Disrupción génica de alta eficiencia en macrófagos primarios derivados de la médula ósea mediante complejos Cas9-sgRNA electroporados

Nuestro laboratorio estudia la interacción entre las micobacterias, la tuberculosis y el sistema inmune del huésped, centrándose en la interacción inicial entre la bacteria y el macrófago. Hay una variedad de técnicas de disrupción genética utilizadas en los macrófagos, incluidas las tecnologías de ARNi y las tecnologías CRISPR. Uno de los principales desafíos es la baja eficiencia de la disrupción génica en los macrófagos.

Este protocolo permite la manipulación genética rápida y de alta eficiencia de macrófagos primarios sin necesidad de clonación ni construcción de plásmidos. Estos métodos deberían ser ampliamente aplicables en inmunología, permitiendo a los investigadores alterar los genes en los macrófagos primarios para una amplia gama de estudios.