Nuestro protocolo es significativo porque representa un nuevo paradigma para evaluar los efectos del estrés crónico, específicamente el estrés psicosocial, en los resultados del embarazo. En este protocolo, exponemos a ratones preñados a diversos insultos psicosociales de diferentes intensidades de una manera impredecible. Los paradigmas de modelos animales anteriores empleaban factores estresantes físicos o un número limitado de factores estresantes administrados repetidamente, lo que no refleja la experiencia de las mujeres durante el embarazo.
Nuestro modelo de estrés psicosocial crónico supera estas limitaciones. Este método tiene amplias ramificaciones para diversas áreas de investigación, incluida la salud mental materna y la investigación adversa relacionada con el desarrollo infantil, y más ampliamente, para comprender los orígenes del desarrollo de la enfermedad en adultos a través de eventos intrauterinos adversos. Antes de comenzar cada factor estresante en el paradigma CGS, traiga los ratones del grupo CGS de la sala de alojamiento a la habitación designada para CGS.
Exponer a los ratones a diferentes factores estresantes después de un régimen estresante de 11 días que va desde el día gestacional 6.5 hasta 17.5. Para exponer a los ratones a objetos extraños, distribuya aleatoriamente seis canicas o seis Legos de diferentes formas en una jaula estática limpia con ropa de cama de ratón sin los nidos de ratón. Coloque todos los ratones de una jaula doméstica en la jaula estática con objetos extraños durante dos horas, luego devuelva a los ratones a su jaula doméstica.
Para exponer a los ratones al olor de depredador, coloque la ropa de cama sucia de un centímetro de grosor de las ratas hembra en una jaula estática limpia sin ropa de cama de ratón o polluelos. Coloque a todos los ratones de una jaula doméstica en la jaula estática con ropa de cama de rata sucia durante dos horas, luego devuelva a los ratones a su jaula doméstica. Para exponer a los ratones a una inclinación de la jaula, coloque todos los ratones de una jaula doméstica en una jaula estática limpia con ropa de cama para ratones sin los nidos de ratones.
Mantenga la jaula inclinada en un ángulo de 30 grados contra la pared durante dos horas, luego devuelva a los ratones a su jaula de origen. Para exponer a los ratones a cambios frecuentes de ropa de cama, coloque a todos los ratones de una jaula doméstica en una jaula estática limpia con ropa de cama de ratón sin los nidos de ratón. Cada 10 minutos, mueva suavemente los ratones a una jaula limpia diferente y reemplace la ropa de cama del ratón.
Después de dos horas, devuelva a los ratones a su jaula doméstica. Para exponer a los ratones a la eliminación de la ropa de cama, coloque a todos los ratones de una jaula doméstica en una jaula estática vacía y limpia sin ropa de cama para ratones o nidos durante dos horas, luego devuelva a los ratones a su jaula doméstica. Para exponer a los ratones al movimiento en una coctelera, coloque todos los ratones de una jaula doméstica en una jaula estática limpia con ropa de cama de ratón sin los nidos de ratón.
Coloque la jaula estática sobre un agitador de laboratorio recíproco a 140 golpes por minuto durante dos horas, luego devuelva a los ratones a su jaula de origen. Para exponer a los ratones a las luces durante la noche, coloque a todos los ratones de una jaula doméstica en una jaula estática limpia con ropa de cama de ratón sin los nidos de ratón. Mantenga las luces encendidas durante la noche para interferir con el ciclo de oscuridad.
Al día siguiente, devuelva a los ratones a su jaula de origen. Para exponer a un ratón a nuevos compañeros de jaula, transfiera el ratón a una jaula estática limpia con ropa de cama de ratón que contenga dos ratones hembra desconocidos. Deje al ratón en la jaula estática con los compañeros de jaula desconocidos durante la noche.
Al día siguiente, devolvió el ratón a su jaula de origen con compañeros de jaula familiares. Para exponer a los ratones a la ropa de cama mojada, sature la ropa de cama del ratón en una jaula estática con agua limpia mantenida a 24 grados centígrados. Coloque todos los ratones de una jaula doméstica en la jaula estática con ropa de cama húmeda durante la noche.
Al día siguiente, devuelva a los ratones a su jaula de origen. Después de que se complete el régimen de estrés en el día gestacional 17.5, aloremos a todos los ratones experimentales para prepararse para el parto y las evaluaciones funcionales aguas abajo. La exposición de ratones hembras preñados a CGS causa cambios en los parámetros relevantes para el estrés crónico, como la reducción del aumento de peso corporal durante el embarazo y el aumento del peso de las glándulas suprarrenales en el período posparto temprano.
Es importante destacar que las presas de CGS exhiben anomalías posparto y función neuroendocrina materna, como lo demuestra el aumento de los niveles séricos de corticosterona después de un nuevo insulto agudo. Además, las presas CGS muestran alteraciones en la atención materna como lo refleja un aumento en el grado de fragmentación de las señales maternas recibidas por los cachorros. La duración promedio de los combates de lamido / aseo se reduce mientras que el número medio de combates aumenta, lo que indica numerosos episodios cortos de comportamiento nutritivo.
La preferencia por la sacarosa también está deprimida en las presas CGS en comparación con las presas de control, lo que sugiere la presencia de anhedonia. Por último, las presas CGS también muestran un aumento de los comportamientos relacionados con la ansiedad, medido por una reducción en el tiempo pasado en los cuadrantes abiertos de la EZM en comparación con las presas de control. En la descendencia, la exposición a CGS en el útero resulta en una disminución del aumento de peso durante el período postnatal desde el día postnatal 7 al 21, aunque no hay diferencias al nacer.
Esta reducción en el aumento de peso corporal está presente en la descendencia de ambos sexos. Al intentar este procedimiento, establecer un cronograma para obtener embarazos cronometrado e implementar consistentemente toda la serie, los factores estresantes psicosociales impredecibles variables son críticos. Esta técnica puede ayudar a responder preguntas interesantes como ¿puede el estrés psicosocial materno causar efectos específicos del sexo en la función placentaria o el desarrollo y comportamiento del cerebro de la descendencia?
¿Y pueden estos efectos revertirse o modificarse mediante la intervención farmacológica o la atención materna postnatal?
