Esta técnica representa un método no invasivo para evaluar la ganancia o pérdida de la función muscular en un entorno fisiológico. También se puede utilizar para evaluar longitudinalmente la función en el mismo sujeto durante la progresión de la enfermedad o antes, durante o después de la estrategia de tratamiento. Este método proporciona una verdadera prueba de fuerza máxima porque las contracciones musculares se evocan de una manera cuantificable controlada, independientemente de la motivación del sujeto.
Todas las preguntas de investigación que evalúan el músculo esquelético pueden ser amplificadas por esta metodología, ya que proporciona datos valiosos sobre la función primaria del músculo. Los individuos generalmente requieren de dos a 300 experimentos antes de perfeccionar un enfoque similar de animales pequeños. En nuestra experiencia, esta técnica de animales grandes requiere menos tiempo.
La colocación de la rodilla, la colocación de electrodos, el sujeto en la camilla y la altura de la placa del pie requieren práctica. Para comenzar, encienda la computadora, el estimulador, el sistema de transductor y la interfaz digital analógica unos 30 minutos antes de la prueba para permitir la estabilización de los cambios de material relacionados con el calor que pueden afectar las propiedades eléctricas. A continuación, seleccione el dispositivo de adquisición de datos adecuado y conectado.
A continuación, para optimizar la colocación del electrodo, haga clic en preparar el experimento cuando esté listo para comenzar el estudio. Abra el monitor de datos en vivo para permitir la investigación o visualización en tiempo real de las contracciones. Luego haga clic en Instant Sim para entregar contracciones repetidas.
Alternativamente, presione el botón de disparo manual en la unidad estimuladora para dar manualmente una contracción. Haga clic en ejecutar experimento cuando esté preparado para comenzar el experimento. Una vez que el cerdo esté completamente anestesiado, limpie las extremidades traseras derecha e izquierda con agua y jabón para eliminar cualquier residuo y afeitar el pelo de la piel prestando mucha atención al área lateral de la rodilla que luego se utilizará para la colocación de electrodos.
Luego transporte al cerdo a una mesa quirúrgica y colóquelo de forma segura en posición supina con el cerdo hacia el pie de la mesa y los músculos glúteos en o ligeramente sobre el extremo de la mesa. Para evaluar el par isométrico in vivo, coloque el pie en la placa del pie del transductor de fuerza, luego, utilizando un vendaje cohesivo flexible, conecte el pie a la placa del pie. Sostenga el pie en posición en la placa del pie con el tobillo en el punto neutro, luego asegure el pie al plato envolviendo el vendaje cohesivo alrededor del pie y la placa del pie al estilo de una cinta cerrada de tobillo de onda de canasta.
Una vez que el pie esté asegurado a la placa del pie, coloque el tobillo en ángulo recto, definido como cero grados o neutro para referencia de grados de deflexión de la maceta o la puerta. Después de estabilizar la rodilla y el tobillo en ángulo recto, coloque las barras de sujeción de las extremidades cerca de las ubicaciones necesarias. Y cuando esté listo, a partir del aspecto medial de la extremidad, alinee la barra de sujeción de la extremidad aproximadamente en la meseta tibial.
Luego alinee la barra de sujeción de la extremidad lateral en la cabeza distal del fémur y estabilice las barras firmemente usando los tornillos de bloqueo del pulgar. A continuación, aplique alcohol al 70% y, con gauss limpio, limpie la piel alrededor de la cabeza del fibular en círculos concéntricos comenzando en el centro de la colocación del electrodo previsto y moviéndose hacia afuera. Luego coloque los electrodos estériles de estilo electromiografía con aguja percutánea a través del nervio perineal e implante los electrodos subdérmicamente a una profundidad de aproximadamente cinco a 10 milímetros.
Optimice la colocación del electrodo utilizando amplitudes de corriente crecientes ajustadas en el estimulador, comenzando en 100 miliamperios y aumentando según sea necesario. Visualice la magnitud del par de contracción en la vista de datos en vivo y sobre el compartimiento interior del cerdo. Los cascos también pueden jugar y moverse hacia arriba.
Asegúrese de que el compartimento posterior a través del nervio tibial no se active durante la estimulación. Inspeccione visualmente y palpe la contracción del compartimento posterior y el movimiento hacia abajo de los cascos durante la estimulación. Inspeccione la región de la meseta de la contracción tetánica a partir del rastreo del tiempo de par en vivo en los siguientes pasos para detectar la falta de reclutamiento muscular antagonista.
Una vez optimizadas las amplitudes de colocación y estimulación del electrodo, se obtiene un par tetánico isométrico máximo utilizando los parámetros de estimulación descritos en el texto manuscrito. Para el análisis del ángulo de la articulación de par, mida el par tetánico isométrico máximo en un rango de posiciones del tobillo que van desde el neutro hasta los rangos extremos cercanos de la flexión de la jardinera o de cero a 50 grados de flexión de la jardinera. Después de la medición, comience a aflojar ambos tornillos de bloqueo de la etapa del goniómetro para moverse entre los ángulos de la articulación y asegúrese de que ambos tornillos de bloqueo se aprieten antes de la próxima contracción.
Para el análisis de frecuencia de par, coloque el tobillo en el ángulo articular deseado y luego mida el par isométrico máximo en un rango de frecuencias de estimulación que inducen trenes de contracciones no fusionados hasta y más allá de aquellos que inducen tetania completamente fusionada. Para analizar los datos, abra el programa de análisis. Luego, utilizando una plataforma de datos automatizada, calcule las diferentes variables en el análisis de formas de onda isométricas individuales.
Durante la evaluación in vivo, se necesita la visualización de la forma de onda de par en tiempo real para garantizar la activación adecuada del compartimento anterior. Las formas de onda solo deben reflejar la dosis de reflexión y tener una apariencia redondeada suave y una meseta tetánica aparente. Las inconsistencias o perturbaciones de la forma de onda pueden indicar una estimulación inadecuada o una colocación inadecuada de los electrodos.
Aquí se muestra el torque de contracción y el rastreo del tiempo de torque tetánico con un torque máximo del 50%. Las barras discontinuas en las extremidades ascendentes y descendentes del trazado del tiempo de par tetánico representan un rango de 30 a 70% de par máximo que puede determinar la tasa promedio de contracción o relajación. Aquí se muestran valores representativos para el ángulo de la articulación de par y las relaciones de frecuencia de par para las extremidades sin seguro.
Se realizaron registros simultáneos de par isométrico y EMG a frecuencias de estimulación de 20, 60 y 100 Hertz. El número de pulsos estimuladores refleja el cociente de la duración de la estimulación y el tiempo entre pulsos. Una frecuencia de estimulación de 20 hercios significa un pulso cada 50 milisegundos, por lo tanto, una duración de estimulación de 400 milisegundos dividida por 50 milisegundos entre pulsos equivale a ocho pulsos entregados.
Las grabaciones de EMG en bruto se convierten a través del análisis cuadrado de medios de raíz para visualizar la actividad muscular total con una frecuencia de estimulación creciente. Mientras se evalúa el par isométrico, la alineación anatómica adecuada, la colocación eléctrica adecuada y la confirmación de que la contracción provocada es solo para el compartimiento anterior son claves para un procedimiento exitoso. Dado que este es un procedimiento no terminal, se puede combinar con varios resultados de estudios complementarios.
Por ejemplo, en el modelo de animales grandes, la evaluación de la marcha y la movilidad se puede probar el mismo día junto con los datos de fuerza máxima para comprender mejor cómo la función neuromuscular influye en la deambulación.