تصنيع شبكات أحادية الطبقة مطلية بالجرافين للمجهر الإلكتروني بالتبريد

يمثل الحفاظ على العينات البيولوجية حاليا على النحو الأمثل تحديا كبيرا في الحصول على هياكل CryoEM عالية الدقة. أثناء عملية تحضير العينات ، تتعرض العينات لواجهة الهواء والماء الكارهة للماء ، والتي لها تأثيرات تغيير طبيعة على العينات ويمكن أن تتسبب في اعتماد عينات مستقرة لاتجاه تفضيلي في الجليد ، مما يمنع تحديد هيكل عالي الدقة. تم استخدام طلاء شبكات CryoEM بطبقة رقيقة من الكربون مثل أكسيد الجرافين الناعم ، بشكل شائع لمعالجة المشكلات المتعلقة بالتفاعلات مع واجهة الهواء والماء.

ومع ذلك ، غالبا ما تزيد هذه الطبقات من ضوضاء الخلفية في صورنا ، مما يضر بقرارات هيكلنا. يوفر طلاء الشبكة بطبقة أحادية من الجرافين حماية مماثلة دون إحداث ضوضاء كبيرة في الخلفية. يمكن أن يساعد استخدام شبكات CryoEM المطلية بالجرافين في التغلب على المشكلات المتعلقة بالتفاعلات مع واجهة الهواء والماء ، ومع ذلك ، فإن شبكات الجرافين التجارية باهظة الثمن وتعتبر العديد من المختبرات شبكات الجرافين معقدة للغاية بحيث لا يمكن تحضيرها داخليا.

يمكن للباحثين في مجال CryoEM الآن استخدام هذا البروتوكول خطوة بخطوة لإعادة إنتاج العشرات من الجرافين عالي الجودة المنتج بالكامل في يوم واحد.