Изготовление монослойных сеток с графеновым покрытием для криоэлектронной микроскопии

В настоящее время оптимальная сохранность биологических образцов является основной проблемой при получении криоЭМ-структур с высоким разрешением. В процессе пробоподготовки образцы подвергаются воздействию гидрофобной границы воздух-вода, которая оказывает денатурирующее воздействие на образцы и может привести к тому, что стабильные образцы примут преимущественную ориентацию во льду, что препятствует определению структуры с высоким разрешением. Покрытие CryoEM сеток тонким слоем углерода, такого как мягкий оксид графена, обычно используется для решения проблем, связанных с взаимодействием с границей раздела воздух-вода.

Однако эти слои часто увеличивают фоновый шум на наших изображениях, что ставит под угрозу разрешение нашей структуры. Покрытие сетки монослоем графена обеспечивает аналогичную защиту без значительного фонового шума. Использование решеток CryoEM с графеновым покрытием может помочь преодолеть проблемы, связанные с взаимодействием с границей раздела воздух-вода, однако коммерческие графеновые сетки стоят дорого, и многие лаборатории считают, что графеновые сетки слишком сложны для самостоятельного приготовления.

Исследователи в области криоЭМ теперь могут использовать этот пошаговый протокол для воспроизведения полностью произведенных десятков высококачественных графенов за один день.