Esse modelo induz em camundongos várias características-chave da síndrome respiratória aguda, como edema, permeabilidade alveolar e filtração leucocitária, ajudando os pesquisadores a entender melhor a fisiopatologia da SDRA O uso de oleico para induzir SDR mimetiza melhor essas condições, evitando o risco de alterar o pH do sangue e causar êmbolos ao usar ácido oleico puro. Uma sedação bem feita é muito importante. Certifique-se de que o animal esteja profundamente sedado durante todo o procedimento.
Dessa forma, nenhuma expansão brusca pode atrapalhar o passo a passo de Fazer esse procedimento, permite que qualquer associado realize esse procedimento corretamente. Além disso, esta técnica pode ser aplicada para estudar diferentes doenças através da troca da substância injetora. Comece a preparar a solução de oleato de sódio adicionando comprimidos ou solução de hidróxido de sódio na água ultrapura para elevar o pH para 12 a 13.
Em seguida, adicione ácido oleico gota a gota sob agitação constante em um banho ultrassônico a 37 graus Celsius. Em seguida, para realizar a administração intratraqueal de ácido oleico, coloque o camundongo anestesiado em decúbito dorsal sobre uma bolsa térmica a 37 graus Celsius e faça uma incisão de 0,5 a 1 centímetro em forma de V ao nível da tireoide. Retire a tireoide para expor a traqueia e injete 50 microlitros da solução de oleato.
Após a injeção, fechar a incisão com fio sintético monofilamentar não absorvível. Em seguida, devolva o mouse para a gaiola de casa e monitore-o até a recuperação completa da cirurgia. Para administração intravenosa, use uma agulha ultrafina para injetar ácido oleico no plexo orbital do camundongo anestesiado.
Para a coleta do lavado broncoalveolar, colocar o camundongo eutanasiado em decúbito dorsal e fazer uma incisão de 1 centímetro na região anterior com tesoura cirúrgica. Expô-lo à traqueia e fazer um pequeno corte para introduzir um cateter intravenoso de calibre 20. Conecte o cateter a uma seringa estéril de 1 mililitro para injetar lentamente 500 microlitros de soro fisiológico estéril nos pulmões.
Em seguida, aspirar o lavado broncoalveolar com a mesma seringa. Após repetir a coleta de líquido de 3 a 5 vezes, transferir o líquido para um microtubo estéril e colocá-lo sobre gelo. Na análise representativa, a injeção de ácido oleico aumentou os leucócitos totais nas vias intratraqueal e intravenosa em comparação com o controle.
A administração intratraqueal de ácido oleico induz a produção de mediadores inflamatórios, como fator de necrose tumoral alfa, interleucina 6 e interleucina 1 beta, em relação ao controle. A administração intratraqueal e intravenosa de ácido oleico também aumentou a concentração de proteínas totais no lavado broncoalveolar. A injeção intratraqueal e intravenosa aumentou a concentração de prostaglandina E2 e a formação de corpos lipídicos do que o controle.
Além disso, coloração de hematoxilina e eosina. Ruptura tecidual ilustrada, hemorragia e infiltração leucocitária após administração intravenosa e intratraqueal de ácido oleico. Após a pesquisa realizar a técnica, as amostras coletadas puderam ser analisadas para avaliar a proteína Esses procedimentos podem ajudar a pesquisar e entender como pode mimetizar a SDRA, e escolher e desenvolver novos tratamentos que
