Modelo murino del síndrome de dificultad respiratoria aguda inducido por ácido oleico

Este modelo induce en ratones varias características clave del síndrome respiratorio agudo, como el edema, la permeabilidad alveolar y la filtración de leucocitos, lo que ayuda a los investigadores a comprender mejor la fisiopatología del SDRA. El uso de oleico para inducir el SDR imita mejor estas condiciones, al tiempo que evita el riesgo de alterar el pH de la sangre y causar émbolos cuando se usa ácido oleico puro. Una sedación bien hecha es muy importante. Asegúrese de que el animal esté profundamente sedado durante todo el procedimiento.

De esta manera, ninguna expansión repentina puede obstaculizar el Hacer este procedimiento paso a paso, permite a cualquier asociado realizar este procedimiento correctamente. Además, esta técnica se puede aplicar para estudiar diferentes enfermedades cambiando la sustancia inyectable. Comience a preparar la solución de oleato de sodio agregando tabletas o solución de hidróxido de sodio en el agua ultrapura para elevar el pH a 12 a 13.

A continuación, añadir ácido oleico gota a gota bajo agitación constante en un baño ultrasónico a 37 grados centígrados. A continuación, para realizar la administración intratraqueal de ácido oleico, coloque al ratón anestesiado en decúbito dorsal sobre una almohadilla térmica a 37 grados centígrados, y realice una incisión de 0,5 a 1 centímetro en forma de V a nivel de la tiroides. Retire la tiroides para exponer la tráquea e inyecte 50 microlitros de la solución de oleato.

Después de la inyección, cierre la incisión con una sutura sintética de monofilamento no absorbible. Luego, regrese el ratón a la jaula de la casa y vigílelo hasta que se recupere por completo de la cirugía. Para la administración intravenosa, utilice una aguja ultrafina para inyectar ácido oleico en el plexo orbitario del ratón anestesiado.

Para recoger el líquido de lavado broncoalveolar, coloque el ratón sacrificado en la posición de decúbito dorsal y haga una incisión de 1 centímetro en la región anterior con unas tijeras quirúrgicas. Exponerlo a la tráquea y hacer una pequeña incisión para introducir un catéter intravenoso de calibre 20. Conecte el catéter a una jeringa estéril de 1 mililitro para inyectar lentamente 500 microlitros de solución salina estéril en los pulmones.

Luego, aspire el líquido de lavado broncoalveolar con la misma jeringa. Después de repetir la recolección de líquido de 3 a 5 veces, transfiera el líquido a un microtubo estéril y coloque el tubo en hielo. En análisis representativos, la inyección de ácido oleico aumentó los leucocitos totales en las vías intratraqueal e intravenosa en comparación con el control.

La administración intratraqueal de ácido oleico induce la producción de mediadores inflamatorios, como el factor de necrosis tumoral alfa, la interleucina 6 y la interleucina 1 beta, en comparación con el control. La administración intratraqueal e intravenosa de ácido oleico también aumentó la concentración total de proteínas en el líquido de lavado broncoalveolar. La inyección intratraqueal e intravenosa mejoró la concentración de prostaglandina E2 y la formación de cuerpos lipídicos que el control.

Además, tinción de hematoxilina y eosina. Ilustración de la disrupción tisular, hemorragia e infiltración leucocitaria tras la administración intravenosa e intratraqueal de ácido oleico. Después de que la investigación realizó la técnica, las muestras recolectadas podrían ser analizadas para evaluar la proteína Estos procedimientos pueden ayudar a investigar y comprender cómo puede imitar el SDRA, y elegir y desarrollar nuevos tratamientos que