Наш протокол предлагает простой недорогой метод контроля уровня глюкозы у мышей. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он не требует сложной микрохирургии, не требует кровотечения или обращения с мышами. Этот метод может быть использован для выявления неуловимых фенотипов управления глюкозой в мышиных моделях ожирения и диабета.
При выполнении этого протокола наиболее важным шагом является введение канюли под кожу и затягивание внутренних швов, чтобы удерживать канюлю на месте. Для начала побрейте среднюю линию спины анестезированной мыши и используйте крем для депиляции, чтобы обеспечить полное удаление волос. Откройте и загрузите датчик.
Затем установите датчик на устройство крепления датчика, чтобы обнажить ленту датчика и сторону канюли. Канюля пуста от иглы. Пришить два конических шва 5-0 к ленте с обеих сторон канюли.
Для подготовки дорсальной кожи острыми ножницами сделайте двухмиллиметровый разрез в центре бритой области над позвоночником. Ненадолго вставьте небольшие щипцы с тупым краем под кожу, чтобы образовался небольшой подкожный карман, чтобы канюлю можно было легко вставить в карман. Проведите шов через кожу с каждой стороны разреза.
Для установки датчика полностью снимите датчик с монтажного устройства датчика и удерживайте датчик щипцами, чтобы окружающая лента не прилипала к себе. Аккуратно вставьте канюлю в подкожный карман. Натяните швы с каждой стороны, затяните и завяжите их, чтобы датчик надежно закрепился на месте.
Это предотвратит выскальзывание канюли из подкожного кармана, как только клейкая лента со временем ослабнет, Отрежьте концы швов и выбросьте их. Прикрепите клейкую ленту вокруг датчика и наложите восемь прерывистых швов вокруг датчика, прикрепляя границу датчиков, приклеенных к коже. Активируйте датчик.
После того, как канюля вставлена и CGM успешно активирована, соберите данные с помощью приемника. Здесь показаны необработанные выходные данные за три дня с одной мыши с использованием предоставленного кода. Параметры оси и все остальные параметры могут быть модулированы в коде.
Здесь для наглядности показаны данные за три дня. Создание подкожного кармана и добавление нескольких швов позволяет канюле датчика оставаться на месте в течение более длительного времени. Непрерывные данные, полученные с помощью этого метода, позволили нам раскрыть неуловимый метаболический фенотип в конкретном штамме мыши.