Nuestro protocolo ofrece un método simple y económico para controlar los niveles de glucosa en ratones. La principal ventaja de esta técnica es que no requiere microcirugía desafiante y no implica sangrado ni manipulación de ratones. Este método se puede utilizar para identificar fenotipos esquivos de manejo de glucosa en modelos de ratón de obesidad y diabetes.
Al intentar este protocolo, el paso más crítico es la inserción de la cánula debajo de la piel y el endurecimiento de las suturas internas para mantener la cánula en su lugar. Para comenzar a afeitarse la línea media de la espalda del ratón anestesiado, y utilizar una crema depilatoria para asegurar la depilación completa. Abra y cargue el sensor.
A continuación, monte el sensor en el dispositivo de montaje del sensor para exponer la cinta y el lado de la cánula del sensor. La cánula está vacía de la aguja. Sutura dos suturas de punto cónico 5-0 a la cinta en ambos lados de la cánula.
Para la preparación de la piel dorsal, haga una incisión de dos milímetros en el centro del área afeitada por encima de la columna vertebral con tijeras afiladas. Inserte brevemente pequeños fórceps con un borde romo debajo de la piel para formar un pequeño bolsillo subcutáneo, de modo que la cánula se pueda insertar fácilmente en el bolsillo. Pase una sutura a través de la piel a cada lado de la incisión.
Para la inserción del sensor, retire el sensor completamente del dispositivo de montaje del sensor y sostenga el sensor con pinzas para evitar que la cinta circundante se pegue a sí misma. Inserte cuidadosamente la cánula en el bolsillo subcutáneo. Tire de las suturas de cada lado, y apriételas y átelas para colocar el sensor firmemente en su lugar.
Esto evitará que la cánula se salga del bolsillo subcutáneo una vez que la cinta adhesiva se afloje con el tiempo, corte los extremos de las suturas y deséchelas. Coloque cinta adhesiva que rodee el sensor y haga ocho suturas discontinuas alrededor del sensor que unen el borde de los sensores pegados a la piel. Active el sensor.
Una vez que se inserta la cánula y el MCG se activa correctamente, recopile los datos utilizando el receptor. Aquí se muestran los datos de salida sin procesar de tres días de un solo ratón utilizando el código proporcionado. Los parámetros del eje y todos los demás parámetros se pueden modular en el código.
Aquí, los datos de tres días se muestran para mayor claridad. La fabricación de un bolsillo subcutáneo y la adición de algunas suturas permite que la cánula del sensor permanezca en su lugar durante más tiempo. Los datos continuos adquiridos utilizando esta técnica nos permitieron descubrir un fenotipo metabólico esquivo en una cepa específica de ratón.