Para comenzar, siembra el cultivo de HepG2 durante la noche en 100 microlitros de DMEM en cada pocillo de una placa de 96 pocillos. Incubar las células a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono durante 24 horas. Al día siguiente desechar el sobrenadante y añadir 100 microlitros de ácido oleico por pocillo según el grupo especificado.
Para el grupo de control, agregue 100 microlitros de DMEM a cada pocillo. Incubar las células a 37 grados centígrados durante 24 horas. Después de la incubación, agregue 10 microlitros de reactivo de recuento de células a cada pocillo, mezcle suavemente e incube durante dos horas en la oscuridad.
Coloque la placa en el lector de microplacas y mida la absorbancia a 450 nanómetros. Calcule los valores GI50 de las células HepG2 según la densidad óptica. En comparación con el control, el ácido oleico disminuyó las tasas de supervivencia de las células HepG2 a concentraciones de 0,125, 0,25, 0,5 y un milimolar, con significación estadística observada a 0,5 y un milimolar.