El protocolo es significativo porque permite la monitorización funcional cardíaca de alta fidelidad en grandes modelos animales para la evaluación preclínica de terapias cardiovasculares. La principal ventaja de la técnica es que hace posible procedimientos como el registro de ecocardiogramas en cerdos despiertos sin usar anestésicos. Demostrando el procedimiento estarán Greg Brown, co-diseñador, Pia Balmaceda, becaria postdoctoral, y Thuy Ha, especialista del Instituto de Investigación y Capacitación Cardiovascular Nora Eccles Harrison.
Comience con el carro utilitario de servicio pesado prefabricado de tres estantes con ruedas de bloqueo. Cortó la parte delantera y trasera del carro. Luego, reemplácelos con tuberías de PVC de 1.25 pulgadas y puertas de eslabones de cadena.
Refuerce el carro con barras de metal en la parte inferior para mantener la integridad del carro. Haga un agujero en la parte superior del carro lo suficientemente grande como para acomodar una mano que sostiene una sonda de ultrasonido. Coloque una cubierta de plástico ajustada a la abertura.
Cree una rampa de metal reforzado para montar y desmontar utilizando material de aluminio. Agregue acolchado de goma extraíble para agarrar con pernos y ojales. Inserte pasadores de 12 pulgadas de largo y 3/8 de pulgada en los mecanismos de bisagras de PVC del lado izquierdo y derecho Rieles laterales de muesca para habilitar la configuración de ancho para las puertas laterales para mejorar la sujeción y evitar que el animal se dé la vuelta.
Para entrenar a los cerdos para que coman del comedero, llénelo con golosinas congeladas y prolongue el tiempo de reposo de los cerdos. Use combinaciones de alimentos como jugo, bebida sustitutiva de comidas, yogur con cereales y comida estándar, galletas y barras de frutas. Las comidas normales pueden ser retenidas y alimentadas en el comedero durante el período de ecocardiografía.
Antes de comer del artilugio, introdujo a los cerdos a los comederos congelados en el suelo para fomentar el reconocimiento del comedero como un proveedor de golosinas de alto valor. Para entrenar a los cerdos para que acepten ecocardiogramas de pie, comience introduciendo al cerdo en el carro rodeando el carro con golosinas de alto valor durante uno o dos días. Introduzca al cerdo en la rampa colocando golosinas a lo largo de la rampa durante un par de días.
Proporcione recompensas adicionales cuando un cerdo suba la rampa. Proporcione los comederos congelados en la puerta principal durante dos o tres días. Permita que el cerdo se pare en el carro sin comprometer sus restricciones laterales o puertas.
En un par de días, coloque la sonda de ultrasonido con gel en el cerdo para ayudarlo a acostumbrarse al contacto de la sonda. Para obtener imágenes de ecocardiograma, tome imágenes de los planos de imágenes paraesternales desde los lados del carro hacia las axilas derecha e izquierda. Las imágenes de vista apical, modo B y modo M se pueden obtener sondeando a través del piso del carro hasta la región subxifoidea.
Se obtuvieron imágenes de eje corto, vista transversal, modo M a través de los lados del carro para analizar el diámetro interno del ventrículo izquierdo en sístole y diástole y el posterior cálculo del volumen de eyección. La fracción de eyección generada a partir de sesiones de eco sedadas fue menor que a partir de sesiones conscientes. Se utilizaron imágenes paraesternales en modo B de vista de eje largo para calcular los volúmenes de eyección con el método de área/longitud.
Las fracciones de eyección tanto en sesiones sedadas como conscientes fueron similares. Una cosa importante a recordar es que el carro debe construirse teniendo en cuenta el tamaño creciente de los animales. La individualización de la mezcla de alimentos puede ayudar a mejorar la aclimatación.
El carro puede facilitar otros procedimientos, incluida la sangre extraída de catéteres de venas auditivas implantadas, el registro de electrocardiogramas y otros controles basados en ultrasonido, como el ultrasonido abdominal. Esta técnica brinda a los investigadores la oportunidad de obtener datos fisiológicos clave de alta fidelidad de cerdos despiertos utilizados para estudios de diversas enfermedades humanas.
