Enfoque microfluídico para resolver la secreción simultánea y secuencial de citocinas de células polifuncionales individuales

En este proyecto, nos centramos en el desarrollo y aplicación de nuevas estrategias analíticas, que permiten el análisis directo, cuantitativo y profundo de las funcionalidades celulares a resolución de una sola célula. Por lo tanto, al ir más allá de la medición pura de un punto de datos, nuestro objetivo es comprender y explotar mejor esta multifuncionalidad, que proviene de respuestas complejas en el huésped y en el tejido. Obtener una comprensión integral de estas funcionalidades es complejo, difícil y requiere enfoques interdisciplinarios.

Por lo tanto, uno de los desafíos en este contexto es garantizar que el rango dinámico del desarrollo del ensayo sea el adecuado para capturar la cantidad y la dinámica de una proteína secretada, que puede variar mucho entre muestras, preparaciones y tejidos. La interrupción en la regulación de la respuesta inmunitaria puede inducir diversos trastornos, que conducen a una fiebre leve o a una complicación potencialmente mortal. Yendo más allá de las mediciones tradicionales de puntos finales, propusimos medir directamente la desregulación y la activación de las células inmunitarias de forma dinámica a nivel de una sola célula para obtener información adicional.

Por lo tanto, las citocinas generalmente se detectan en un punto de tiempo específico como una concentración en el sobrenadante o concentración de células activadas. Medición masiva directa para cuantificar la secreción de cada célula individual, enmascarando la heterogeneidad celular que, como medidas de punto final, no distingue entre secreción simultánea y secundaria. Pasando por alto el aspecto dinámico de la respuesta, la funcionalidad celular completa se refiere a la capacidad de una célula inmunitaria para secretar múltiples citocinas simultáneamente.

Esto les permite, por ejemplo, afinar su respuesta frente a las amenazas y medir esta polifuncionalidad de forma dinámica, lo que significa que con el tiempo pueden dar una visión más amplia de los diferentes matices de una respuesta inmunitaria.