Il protocollo è significativo perché consente il monitoraggio funzionale cardiaco ad alta fedeltà in modelli animali di grandi dimensioni per la valutazione preclinica di terapie cardiovascolari. Il principale vantaggio della tecnica è quello di rendere possibili procedure come la registrazione di ecocardiogrammi in suini svegli senza l'uso di anestetici. A dimostrare la procedura saranno Greg Brown, co-designer, Pia Balmaceda, borsista postdoc, e Thuy Ha, specialista del Nora Eccles Harrison Cardiovascular Research and Training Institute.
Inizia con il carrello di servizio pesante a tre ripiani prefabbricato con ruote di bloccaggio. Segata la parte anteriore e posteriore del carrello. Quindi, sostituirli con tubi in PVC da 1,25 pollici e cancelli a catena.
Rinforzare il carrello con barre metalliche sul lato inferiore per mantenere l'integrità del carrello. Fai un buco sulla parte superiore del carrello abbastanza grande da ospitare una mano che tiene una sonda ad ultrasuoni. Posizionare un coperchio di plastica montato sull'apertura.
Creare una rampa metallica rinforzata per il montaggio e lo smontaggio utilizzando il calcio in alluminio. Aggiungi un'imbottitura in gomma rimovibile per la presa utilizzando bulloni e occhielli. Inserire perni lunghi 12 pollici e da 3/8 di pollice nei meccanismi a cerniera in PVC sinistro e destro Guide laterali Notch per consentire le impostazioni della larghezza per i cancelli laterali per migliorare la ritenuta e impedire all'animale di girarsi.
Per addestrare i maiali a mangiare dalla mangiatoia, riempilo con dolcetti congelati e prolunga il tempo in piedi dei maiali. Utilizzare combinazioni di alimenti come succo di frutta, bevanda sostitutiva del pasto, yogurt con cereali e chow standard, biscotti e barrette di frutta. I pasti normali possono invece essere trattenuti e alimentati nella mangiatoia durante il periodo di ecocardiografia.
Prima di mangiare dall'aggeggio, introduceva i maiali alle mangiatoie congelate sul terreno per incoraggiare il riconoscimento del trogolo come fornitore di trattamento di alto valore. Per addestrare i maiali ad accettare ecocardiogrammi in piedi, inizia introducendo il maiale nel carrello circondando il carrello con dolcetti di alto valore per uno o due giorni. Introdurre il maiale alla rampa posizionando dolcetti lungo la rampa per un paio di giorni.
Fornisci ricompense aggiuntive quando un maiale sale sulla rampa. Fornire le mangiatoie congelate al cancello anteriore per due o tre giorni. Lascia che il maiale stia sul carrello senza impegnare i suoi vincoli laterali o cancelli.
In un paio di giorni, posizionare la sonda ad ultrasuoni con gel sul maiale per aiutarlo ad abituarsi al contatto della sonda. Per ottenere immagini dell'ecocardiogramma, scattare immagini dei piani di imaging parasternale dai lati del carrello alle ascelle destra e sinistra. Le immagini della vista apicale, della modalità B e della modalità M possono essere ottenute sondando attraverso il pavimento del carrello fino alla regione subxifoide.
Attraverso i lati del carrello sono state ottenute immagini trasversali ad asse corto e trasversale per analizzare il diametro interno ventricolare sinistro in sistole e diastole e il successivo calcolo del volume di eiezione. La frazione di eiezione generata dalle sessioni di eco sedate era inferiore rispetto alle sessioni coscienti. Le immagini in modalità B della vista ad asse lungo parasternale sono state utilizzate per calcolare i volumi di espulsione con il metodo area/lunghezza.
Le frazioni di eiezione in entrambe le sessioni sedate e coscienti erano simili. Una cosa importante da ricordare è che il carrello dovrebbe essere costruito tenendo conto delle crescenti dimensioni degli animali. L'individualizzazione della miscela alimentare può aiutare a migliorare l'acclimatazione.
Il carrello può facilitare altre procedure, tra cui il prelievo di sangue da cateteri per vene auricolari impiantati, la registrazione dell'elettrocardiogramma e altri monitoraggi basati su ultrasuoni come gli ultrasuoni addominali. Questa tecnica offre ai ricercatori l'opportunità di ottenere dati fisiologici chiave ad alta fedeltà da suini svegli utilizzati per studi su varie malattie umane.
