Para comenzar, enjuague suavemente las vainas de las hojas de maíz inoculadas con esporas de hongos en agua desionizada. Coloque la vaina en un portaobjetos de microscopio de vidrio limpio con la superficie adaxial hacia abajo y la superficie abaxial hacia arriba. Con una cuchilla de afeitar de un solo filo, recorte aproximadamente un centímetro de los extremos de la vaina y retire la mayor parte del tejido de la lámina a cada lado de la nervadura central.
Sostenga la hoja de afeitar en un ángulo de 90 grados para afeitar el tejido de la nervadura central abaxial, exponiendo la capa epidérmica en la superficie adaxial por encima del punto inoculado. Levante con cuidado la sección de la funda desde un borde y transfiérala a una nueva diapositiva con la superficie adaxial hacia la parte superior más cercana a la lente del objetivo. Aplique 60 microlitros de agua desionizada a la sección y coloque un cubreobjetos de vidrio sin introducir burbujas de aire.
Stenocarpella maydis invadió rápidamente las células epidérmicas directamente a través de hinchazones de hifas indiferenciadas. Mientras que Colletotrichum graminicola produjo apresorios melanizados. La tinción con azul de tripano reveló la naturaleza y el alcance de la colonización de las hifas fúngicas, con C. graminicola invadiendo inicialmente a través de hifas primarias gruesas y luego cambiando a una etapa necrotrófica.
C. graminicola invade las células vivas de maíz utilizando hifas primarias gruesas separadas del citoplasma del huésped por una membrana. Por el contrario, S.maydis produce una fitotoxina que mata las células epidérmicas antes de invadirlas. En C. graminicola, la producción de precipitado de color marrón oscuro en las vainas foliares de maíz indicó un estallido oxidativo relacionado con una respuesta de resistencia del hospedero.
