Unser Protokoll bietet eine einfache, kostengünstige Methode zur Überwachung des Glukosespiegels bei Mäusen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie keine anspruchsvolle Mikrochirurgie erfordert und keine Blutungen oder den Umgang mit den Mäusen beinhaltet. Diese Methode kann verwendet werden, um schwer fassbare Phänotypen des Glukosemanagements in Mausmodellen für Adipositas und Diabetes zu identifizieren.
Beim Versuch dieses Protokolls ist der kritischste Schritt das Einführen der Kanüle unter die Haut und das Festziehen der inneren Nähte, um die Kanüle an Ort und Stelle zu halten. Rasieren Sie zunächst die Mittellinie des Rückens der betäubten Maus und verwenden Sie eine Enthaarungscreme, um eine vollständige Haarentfernung zu gewährleisten. Öffnen und laden Sie den Sensor.
Montieren Sie dann den Sensor an der Sensorhalterung, um das Klebeband und die Kanülenseite des Sensors freizulegen. Die Kanüle ist von der Nadel leer. Nähen Sie zwei 5-0-Nähte mit konischem Punkt auf beiden Seiten der Kanüle an das Band.
Für die dorsale Hautvorbereitung machen Sie mit einer scharfen Schere einen zwei Millimeter großen Schnitt in der Mitte des rasierten Bereichs oberhalb der Wirbelsäule. Führen Sie kurz eine kleine Pinzette mit stumpfem Rand unter die Haut ein, um eine kleine Unterhauttasche zu bilden, so dass die Kanüle leicht in die Tasche eingeführt werden kann. Führen Sie auf jeder Seite des Einschnitts eine Naht durch die Haut.
Entfernen Sie für das Einsetzen des Sensors den Sensor vollständig von der Sensorhalterung und halten Sie den Sensor mit einer Pinzette fest, damit das umgebende Klebeband nicht an sich selbst klebt. Führen Sie die Kanüle vorsichtig in die Unterhauttasche ein. Ziehen Sie die Nähte auf jeder Seite und ziehen Sie sie fest und binden Sie sie, um den Sensor fest zu befestigen.
Dadurch wird verhindert, dass die Kanüle aus der Unterhauttasche rutscht, sobald sich das Klebeband mit der Zeit löst. Schneiden Sie die Enden der Nähte ab und entsorgen Sie sie. Bringen Sie Klebeband um den Sensor herum an und machen Sie acht diskontinuierliche Nähte um den Sensor herum, um den Rand der Sensoren zu befestigen, die auf die Haut geklebt sind. Aktivieren Sie den Sensor.
Sobald die Kanüle eingeführt und das CGM erfolgreich aktiviert wurde, erfassen Sie die Daten mit dem Empfänger. Hier werden die Rohdaten von drei Tagen mit einer einzigen Maus unter Verwendung des bereitgestellten Codes angezeigt. Die Achsenparameter und alle anderen Parameter können im Code moduliert werden.
Hier werden aus Gründen der Übersichtlichkeit die Daten für drei Tage angezeigt. Durch das Anlegen einer subkutanen Tasche und das Hinzufügen einiger Nähte bleibt die Kanüle des Sensors länger an Ort und Stelle. Die kontinuierlichen Daten, die mit dieser Technik gewonnen wurden, ermöglichten es uns, einen schwer fassbaren metabolischen Phänotyp in einem bestimmten Mausstamm aufzudecken.
