Prepare el gradiente quimiotáctico agregando 160 microlitros de quimioatrayentes a la cámara inferior de un analizador celular en tiempo real basado en impedancia, o placa RTCA. Para controles negativos y blancos, agregue 160 microlitros de solución salina equilibrada de Hanks o HBSS con calcio y magnesio. Coloque la cámara superior y agregue 25 microlitros de HBSS con calcio y magnesio.
Incubar a temperatura ambiente durante al menos una hora para formar el gradiente quimiotáctico. A continuación, mezcle suavemente y transfiera 60 microlitros de los neutrófilos polimorfonucleares activados previamente preparados a la cámara superior. Luego agregue 60 microlitros de HBSS con calcio y magnesio a la pieza en bruto.
Coloque la placa RTCA en el analizador y programe su software para medir el índice celular cada 60 segundos durante dos horas. Ajuste la curva con los datos obtenidos. La migración celular en tiempo real mostró un efecto quimiotáctico de 100 nanomolares fMLP sobre neutrófilos.
