Эта модель индуцирует у мышей несколько ключевых особенностей острого респираторного синдрома, таких как отек, альвеолярная проницаемость и лейкоцитарная фильтрация, тем самым помогая исследователям лучше понять патофизиологию ОРДС Использование олеиновой для индуцирования РДС лучше имитирует эти состояния, избегая при этом риска изменения рН крови и возникновения эмболов при использовании чистой олеиновой кислоты. Очень важна хорошо проведенная седация. Убедитесь, что животное находится под глубоким седативным действием на протяжении всей процедуры.
Таким образом, никакое резкое расширение не может помешать выполнению этой процедуры шаг за шагом, позволяет любому партнеру выполнить эту процедуру правильно. Также эта методика может быть применена для изучения различных заболеваний путем изменения инъекторного вещества. Начните приготовление раствора олеата натрия, добавив таблетки гидроксида натрия или раствор в сверхчистую воду, чтобы повысить pH до 12-13.
Затем добавляйте олеиновую кислоту капля за каплей при постоянном перемешивании в ультразвуковой ванне при температуре 37 градусов Цельсия. Далее для выполнения интратрахеального введения олеиновой кислоты уложите обезболиваемую мышь в положении дорсального пролежня на грелку при температуре 37 градусов Цельсия и сделайте разрез от 0,5 до 1 сантиметра в V-образной форме на уровне щитовидной железы. Удалите щитовидную железу, чтобы обнажить трахею, и введите 50 микролитров раствора олеата.
После инъекции закрыть разрез синтетическим нерассасывающимся монофиламентным шовным материалом. Затем верните мышь в домашнюю клетку и наблюдайте за ней до полного выздоровления после операции. Для внутривенного введения используйте ультратонкую иглу, чтобы ввести олеиновую кислоту в орбитальное сплетение мыши, находящейся под наркозом.
Для сбора жидкости бронхоальвеолярного лаважа уложите усыпленную мышь в положении спинного пролежня и сделайте хирургическими ножницами разрез в передней области диаметром 1 сантиметр. Поднесите его к трахее и сделайте небольшой надрез, чтобы ввести внутривенный катетер 20 калибра. Подсоедините катетер к стерильному шприцу объемом 1 миллилитр, чтобы медленно ввести в легкие 500 микролитров стерильного физиологического раствора.
Затем тем же шприцем отсасывают жидкость бронхоальвеолярного лаважа. После повторения сбора жидкости 3–5 раз перелейте жидкость в стерильную микропробирку и поместите трубку на лед. В репрезентативном анализе инъекция олеиновой кислоты увеличивала общее количество лейкоцитов во внутритрахеальном и внутривенном путях по сравнению с контролем.
Интратрахеальное введение олеиновой кислоты индуцирует продукцию медиаторов воспаления, таких как фактор некроза опухоли альфа, интерлейкин 6 и интерлейкин 1 бета, по сравнению с контролем. Интратрахеальное и внутривенное введение олеиновой кислоты также увеличивало концентрацию общего белка в жидкости бронхоальвеолярного лаважа. Интратрахеальные и внутривенные инъекции повышали концентрацию простагландина Е2 и образование липидных тел по сравнению с контролем.
Далее окрашивание гематоксилином и эозином. Проиллюстрировано разрушение тканей, кровоизлияние и лейкоцитарная инфильтрация после внутривенного и интратрахеального введения олеиновой кислоты. После того, как исследование выполнило технику, собранные образцы могут быть проанализированы для оценки белка Эти процедуры могут помочь исследовать и понять, как можно имитировать ОРДС, а также выбрать и разработать новые методы лечения, которые
