私たちのプロトコルは、慢性的なストレス、特に心理社会的ストレスが妊娠結果に及ぼす影響を評価するための新しいパラダイムを表すため、重要です。このプロトコルでは、妊娠中のマウスを予測不可能な方法で異なる強度の様々な心理社会的侮辱にさらす。以前の動物モデルパラダイムは、妊娠中の女性の経験を反映していない、物理的ストレッサーまたは繰り返し投与されるストレッサーの限られた数を採用しました。
私たちの慢性的な心理社会的ストレスモデルは、これらの制限を克服します。この方法は、母親の精神的健康や不利な乳児の発達関連研究を含む様々な研究分野に大きな影響を及ぼし、より広く、子宮内有害事象を通じて成人病の発生の起源を理解する。CGSパラダイムで各ストレータを開始する前に、ハウジングルームからCGS用に指定された部屋にCGSグループマウスを持って来てください。
妊娠6.5日目から17.5日目まで実行される11日間のストレッサーレジメンに続いて、マウスを異なるストレッサーにさらす。マウスを異物にさらすには、マウスの巣のないマウス寝具で6つのビー玉または異なる形状の6つのレゴをきれいな静的ケージにランダムに配布します。1つのホームケージからのすべてのマウスを異物を持つ静的ケージに2時間置き、マウスを自宅のケージに戻します。
マウスを捕食者の臭いに曝露するには、雌のラットから1センチメートルの厚さの汚れた寝具を、マウスの寝具や巣のないきれいな静的ケージに入れます。1つのホームケージからすべてのマウスを汚れたラット寝具で静的ケージに2時間置き、マウスを自宅のケージに戻します。マウスをケージの傾きに当てるには、1つのホームケージからのすべてのマウスを、マウスの巣のないマウス寝具で清潔な静的ケージに入れます。
ケージを壁に対して30度の角度で2時間傾け、マウスを自宅のケージに戻します。頻繁な寝具の変更にマウスを公開するには、マウスの巣のないマウスの寝具で、1つのホームケージからすべてのマウスを清潔な静的ケージに入れます。10分ごとに、マウスを別のクリーンケージにゆっくりと移動し、マウスの寝具を交換します。
2時間後、マウスを自宅のケージに戻します。マウスを寝具除去にさらすために、1つのホームケージからのすべてのマウスを、マウスの寝具や巣のない空の清潔な静的ケージに2時間置き、マウスを自宅のケージに戻します。シェーカー上でマウスを動かすために、1つのホームケージからすべてのマウスを、マウスの巣のないマウス寝具できれいな静的ケージに入れます。
静的ケージを相互ラボシェーカーの上に2時間毎分140ストロークに設定し、マウスを自宅のケージに戻します。マウスを一晩で明るくするには、1つのホームケージからのすべてのマウスを、マウスの巣のないマウス寝具できれいな静的ケージに入れます。暗いサイクルを妨げるために一晩中ライトを点灯してください。
翌日、マウスを自宅のケージに戻します。マウスを新しいケージの合体に露出するには、2匹の馴染みのない雌マウスを含むマウス寝具で、マウスを清潔な静的ケージに移します。一晩不慣れなケージの仲間と静的なケージにマウスを残します。
翌日、おなじみのケージ仲間と一緒にマウスをホームケージに戻しました。マウスを濡れた寝具にさらすために、24°Cに保たれたきれいな水で静的なケージにマウスの寝具を飽和させる。1つのホームケージからすべてのマウスを、濡れた寝具で静的なケージに入れます。
翌日、マウスを自宅のケージに戻します。ステッサーレジメンが妊娠17.5日目に完了した後、単一の家は、分娩および下流の機能評価のために準備するために、すべての実験マウスを収容する。妊娠中の雌マウスをCGSにさらすと、妊娠中の体重増加の減少や産後初期の副腎体重の増加など、慢性的なストレス関連パラメータの変化を引き起こす。
重要なことに、CGSダムは、新しい急性侮辱に続く血清コルチコステロンレベルの増加によって証明されるように、産後異常および母親の神経内分泌機能を示す。さらに、CGSダムは、子犬が受け取る母体信号の断片化の程度の増加によって反映されるように、母親のケアの変化を示す。試合の平均回数が増加する一方で、舐め/グルーミングの平均期間が短縮され、育成行動の短いエピソードが数多く示されています。
スクロースの好みは、制御ダムと比較するとCGSダムでも落ち込み、アンヘドニアの存在を示唆している。最後に、CGSダムはまた、制御ダムと比較してEZMの開いた象限に費やされた時間の短縮によって測定されるように、不安関連の行動の増加を示す。子孫では、子宮内のCGSへの暴露は出生後7日目から21日目までの出生後の期間に体重増加を減少させるが、出生時に違いはない。
体重増加のこの減少は、両方の男女の子孫に存在します。.この手順を試みるとき、時間指定妊娠を取得するためのスケジュールを確立し、一貫してシリーズ全体を実施する、可変予測不可能な心理社会的ストレッサーが重要です。この技術は、母親の心理社会的ストレスが胎盤機能や子孫の脳の発達と行動に性特異的な影響を引き起こす可能性があるなどの興味深い質問に答えるのに役立ちますか?
そして、これらの効果は、薬理学的介入や出生後の母親のケアによって逆転または変更できますか?
