉을 방지 하 고, 그것은 인간 환자에서 치유 하는 부상을 하는 동안 혈액 흐름 변화를 모니터링 적합 합니다. Vestibuloplasty은 치 주 수술 구강 현관에 keratinized gingiva의 동시 확대 vestibular 깊이 복원 하는 것을 작정 인. 이 특별 한 임상 사례에서 분할 두께 플랩 첫 번째 위 premolar에 상승 했다 고 xenogenic 콜라겐 매트릭스 결과 받는 사람 침대에 적응 시켰다. LSCI는 및 모니터링 하 고 다시-neovascularization 이식과 주변 점 막의 1 년 사용 되었다. 구강 점 막, 어려움 및 가능한 실패에에서 미세 측정의 정확한 조정에 대 한 프로토콜 도입.

임상 사례 발표 시연 하는-적절 한 프로토콜에 따라-LSCI 인간의 구강 점 막에 상처 치유에 미세 혈관을 다음에 대 한 적합 하 고 신뢰할 수 있는 방법 이며 이식 통합에 유용한 정보를 제공.

서문

임상 상황에서 인간의 gingival 미세의 장기적인 변화 모니터링 및 치 주 수술에 뜨거운 주제입니다. 그러나, 관류의 신뢰할 수 있는 평가 어려울 수 있습니다. 접촉 인간의 점 막의 혈액 순환에 변화를 측정 하지는 않습니다만 몇 가지 방법이 있다. 2 이러한 고용 레이저 빔^1,2,3,4, 하지만 다른 방법으로. 레이저 도플러 flowmetry (LDF)는 도플러의 사용은 변화는 레이저 빔^5,6, 레이저 반점 대조 하면서 빨간 혈액의 속도 측정을 backscattered 레이저 빛의 반점 패턴에 의존 (LSCI) 메서드를 이미징 셀⁷.

LDF는 단일 지점에서 서만 고 센서의 위치 재현성 표준화 바람직한 아직 어려운 작업입니다. 또 다른 문제는 LDF의 프로브는 작은 직경 (1 m m²). 수술 전에 미리 정해진된 지점에서 측정 너무 구체적 이며 수 있습니다 수술 후 순환 변화, 눈 부 종, 조직 제거, 조직 운동 또는 이식된 이식의 영향을 받는 수술 후 형상에 상당한 변화를 일으킬 하는 동안 부드러운 조직입니다. LDF의 측정 거리 1 m m 미만 체적 변화는 조직의 경우 프로브에 대 한 미리 정해진 구멍 치과 부 목의 사용을 금지 하는. LSCI는 지역화에 대 한 어떤 특별 한 도구가 필요 하지 않습니다 그리고 몇 c m²의 영역에서 측정할 수 있습니다. 그 결과, 상처 치유 외과 사이트를 통해 다음 수 있습니다. 또한, LSCI는 최대 20 μ m의 해상도 두 번째의 일부분에서 색상된 이미지에 혈액 관류를 표시할 수 있습니다.

이 문서에 소개 된 LSCI 장치 작은 측정 영역에서 높은 해상도 필요한 동물 연구 응용 프로그램에 주로 사용 됩니다. 그러나, 구조와 인간의 구강 점 막의 조직학 영역에서 다른 영역 (연결 된 gingiva, 한계 gingiva vestibular 점 막)에, 혈액 순환 이므로 또한 이기종⁸. 따라서, 고해상도 LSCI는 인체 실험에서 일반적으로 사용 되는 일반 해상도 LSCI 이상 큰 이점이 있다.

LSCI 악기는 눈에 보이지 않는 레이저 (파장 785 nm)를 사용합니다. 광선은 얼룩 패턴을 만드는 측정 영역을 밝게 하 갈라 졌습니다. CCD 카메라 조명된 영역에 얼룩 패턴 이미지. 이 시스템에 사용 되는 CCD 카메라는 1386 x 1034 픽셀의 활성 이미징 영역 및 그것의 해상도 크기 측정 지역 및 소프트웨어 (낮은, 중간, 높은)의 설정에 따라 20-60 µ m/픽셀 사이 합니다. 그것은 초, 또는 심지어 더 많은 것, 초당 100 프레임 16 프레임의 속도로 이미지 크기를 줄이면 이미지를 걸릴 수 있습니다. 혈액 관류 내장 소프트웨어에 의해 계산 됩니다. 그것은 얼룩 패턴 변화를 분석 하 고 대비를 단정. 결과 속은 관류 이미지를 생성 하는 코딩 된 색상입니다. 우리의 이전 결과 LSCI 좋은 반복성 및 재현성⁹gingiva의 혈액 관류를 평가합니다. 이 단기 실험 뿐만 아니라 질병의 진행을 추적 하거나 상처 치유¹⁰장기 연구 기간 동안 구강 점 막의 미세 혈관에 변화를 모니터링 하기 위한 신뢰할 수 있는 도구 다는 것을 의미 합니다.

이 문서에서 우리는 LSCI의 높은 공간 해상도 가능 하 게 xenogenic 콜라겐 이식의 neovascularization 패턴을 입증 하는 임상 사례 보고서 제시. 또한,이 경우는 LSCI, 그것의 높은 신뢰성으로 인하여 민감하게 감지할 수 개별 변형 나타냅니다. 이것은 중요 한 현지 해부학 적 변형으로 중요 한 고 경우 사이 다른 조직의 배경 어려운 치 주 수술의 임상에서 과적 표준화.

프로토콜

상태 등록 및 교육 센터의 헝가리 위원회에서 윤리적인 승인을 수 여 되었다 임상 시험에서 보고 된 방법 고용 했다 (승인 번호: 034310/2014/OTIG).

1. LSCI 설치

1. 컴퓨터와 모든 주변 장치를 켠다.
2. 후면 패널에 있는 스위치와 함께 사용할 수 LSCI 악기에 전환 합니다.
3. 적어도 5 분을 위해 따뜻한 악기를 허용 합니다. 후면 패널에 모두 Led 깜박임 중지 때 악기 측정을 위한 준비.
4. 바탕 화면이 나 시작 메뉴를 통해 소프트웨어 아이콘을 두 번 클릭 하 여 소프트웨어를 시작 합니다.
5. 노란색과 뒷면 패널에 녹색 led가 모두 중단 깜박이, 레이저는 따뜻한 나타냅니다 초기화 완료 때까지 기다리십시오.
   참고: 때 시스템을 시작 하나 가끔 뜹니다 시스템에 대 한 확인 절차를 수행 하려면.

2. 시스템 확인

1. 제공 된 보정 상자를 사용 합니다. 교정 상자에서 뚜껑을 제거 하 고 콜 로이드 현 탁 액에 침전을 피하기 위해 그것을 흔들어.
2. 그만둔 다 뚜껑 30 s 거품을 피하기 위해.
3. 다시 보정 상자에 뚜껑을 넣어.
4. 고급 클릭 | 확인 | 악기를 확인.
5. 일상적인 확인 선택 | 다음.
6. 머리 90 ° 회전, 고정 교정 상자 통합된 자석을 사용 하 고 클릭 합니다.
7. 텍스트 상자에 입력 하는 실내 온도, ° C를 선택 하 고 시작을 클릭 합니다.
8. 마법사는 확인 절차를 완료 하는 동안 기다립니다.
9. 성공적인 확인 절차 후 완료를 클릭 하 여 마법사를 닫습니다.

3. 참가자 준비

1. 온도 제어 룸 (26 ° C)에서 측정을 수행 하는 다는 것을 확인 하십시오.
2. 치과 자에 편안한 부정사 위치에 환자를 배치 하 고 그의 머리 (그림 1) 아래 진공 베개를 놓습니다.
3. 전에 어떤 측정을 수행한 환자를 15 분 동안 그대로 둡니다.

4. 미세 이미지 측정

1. 도구 메뉴에서 선택 하 고 프로젝트 편집기클릭 하십시오. 새 창이 열립니다 있는 일반적으로 사용 되는 설정을 저장할 수 있습니다.
2. 프로젝트 상자에서 새 프로젝트를 만들려면 새 클릭 합니다. "Vestibulum"를 입력 하 고 확인을 클릭 합니다.
3. 사이트 상자에서 새 사이트를 만들 새 를 클릭 합니다. "치아 14"를 입력 하 고 확인을 클릭 합니다.
4. 치아 14의 내용 패널 아래 작동 거리 에 대 한 필요한 거리로 "10cm"를 추가 하 고 측정 상자에 3 cm의 너비 및 2 cm의 높이 입력 합니다.
5. 포인트 밀도 해상도 정상과 16 이미지/s 프레임 속도를 설정 하 고 0을 기록 시간을 설정 기간 드롭 다운 메뉴에서 시간 을 선택: 30.
6. "아니 평균 기록"을 선택 하 고 1/2로 컬러 사진 캡처 속도 설정.
7. 클릭 "적용" 및 "확인" 프로젝트 매개 변수를 저장 합니다.
8. 파일 메뉴에서 선택 하 고 새 녹음을 클릭 합니다. 새로운 이미지 창이 열리고 설치 패널 표시 됩니다.
9. 녹음 설정에서 프로젝트 와 "치아 14"는 4.9에 대 한에 대 한 "Vestibulum"를 선택 합니다. 사이트.
10. 주제 드롭-다운 메뉴를 열고, 주제 선택 대화 상자에서 새를 클릭 하 고 환자의 이름을 입력.
11. Rec 이름 필드에는 기록에 대 한 이름을 입력 하 고 확인을 클릭 합니다: 예를 들어, 1 일 (작업 후 일 경과)와 연산자 필드에서 연산자의 이름을.
12. 전에 시작 미세 이미지 측정, 측정 환자의 혈압과 맥 박.
13. 조사 지역에 적절 한 위치에 환자의 머리를 해결 하기 위해 진공 베개에서 공기를 철수.
14. 그의 입을 열고 하 환자를 부탁 드립니다.
15. 2 개의 치과 거울 (그림 1)에 의해 부드럽게 입술을 철회.
16. 악기의 머리는 gingiva의 측정된 영역에 병렬을 조정 합니다. 기본 제공 표시 (650 nm) 표시기 레이저 용이 환자의 입 상대 영상의 위치.
17. 조직에 관하여 악기를 이동 하 여 10 cm 작동 거리를 조정 합니다. 거리는 지속적으로 LSCI 장치에 의해 측정 되 고 이미지 설정에서 작업 거리/측정 값으로 소프트웨어에 의해 표시 됩니다.
18. 측정의 동안 아직도 남아 주제를 지시 합니다.
19. 기록을 시작 하려면 기록 단추를 클릭 합니다. 이미지 창의 색상 빨강, 녹화 진행에서을 나타내는 이제 변경 됩니다. 설치 패널 녹음 패널에 의해 대체 됩니다. 녹음 중지 자동으로 30 후 s. 녹음을 마치면 파랑 이미지 창 변경 및 녹음 패널의 색상 검토 패널에 의해 대체 됩니다.
20. 치과 거울을 제거 하 고 그의 입을 닫고 제비 환자 허용.
21. 녹화를 다시 시작 버튼을 누르면 라이브 이미지에 다시 전환 합니다.
22. 두 번 4.21로 4.14에서 단계를 반복 합니다.
23. 파일을 닫습니다. 데이터는 자동으로 저장 됩니다.
24. 혈압을 측정 하 고 LSCI 측정 후 펄스.

5. 오프 라인 분석

1. 내장 된 소프트웨어를 사용 하 여 LSCI 이미지를 분석 합니다. 이미지 또는 나누기 보기 (그림 2)로 이동 합니다.
2. 관심 (ROI) 영역을 정의 합니다. 참고:는 ROI 내의 픽셀의 관류 값 평균 하 고 레이저 반점 관류 장치 (LSPU) 라고 하는 임의의 값으로 표현 하는 투자 수익의 혈액 흐름 값으로 정의 됩니다.
3. 오른쪽에 ROI 도구 팔레트에서 원하는 투자 수익 모양을 선택 합니다.
4. 녹음의 모든 이미지에 적용 하는 투자 수익 작업 ROI 도구 팔레트에 적용 옵션을 선택 합니다.
5. 클릭 하 여 투자 수익 그리고 강도 이미지에서 마우스 버튼을 잡고, 원하는 크기에 밖으로 투자 수익을 끌어 마우스를 해제 버튼 (클릭 및 자유형 ROIs 위한 두 번 클릭). 투자 수익의 위치를 조정, 크기 조정 또는 회전, 필요한 경우.
6. 5.3에서 단계를 반복 합니다. 5.5 ROIs (그림 3)의 원하는 수로 여러 번.
7. 관심 (토이)의 기간을 정의 합니다. 이 일정 한 기간 동안 (그림 2)는 투자 수익에서 관류를 평균 수 있습니다.
8. 그래프 또는 분할 보기로 이동 합니다. 토이 추가 도구 버튼을 선택 합니다.
9. 클릭 하 고 시작 하 고 원하는 끝 위치에 커서를 끌어 토이 위치에 그래프에. 그런 다음 마우스 단추를 놓습니다.
10. 추가 처리를 위해 평균 값 테이블에서 데이터를 내보냅니다.
11. 통계 분석에 사용 되는 적합 한 소프트웨어에 의해 혈액 흐름 곡선을 생성 합니다.

결과

Vestibuloplasty은 치 주 수술 구강 현관을 vestibular 깊이, keratinized gingiva 및 향상 된 미학과 기능에 대 한 연 조직 두께의 증가를 목표로. Apically 끝점이 분할 두께 플랩 콜라겐 매트릭스와 함께 자주 사용된 vestibuloplasty 절차 이다. Xenogenic 콜라겐 매트릭스는 자생 gingival 이식 keratinized gingiva^11,,1213;의 양을 증?...

토론

이 연구의 목적은 인간의 gingiva에 이식의 neovascularization를 모니터링 하기 위한 새로운 기법을 소개 했다. 우리의 이전 결과 LSCI 엄격한 구현의 중요 한 요구로 계획 된 프로토콜의 각 단계를 만났을 때 좋은 반복성 및 재현성⁹, gingiva의 혈액 관류를 평가 합니다. LSCI는 정확성과 안정성을 보장 하기 위해 정기적으로 보정을 요구 하는 반 정량 기법으로 간주 된다. 동안 확인, 실내 온...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
PeriCam PSI-HR	Perimed AB, Stockholm, Sweden		The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue.
PIMSoft	Perimed AB, Stockholm, Sweden		PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion.
Geistlich Mucograft	Geistlich, Switzerland		It's a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It's indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage.
Omron M4	Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan		Blood pressure monitor, which gives accurate readings.
Nikon D5200	Nikon Corportation, Tokyo, Japan		Taking intra oral photos
MS Excel	Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA		The software used for data management
IBM SPSS Statistics 25	IBM Corp., Armonk, NY, USA		The software used for statistical analysis