La evaluación en tiempo real de las propiedades electrofisiológicas marinas durante el entrenamiento ha sido un desafío hasta ahora. Este protocolo proporciona un enfoque para superar esto al permitir el monitoreo de ECG en tiempo real antes, durante y después del entrenamiento en cinta rodante. La combinación del entrenamiento en cinta rodante y el monitoreo de ECG en tiempo real permite obtener nuevos conocimientos sobre la relación entre el ejercicio y las arritmias, especialmente en los síndromes de arritmia hereditarios que utilizan modelos de ratones transgénicos.
El método en sí mismo es sencillo, pero necesita una atención cuidadosa durante la implantación del transmisor y el posicionamiento del cable eléctrico para garantizar una buena relación señal / ruido. Aparna Chivukula y Kavi Raj Chataut, dos estudiantes de doctorado en mi laboratorio, demostrarán el procedimiento. Active el transmisor colocando el imán suministrado muy cerca.
Después de la activación, pruebe la señal del transmisor utilizando un dispositivo de radio a una frecuencia AM de 530 hercios, un pitido nítido y claro indica que el transmisor está activado, mientras que un transmisor inactivado no da ninguna señal. Encienda la cinta de correr. Ajuste la pendiente de la cinta de correr, la velocidad y la intensidad del choque de acuerdo con el protocolo de entrenamiento.
Pulse Ajustes en la unidad de control y seleccione Prueba de cuadrícula. Esto abre una pantalla de selección de tamaño de cuadrícula. Seleccione Ratones.
Presione Inicio para comenzar la prueba de choque. Para comenzar la prueba, confirme la advertencia tocando la pantalla. Coloque la parte conductora del accesorio de esponja provisto con la cinta de correr en la rejilla de la cinta de correr.
Colócalo hasta que aparezca la palabra pass" en la pantalla. Prueba todas las cuadrículas de esta manera. La prueba finalizará automáticamente después de que todos los carriles la pasen con éxito, pero el usuario puede detenerla en cualquier momento presionando el botón Detener.
Para continuar con la prueba de limpieza, presione Inicio y espere a que se ejecute la prueba. Transfiera el animal al compartimento para correr. Coloque el receptor de señal en la caja transparente y conecte el receptor de señal a través del cable de conexión al sistema de adquisición de datos, que consiste en una matriz de intercambio de datos y una interfaz de señal, que a su vez se conecta a una computadora con el software de adquisición ejecutándose para ver la señal de ECG durante el experimento.
Pulse Iniciar para entrar en el modo de ejecución. Al finalizar, retire el receptor de señal de la caja transparente y vuelva a colocarlo debajo de la jaula como se muestra. Apague la cinta de correr para evitar descargas no deseadas.
Se obtuvieron datos de electrocardiograma con ondas P, Q, R, S y T claras en animales durante el entrenamiento. La frecuencia cardíaca aumenta a alrededor de 800 latidos por minuto cuando el animal está haciendo ejercicio, y se recupera gradualmente hacia la línea de base después del entrenamiento. El intervalo PR, la duración del QRS y los intervalos QTc se acortan bajo estrés, y una vez que el estrés ha terminado, regresan a la línea de base.
La detección de episodios de taquicardia y bradicardia muestra ritmo sinusal al inicio y taquicardia sinusal durante el entrenamiento. La frecuencia cardíaca aumenta durante el entrenamiento y vuelve gradualmente a la línea de base después del entrenamiento. Esta tendencia también se puede visualizar mediante la mediana del intervalo RR.
Se obtuvo una desviación estándar comparable de los intervalos de RR al inicio y durante el entrenamiento mediante anotación automatizada de RR, lo que demuestra la calidad de los datos. Uno de los pasos más críticos es el posicionamiento del receptor de señal en la caja transparente para garantizar una buena relación señal / ruido.