Comience agregando 200 microlitros de inóculo bacteriano en cada pocillo de una placa estéril de 96 pocillos preparada para el análisis microscópico. Incubar la placa a 25 grados centígrados durante 24 horas antes de retirar el sobrenadante con la pipeta. A continuación, agregue con cuidado 300 microlitros de agua desionizada esterilizada con filtro en cada pozo.
Retire el sobrenadante con una pipeta una vez más. En otro tubo, prepare una mezcla diluida de SYTO 9 y yoduro de propidio y agua desionizada esterilizada con filtro hasta las respectivas concentraciones finales deseadas. Luego agregue 200 microlitros de la mezcla en cada pocillo e incube la placa durante 20 a 30 minutos a temperatura ambiente en un entorno oscuro.
La microscopía de barrido láser confocal reveló que la formación de biopelículas variaba significativamente en función de las cepas. Se encontró una cantidad sustancial de biopelícula en Acinetobacter junii, Acinetobacter baumannii y Acinetobacter ursingii con distintas morfologías de biopelícula.