Mausmodell des Ölsäure-induzierten akuten Atemnotsyndroms

Dieses Modell induziert bei Mäusen mehrere Schlüsselmerkmale des akuten respiratorischen Syndroms, wie z. B. Ödeme, alveoläre Permeabilität und Leukozytenfiltration, und hilft den Forschern so, die Pathophysiologie von ARDS besser zu verstehen. Eine gut durchgeführte Sedierung ist sehr wichtig. Stellen Sie sicher, dass das Tier während des gesamten Eingriffs tief sediert ist.

Auf diese Weise kann keine plötzliche Erweiterung die Durchführung dieses Verfahrens Schritt für Schritt behindern, ermöglicht es allen Mitarbeitern, dieses Verfahren korrekt durchzuführen. Diese Technik kann auch angewendet werden, um verschiedene Krankheiten zu untersuchen, indem die injektorische Substanz geändert wird. Beginnen Sie mit der Zubereitung der Natriumoleatlösung, indem Sie Natriumhydroxidtabletten oder -lösung in das Reinstwasser geben, um den pH-Wert auf 12 bis 13 zu erhöhen.

Anschließend Ölsäure tröpfchenweise unter ständigem Rühren in einem Ultraschallbad bei 37 Grad Celsius zugeben. Um die intratracheale Verabreichung von Ölsäure durchzuführen, legen Sie die anästhesierte Maus in einer dorsalen Dekubitusposition bei 37 Grad Celsius auf ein Heizkissen und machen Sie einen Einschnitt von 0,5 bis 1 Zentimeter in V-Form auf Schilddrüsenhöhe. Entfernen Sie die Schilddrüse, um die Luftröhre freizulegen, und injizieren Sie 50 Mikroliter der Oleatlösung.

Nach der Injektion wird der Einschnitt mit einem synthetischen, nicht resorbierbaren monofilen Nahtmaterial verschlossen. Bringen Sie die Maus dann in den häuslichen Käfig zurück und überwachen Sie sie bis zur vollständigen Genesung von der Operation. Für die intravenöse Verabreichung injizieren Sie mit einer ultrafeinen Nadel Ölsäure in den orbitalen Plexus der anästhesierten Maus.

Um die bronchoalveoläre Lavageflüssigkeit aufzufangen, legen Sie die euthanasierte Maus in die dorsale Dekubitusposition und machen Sie mit einer chirurgischen Schere einen 1 Zentimeter langen Schnitt im vorderen Bereich. Setzen Sie es der Luftröhre aus und machen Sie einen kleinen Schnitt, um einen intravenösen Katheter mit 20 Gauge einzuführen. Schließen Sie den Katheter an eine sterile 1-Milliliter-Spritze an, um langsam 500 Mikroliter sterile Kochsalzlösung in die Lunge zu injizieren.

Saugen Sie dann die bronchoalveoläre Lavageflüssigkeit mit derselben Spritze ab. Nachdem Sie die Flüssigkeitsansammlung 3 bis 5 Mal wiederholt haben, geben Sie die Flüssigkeit in ein steriles Mikroröhrchen und legen Sie das Röhrchen auf Eis. In der repräsentativen Analyse erhöhte die Ölsäureinjektion die Gesamtleukozyten auf intratrachealen und intravenösen Wegen im Vergleich zur Kontrolle.

Die intratracheale Verabreichung von Ölsäure induziert im Vergleich zur Kontrolle die Produktion von Entzündungsmediatoren wie Tumornekrosefaktor alpha, Interleukin 6 und Interleukin 1 beta. Die intratracheale und intravenöse Verabreichung von Ölsäure erhöhte auch die Gesamtproteinkonzentration in der bronchoalveolären Lavageflüssigkeit. Die intratracheale und intravenöse Injektion erhöhte die Prostaglandin-E2-Konzentration und die Bildung von Lipidkörpern im Vergleich zur Kontrolle.

Des Weiteren Hämatoxylin- und Eosin-Färbung. Dargestellter Gewebeaufschluss, Blutung und Leukozyteninfiltration nach intravenöser und intratrachealer Verabreichung von Ölsäure. Nachdem die Forschung die Technik durchgeführt hat, können die gesammelten Proben analysiert werden, um Proteine zu bewerten. Diese Verfahren können dabei helfen, zu erforschen und zu verstehen, wie ARDS nachgeahmt werden kann, und neue Behandlungen auszuwählen und zu entwickeln, die