Esta es una cirugía para inducir el modelo del ratón ofrece una alternativa para estudios relacionados con la degeneración del disco intervertebral lumbar. Este robusto modo LSI no requiere ningún equipo especial. Es reproducible y se puede utilizar para inducir la degeneración del disco intervertebral en un período relativamente corto de tiempo.
Controlar las profundidades de incisión y la hemorragia y realizar la resección de cada proceso interspinoso son dos gastos clave para la implantación de nuestro éxito para el experimento. Después de confirmar la falta de respuesta al reflejo del pedal, coloque un seis ratón negro C57 de ocho semanas de edad y anestesiado en una almohadilla quirúrgica en posición supina y aplique ungüento a los ojos del animal. Utilice una pequeña recortadora de animales para afeitar el área quirúrgica desde la región torácica inferior hasta la parte superior de la región sacra y retire el pelaje afeitado con toallitas de tejido.
Aplicar crema depilatoria en la zona afeitada con gasa para eliminar la crema después de no más de tres minutos y enjuagar la piel expuesta con dos mililitros de solución salina estéril de 0,9. A continuación, coloque una almohadilla cilíndrica quirúrgica hecha a medida debajo del abdomen para elevar la columna lumbar. Para exponer las vértebras L3 y L5 utilice el dedo índice para tocar los procesos espinosos subcutáneos de las vértebras lumbares y palpato para comparar los procesos con los de las vértebras torácicas y las vértebras sacrales para identificar la región lumbar.
Enjuague la piel con un 75% de alcohol, y usando un microscopio diseccionador use un bisturí para hacer una incisión de piel de tres a cuatro centímetros en la mitad de la línea sobre la región lumbar desde la región torácica media hasta la cadera. Identifique la columna lumbar por la forma en V de la fascia posterior insertada, en la punta para que los procesos espinosos y utilizar el bisturí para hacer incisiones musculares paraspinas posteriores poco profundas a lo largo de los procesos espinosos de L3 a L5 lateralmente a ambos lados de la columna vertebral. A continuación, utilice dos pares de fórceps oftálmicos para separar las capas musculares para exponer los procesos espinosos L3 a L5 y ligamentos supraespinosos.
Para separar los procesos espinosos individuales, utilice asas venosas para cortar ligamentos interespiosos y para resecar los procesos espinosos L3 a L5 y los ligamentos interespiosos. A continuación, utilice suturas trenzadas de seda estéril número cinco para cerrar la incisión de la piel sin volver a unir los músculos paraverleles y aplicar ungüento de clorcloruro de clortraciclina en el sitio quirúrgico. El análisis histomorfométrico 3D permite la medición del disco intervertebral, mientras que el análisis estructural 3D permite cuantificar el volumen total del tejido.
El volumen del disco intervertebral aumenta significativamente una semana después de la cirugía antes de disminuir de dos a 16 semanas después del procedimiento consistente con una disminución en la altura del disco intervertebral medida durante el mismo período de tiempo. El aumento de las cavidades dentro de las placas finales craneales también se observa en ratones LSI cuantificados por un mayor porcentaje de valores de separación trabecular mayor o igual a 0.089 y un aumento significativo en los volúmenes de endplate después de la cirugía. Las placas finales del modelo exhiben un fenotipo similar, lo que indica que LSI conduce a hipertrofia endplate y un aumento en el número de cavidades.
Los volúmenes de vértebras L5 aumentan ligeramente después de la cirugía con diferencias estadísticas observadas a las 16 semanas. Una disminución significativa en la relación entre el volumen óseo y total del tejido también está presente 16 semanas después de la cirugía, lo que indica que la LSI causa pérdida ósea vertebral en una etapa posterior. Una reducción en las vacuolas intracelulares de las células del núcleo pulposo también se acelera en animales LSI con un mayor número de osteoclastas observadas en las placas finales LSI.
Este modelo se puede modificar mediante la fijación de diferentes vértebras, como el quinto lumbar solamente, o desde el primer lumbar hasta el quinto lumbar.
