Este proyecto fue financiado por la Asociación Alemana de Investigación (DFG, Excmo 4578/3-1).

A. Cartílago biopsia (Cirugía habitación; pasos 1-5 en la sala de preparación no estéril) <ol><li> Realizar un control del peso final del conejo (conejo Blanco de Nueva Zelanda, hembra, 3,5-4,0 kg de peso corporal, 6 meses de edad) con el fin de ser capaz de dosis drogas correctamente y para supervisar peso posterior a la cirugía. </li><li> Inducir la anestesia para el conejo mediante una inyección intravenosa de 10 mg / kg de propofol. </li><li> Después de la intubación, mantener la anestesia con 1,5 mg / kg / min propofol y 0,05 mg / kg de fentanilo por vía intravenosa. Supervisar la anestesia mediante capnografía, pulsioximetría y el pulso. </li><li> Afeitado de la rodilla para ser operado con una maquinilla eléctrica y el vacío de la piel. </li><li> Desinfectar la rodilla afeitado a fondo y cubrir el resto del conejo con un apósito estéril. </li><li> Se palpa la rótula y realizar una incisión en la piel en sentido medial de la rótula. </li><li> Abra la articulación de la rodilla por una artrotomía parapatelar medial en condiciones estériles. Trate de evitar el corte de cualquier pequeña dovasos sanguíneos perficial. </li><li> Desplazar la rótula lateralmente. </li><li> Inspeccione la articulación de la rodilla de las anomalías y lesiones de cartílago macroscópicos. </li><li> Retire con cuidado trozos de cartílago pequeñas (2-3 mm) fuera de la tróclea femoral ossis con un bisturí estéril (Figura 1). </li><li> Inmediatamente colocar estas biopsias de cartílago en un tubo de 50 ml con medio completo (DMEM + 10% suero de ternera fetal (FCS) + 1% de penicilina / estreptomicina (Pen / Strep)) para continuar con el cultivo in vitro en la derecha después de la operación. </li><li> Limpie los defectos y enjuague con solución salina estéril. </li><li> Vuelva a colocar la rótula en el surco troclear. </li><li> Cierre de la herida en capas con suturas solo botón (4-0 Vicryl) y una sutura cutánea continua (4-0 Monocryl). Utilice material de sutura absorbible. </li><li> Por último, sellar la herida con un apósito de pulverización permeable al vapor de agua. </li></ol> B. In vitro Cultura <ol><li> Procesar la biopsia cpiezas artilage tan pronto como sea posible después de la operación en un flujo laminar campana de cultivo de tejido estéril. </li><li> Lavar la estéril cosechada cartílago 2x en PBS con posterior centrifugación a 500 xg durante 3 minutos a TA. </li><li> Cortar cartílago en piezas de 1 mm 3, la transferencia a un Falcon 50 ml y digerir ellos en un agitador durante 30 min con 10 ml de tripsina-EDTA (0,25%) y 10 ml de PBS durante 30 min </li><li> Después de 30 min, dejar de tripsinización mediante la adición de medio completo. Entonces, agitar los trozos de cartílago para otra durante 12 horas con colagenasa A (0,21 U / mg) en medio libre de suero (DMEM + 1% Pen / Strep). </li><li> Centrifugar la solución resultante a 170 xg durante 3 minutos a TA. </li><li> Resuspender los sedimentos celulares en 5 ml de medio completo. </li><li> Seed los condrocitos aislados de hasta 25 cm 2 frascos de cultivo de tejidos en 5 ml de medio completo y manténgalo en un cultivo de tejidos humidificado incubadora a 37 ° C, 5% CO 2. </li><li> Crecer condrocitos a una densidad de 80%. </li><li> Liberar las células ffrascos rom de lavado en PBS 2 veces antes de exponerse al 0,05% de tripsina-EDTA durante 3 min. Una vez que los condrocitos se desprenden, dejar de tripsinización mediante la adición de 10 l de medio completo. </li><li> Se centrifuga la suspensión a 300 xg (3 min) y se resuspende el precipitado en medio completo. </li><li> Se siembran las células en matraces de cultivo tisular (75 cm 2) y divididas en una proporción de 1:03 (~ 5000 células / cm 2) cada 5 º día o al 80% de confluencia. </li><li> Determinar el número de células y la viabilidad mediante tinción con azul tripán. </li></ol> C. siembra de células de la matriz <ol><li> Antes de la implantación de lavado y las células de liberación como se describió anteriormente. Lleve a cabo el recuento de células y transferir 10 células de 5 x 4 en un tubo de microcentrífuga de 1,5 ml. A continuación, se centrifuga a 500 xg durante 5 min a TA. </li><li> Resuspender el precipitado en 15 l de medio completo para una saturación completa de la matriz. </li><li> Cortar la bicapa de colágeno andamio a las dimensiones exactas del defecto troclear por una biopsia estérilponche. </li><li> Lugar matriz en una placa de cultivo tisular de tamaño adecuado (por ejemplo, placas de 24 pocillos). </li><li> Se siembran las células sobre el lado poroso, célula-adhesivo de la matriz. Esto impide la migración de células lejos de la matriz. </li><li> Deja matrices de células sembradas sin más medio de cultivo celular en una incubadora durante 1 hora para permitir la plena adhesión de los condrocitos. </li><li> Luego, coloque célula-matriz-construcciones en recipientes de cultivo (por ejemplo, placas de 24 pocillos) con medio completo fresco. Tome les importa para lavar las células fuera de la matriz, aunque se espera una fuerte adherencia. </li><li> Ahora, célula-matriz-construcciones pueden ser llevados a la sala de cirugía de reimplantación. </li></ol> D. Matrix asistida por trasplante de condrocitos autólogos <ol><li> Realizar artrotomía parapatelar a la rodilla contralateral como se describió anteriormente (A. 1-8). </li><li> Cree dos defectos condrales aisladas en el surco troclear con una de Operación aire estérilg taladro eléctrico (3,6 mm de diámetro). </li><li> Limpie el defecto y enjuague con solución salina estéril. </li><li> Se debe prestar atención de no abrir la cavidad medular en cualquier momento. Si es necesario, sellar la parte inferior de los defectos con cauterización eléctrica frente a hemorragias. </li><li> Implante las matrices sembradas con los cultivos de condrocitos con la cara lateral hacia abajo porosa (Figura 2). A continuación, encaje a presión en los orificios de perforación y al ras de la superficie circundante. </li><li> Selle las matrices implantados con un poco de pegamento de fibrina (Tissucol Duo S) para garantizar una fijación segura. </li><li> Después de la coagulación, la ubicación de la rótula en el surco troclear y aplicar el rango de movimiento de la articulación de la rodilla un par de veces. </li><li> Desplazar la rótula lateralmente una vez más y comprobar si hay algún evento o señal de fijación inestable. Las matrices deben realizarse todavía en su lugar. </li><li> Vuelva a colocar la rótula de nuevo y terminar la operación con el cierre de la herida en capas y el aerosol de vestir como se describe anteriormente. </li></ol>

<ol>
	<li>Albrecht, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+and+cell+differentiation+in+matrix-associated+chondrocyte+transplantation+grafts:+a+comparative+study.">Gene expression and cell differentiation in matrix-associated chondrocyte transplantation grafts: a comparative study.</a> Osteoarthritis Cartilage. 19, 1219-1227 (2011).</li><li>Pridie, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+resurfacing+osteoarthritic+knee+joints.">A method of resurfacing osteoarthritic knee joints.</a> J. Bone Joint Surg. Br. 41, 618-619 (1959).</li><li>Johnson, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arthroscopic+abrasion+arthroplasty+historical+and+pathologic+perspective:+present+status.">Arthroscopic abrasion arthroplasty historical and pathologic perspective: present status.</a> Arthroscopy. 2, 54-69 (1986).</li><li>Steadman, J. R., Rodkey, W. G., Singelton, S. B., Briggs, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfracture+technique+for+full-thickness+chondral+defects:+technique+and+clinical+result.">Microfracture technique for full-thickness chondral defects: technique and clinical result.</a> Operat. Tech. Orthop. 7, 300-304 (1997).</li><li>Brittberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+deep+cartilage+defects+in+the+knee+with+autologous+chondrocyte+transplantation.">Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation.</a> N. Engl. J. Med. 331, 889-895 (1994).</li><li>Peterson, L., Vasiliadis, H. S., Brittberg, M., Lindahl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+chondrocyte+implantation:+a+long-term+follow-up.">Autologous chondrocyte implantation: a long-term follow-up.</a> Am. J. Sports Med. 38, 1117-1124 (2010).</li><li>Nehrer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondrocyte-seeded+collagen+matrices+implanted+in+a+chondral+defect+in+a+canine+model.">Chondrocyte-seeded collagen matrices implanted in a chondral defect in a canine model.</a> Biomaterials. 19, 2313-2328 (1998).</li><li>Frenkel, S. R., Toolan, B., Menche, D., Pitman, M. I., Pachence, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondrocyte+transplantation+using+a+collagen+bilayer+matrix+for+cartilage+repair.">Chondrocyte transplantation using a collagen bilayer matrix for cartilage repair.</a> J. Bone. Joint Surg. Br. 79, 831-836 (1997).</li><li>Salzmann, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dependence+of+autologous+chondrocyte+transplantation+on+varying+cellular+passage,+yield+and+culture+duration.">The dependence of autologous chondrocyte transplantation on varying cellular passage, yield and culture duration.</a> Biomaterials. 32, 5810-5818 (2011).</li><li>Frohlich, M., Malicev, E., Gorensek, M., Knezevic, M., Kregar Velikonja, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+rabbit+auricular+chondrocyte+isolation+and+growth+parameters+in+cell+culture.">Evaluation of rabbit auricular chondrocyte isolation and growth parameters in cell culture.</a> Cell Biol. Int. 31, 620-625 (2007).</li><li>Willers, C., Chen, J., Wood, D., Xu, J., Zheng, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+chondrocyte+implantation+with+collagen+bioscaffold+for+the+treatment+of+osteochondral+defects+in+rabbits.">Autologous chondrocyte implantation with collagen bioscaffold for the treatment of osteochondral defects in rabbits.</a> Tissue Eng. 11, 1065-1076 (2005).</li><li>Vogt, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+the+stable+expression+of+BMP2+in+fibrin+clots+on+the+remodelling+and+repair+of+osteochondral+defects.">The influence of the stable expression of BMP2 in fibrin clots on the remodelling and repair of osteochondral defects.</a> Biomaterials. 30, 2385-2392 (2009).</li><li>Ueblacker, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+retroviral+gene+transfer+to+chondrocytes+within+collagen+scaffolds+for+the+treatment+of+osteochondral+defects.">In vivo analysis of retroviral gene transfer to chondrocytes within collagen scaffolds for the treatment of osteochondral defects.</a> Biomaterials. 28, 4480-4487 (2007).</li><li>Marlovits, S., Zeller, P., Singer, P., Resinger, C., Vecsei, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cartilage+repair:+generations+of+autologous+chondrocyte+transplantation.">Cartilage repair: generations of autologous chondrocyte transplantation.</a> Eur. J. Radiol. 57, 24-31 (2006).</li><li>Benya, P. D., Shaffer, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dedifferentiated+chondrocytes+reexpress+the+differentiated+collagen+phenotype+when+cultured+in+agarose+gels.">Dedifferentiated chondrocytes reexpress the differentiated collagen phenotype when cultured in agarose gels.</a> Cell. 30, 215-224 (1982).</li><li>Rudert, M., Hirschmann, F., Wirth, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+behavior+of+chondrocytes+on+various+biomaterials.">Growth behavior of chondrocytes on various biomaterials.</a> Orthopade. 28, 68-75 (1999).</li><li>Hsu, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+biodegradable+polyesters+modified+by+type+II+collagen+and+Arg-Gly-Asp+as+Tissue+Engineering+scaffolding+materials+for+cartilage+regeneration.">Evaluation of biodegradable polyesters modified by type II collagen and Arg-Gly-Asp as Tissue Engineering scaffolding materials for cartilage regeneration.</a> Artificial Organs. 30, 42-55 (2006).</li><li>Brun, P., Cortivo, R., Zavan, B., Vecchiato, N., Abatangelo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro++reconstructed+tissues+on+hyaluronan-based+temporary+scaffolding.">In vitro reconstructed tissues on hyaluronan-based temporary scaffolding.</a> J. Mater. Sci. Mater. Med. 10, 683-688 (1999).</li><li>Domm, C., Fay, J., Schunke, M., Kurz, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redifferentiation+of+dedifferentiated+joint+cartilage+cells+in+alginate+culture.+Effect+of+intermittent+hydrostatic+pressure+and+low+oxygen+partial+pressure.">Redifferentiation of dedifferentiated joint cartilage cells in alginate culture. Effect of intermittent hydrostatic pressure and low oxygen partial pressure.</a> Orthopade. 29, 91-99 (2000).</li><li>Kimura, T., Yasui, N., Ohsawa, S., Ono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondrocytes+embedded+in+collagen+gels+maintain+cartilage+phenotype+during+long-term+cultures.">Chondrocytes embedded in collagen gels maintain cartilage phenotype during long-term cultures.</a> Clin. Orthop. Relat. Res. , 231-239 (1984).</li><li>Kon, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Second-generation+autologous+chondrocyte+implantation:+results+in+patients+older+than+40+years.">Second-generation autologous chondrocyte implantation: results in patients older than 40 years.</a> Am. J. Sports Med. 39, 1668-1675 (2011).</li><li>Gavenis, K., Schmidt-Rohlfing, B., Mueller-Rath, R., Andereya, S., Schneider, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+comparison+of+six+different+matrix+systems+for+the+cultivation+of+human+chondrocytes.">In vitro comparison of six different matrix systems for the cultivation of human chondrocytes.</a> In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 42, 159-167 (2006).</li><li>Niemeyer, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristic+complications+after+autologous+chondrocyte+implantation+for+cartilage+defects+of+the+knee+joint.">Characteristic complications after autologous chondrocyte implantation for cartilage defects of the knee joint.</a> Am. J. Sports Med. 36, 2091-2099 (2008).</li><li>Tay, L. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+outcomes+of+alginate-embedded+allogenic+mesenchymal+stem+cells+versus+autologous+chondrocytes+for+the+repair+of+focal+articular+cartilage+defects+in+a+rabbit+model.">Treatment outcomes of alginate-embedded allogenic mesenchymal stem cells versus autologous chondrocytes for the repair of focal articular cartilage defects in a rabbit model.</a> The American Journal of Sports Medicine. 40, 83-90 (2012).</li><li>Brittberg, M., Nilsson, A., Lindahl, A., Ohlsson, C., Peterson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabbit+articular+cartilage+defects+treated+with+autologous+cultured+chondrocytes.">Rabbit articular cartilage defects treated with autologous cultured chondrocytes.</a> Clin. Orthop. Relat. Res. , 270-283 (1996).</li></ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El protocolo presentado proporciona una técnica establecida 9,12,13 y fácilmente reproducible para aislar condrocitos autólogos para la posterior proliferación y re-implante en defectos del cartílago creados artificialmente en las rodillas de conejo. El uso de condrocitos autólogos para la remodelación y reparación de lesiones del cartílago articular ya está en uso clínico proporcionar resultados satisfactorios a largo plazo 6. Los principales problemas como ...

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of reagent/equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>F 0415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10 103 586 001</td>
			<td>0.21 U/mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal calf serum (FCS)</td>
			<td>PAN Biotech GmbH</td>
			<td>3702-P103009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>A 2213</td>
			<td>10,000 U/ml/10,000 &mu;g/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS Dulbecco (1X)</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>L1815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol (70%)</td>
			<td>Merck KgaA</td>
			<td>410230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA 0.25 %/0.02 %</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>L2163</td>
			<td>in PBS w/o Ca2+, Mg2+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl</td>
			<td>Delta Select GmBH</td>
			<td>1819340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl solution (0.9%)</td>
			<td>Bbraun</td>
			<td>8333A193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes 100 mm/150 mm</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>93100/93150</td>
			<td>Growth area 60.1 mm2/147.8 mm2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture flasks 25/75 mm2</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>90025/90075</td>
			<td>25 mm2, 75 mm2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tubes (50 ml)</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>91050</td>
			<td>Gamma-sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>Brand GmbH+Co KG</td>
			<td>717810</td>
			<td>Neubauer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Solution 0.4%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L8154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray dressing (OpSite)</td>
			<td>Smith&amp;Nephew</td>
			<td>66004978</td>
			<td>Permeable for water vapor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chondro-Gide&Ograve;</td>
			<td>Geistlich Pharma AG</td>
			<td>30915.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy Punch</td>
			<td>pfm medical ag</td>
			<td>48351</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissucol Duo S</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>3419627</td>
			<td>0.5 ml</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

matrix-assisted autologous chondrocyte transplantation for remodeling and repair of chondral defects in a rabbit model

Defectos del cartílago articular se considera un problema de salud importante porque el cartílago articular tiene una capacidad limitada para la auto-regeneración 1. Lesiones del cartílago no tratadas conducen a dolor en curso, afectar negativamente a la calidad de vida y predisponer para la osteoartritis. Durante las últimas décadas, varias técnicas quirúrgicas se han desarrollado para el tratamiento de estas lesiones. Sin embargo, hasta ahora no era posible lograr una reparación completa en términos de cubrir el defecto de cartílago hialino articular o de proporcionar satisfactoria recuperación a largo plazo 2-4. Por lo tanto, las lesiones del cartílago articular siguen siendo un objetivo prioritario para las técnicas regenerativas como la ingeniería de tejidos. En contraste con otras técnicas quirúrgicas, que a menudo conducen a la formación de tejido fibroso o fibrocartilaginoso, Ingeniería de Tejidos apunta a restaurar completamente la compleja estructura y las propiedades del cartílago articular original utilizando el potencial condrogénico de las células trasplantadas. Rn los últimos desarrollos abren posibilidades prometedoras para las terapias de regeneración del cartílago. El primer enfoque basado en células para el tratamiento de cartílago de grosor completo o lesiones osteocondrales se llevó a cabo en 1994 por Lars Peterson y Mats Brittberg que fue pionero en la implantación de condrocitos autólogos clínica (ACI) 5. Hoy en día, la técnica está bien establecido clínicamente para el tratamiento de grandes defectos del cartílago hialino de la rodilla, el mantenimiento de buenos resultados clínicos incluso 10 a 20 años después de la implantación 6. En los últimos años, la implantación de condrocitos autólogos se sometió a una rápida progresión. El uso de un tridimensional de colágeno-matriz artificial en el que las células se vuelven a plantar posteriormente se hizo más y más popular 7-9. MACT comprende de dos procedimientos quirúrgicos: En primer lugar, con el fin de recoger los condrocitos, una biopsia de cartílago necesita ser realizada a partir de una zona de cartílago no soporte de peso de tél articulación de la rodilla. Entonces, los condrocitos se extraen, se purificaron y se expandieron a un número suficiente de células in vitro. Los condrocitos se sembraron a continuación sobre una matriz tridimensional y pueden ser posteriormente reimplantados. Cuando se prepara un implante de tejido modificado, la tasa de proliferación y la capacidad de diferenciación son cruciales para una exitosa regeneración de los tejidos 10. Se cree que el uso de una matriz tridimensional como un portador de células para apoyar estas características celulares 11. El siguiente protocolo se resumir y demostrar una técnica para el aislamiento de condrocitos a partir de biopsias de cartílago, su proliferación in vitro y su siembra en una matriz en 3D (Condro-Gide, Biomateriales Geistlich, Wollhusen, Suiza). Finalmente, se describirá la implantación de las célula-matriz-constructos en defectos condrales creadas artificialmente de articulación de la rodilla de un conejo. Esta técnica se puede utilizar como un entorno experimentalpara experimentos adicionales de la reparación del cartílago.

La técnica quirúrgica descrita permite un éxito en el aislamiento y la implantación de condrocitos autólogos en un defecto condral artificial. La configuración experimental dio como resultado una integración con éxito del implante en el cartílago circundante. Después de 12 semanas in vivo, el defecto condral se llenó por tejido de reparación con una superficie homogénea e intacto, lo que reduce el estrés de cizallamiento y el daño al implante (Figura 4).</stro...

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Matrix-assisted Autologous Chondrocyte Transplantation for Remodeling and Repair of Chondral Defects in a Rabbit Model

Se describe una técnica experimental para el tratamiento de defectos condrales en la articulación de la rodilla del conejo. La implantación de condrocitos autólogos sembrados en una matriz es un método bien aceptado para la remodelación y reparación de lesiones del cartílago articular que proporcionan resultados satisfactorios a largo plazo. Matrix asistida por el trasplante de condrocitos autólogos (MACT) ofrece un método de implantación estandarizada y clínicamente establecida.

Matrix asistida por trasplante de condrocitos autólogos para la remodelación y reparación de defectos condrales en un modelo de conejo

Articular cartilage defects are considered a major health problem because articular cartilage has a limited capacity for self-regeneration 1. Untreated ...

matrix-assisted-autologous-chondrocyte-transplantation-for-remodeling

Research

JoVE Journal

Medicine

14.3K vistas.  Klinikum rechts der Isar der Technischen Universität München. Se describe una técnica experimental para el tratamiento de defectos condrales en la articulación de la rodilla del conejo. La implantación de condrocitos autólogos sembrados en una matriz es un método bien aceptado para la remodelación y reparación de lesiones del cartílago articular que proporcionan resultados satisfactorios a largo plazo. Matrix asistida por el trasplante de condrocitos autólogos (MACT) ofrece un método de implantación estandarizada y clíni...