Semplice monitoraggio continuo del glucosio in topi che si muovono liberamente

Il nostro protocollo offre un metodo semplice ed economico per monitorare i livelli di glucosio nei topi. Il vantaggio principale di questa tecnica è che non richiede microchirurgia impegnativa e non comporta sanguinamento o manipolazione dei topi. Questo metodo può essere utilizzato per identificare fenotipi elusivi di gestione del glucosio in modelli murini di obesità e diabete.

Durante il tentativo di questo protocollo, il passo più critico è l'inserimento della cannula sotto la pelle e il serraggio delle suture interne per mantenere la cannula in posizione. Per iniziare a radersi la linea mediana della parte posteriore del topo anestetizzato e utilizzare una crema depilatoria per garantire la completa depilazione. Aprire e caricare il sensore.

Quindi montare il sensore sul dispositivo di montaggio del sensore per esporre il nastro del sensore e il lato della cannula. La cannula è vuota dall'ago. Sutura due suture a punta di conicità 5-0 al nastro su entrambi i lati della cannula.

Per la preparazione della pelle dorsale, praticare un'incisione di due millimetri al centro dell'area rasata sopra la colonna vertebrale usando forbici affilate. Inserire brevemente una piccola pinza con un bordo smussato sotto la pelle per formare una piccola tasca sottocutanea, in modo che la cannula possa essere inserita facilmente nella tasca. Passare una sutura attraverso la pelle su ciascun lato dell'incisione.

Per l'inserimento del sensore, rimuovere completamente il sensore dal dispositivo di montaggio del sensore e tenere il sensore con una pinza per evitare che il nastro circostante si attacchi a se stesso. Inserire con cautela la cannula nella tasca sottocutanea. Tirare le suture su ciascun lato, stringerle e legarle per fissare saldamente il sensore in posizione.

Ciò impedirà alla cannula di scivolare fuori dalla tasca sottocutanea una volta che il nastro adesivo si allenta nel tempo, Tagliare le estremità delle suture e scartarle. Attaccare del nastro adesivo che circonda il sensore e creare otto punti di sutura discontinui attorno al sensore che collegano il bordo dei sensori alla pelle. Attivare il sensore.

Una volta inserita la cannula, e attivato con successo il CGM, raccogliere i dati utilizzando il ricevitore. I dati di output grezzi di tre giorni da un singolo mouse utilizzando il codice fornito sono mostrati qui. I parametri dell'asse e tutti gli altri parametri possono essere modulati nel codice.

Qui, i dati per tre giorni sono mostrati per chiarezza. La realizzazione di una tasca sottocutanea e l'aggiunta di alcuni punti di sutura consentono alla cannula del sensore di rimanere in posizione per un tempo più lungo. I dati continui acquisiti con questa tecnica ci hanno permesso di scoprire un fenotipo metabolico elusivo in uno specifico ceppo di topo.