O protocolo é significativo, pois permite a monitorização funcional cardíaca de alta fidelidade em modelos animais de grande porte para a avaliação pré-clínica da terapêutica cardiovascular. A principal vantagem da técnica é possibilitar a realização de procedimentos como o registro de ecocardiogramas em porcos acordados sem o uso de anestésicos. Quem demonstrará o procedimento serão Greg Brown, co-designer, Pia Balmaceda, bolsista de pós-doutorado, e Thuy Ha, especialista do Nora Eccles Harrison Cardiovascular Research and Training Institute.
Comece com o carrinho utilitário pesado pré-fabricado de três prateleiras com rodas de travamento. Viu a frente e a traseira do carrinho. Em seguida, substitua-os por tubos de PVC de 1,25 polegadas e portões de elo de corrente.
Reforce o carrinho com barras metálicas na parte inferior para manter a integridade do carrinho. Faça um orifício na parte superior do carrinho grande o suficiente para acomodar uma mão segurando uma sonda de ultrassom. Coloque uma tampa plástica encaixada na abertura.
Crie uma rampa metálica reforçada para montagem e desmontagem usando estoque de alumínio. Adicione estofamento de borracha removível para aderência usando parafusos e grommets. Insira pinos de 12 polegadas de comprimento e 3/8 polegadas nos mecanismos de dobradiça de PVC do lado esquerdo e direito Entalhe nos trilhos laterais para permitir configurações de largura para os portões laterais para melhorar a contenção e evitar que o animal se vire.
Para treinar os porcos a comer do cocho, encha-o com guloseimas congeladas e prolongue o tempo de pé dos porcos. Use combinações de alimentos como suco, bebida substituta de refeição, iogurte com cereais e ração padrão, biscoitos e barras de frutas. As refeições normais podem ser suspensas e alimentadas no cocho durante o período de ecocardiografia.
Antes de comer da engenhoca, introduziu os porcos a cochos congelados no chão para incentivar o reconhecimento do cocho como um provedor de tratamento de alto valor. Para treinar os porcos a aceitar ecocardiogramas em pé, comece introduzindo o porco na carroça, cercando a carroça com guloseimas de alto valor por um a dois dias. Introduza o porco na rampa colocando guloseimas ao longo da rampa por alguns dias.
Forneça recompensas adicionais quando um porco subir a rampa. Forneça os cochos congelados no portão da frente por dois a três dias. Permita que o porco fique em pé na carroça sem acionar seus freios laterais ou portões.
Em alguns dias, coloque a sonda de ultrassom com gel no porco para ajudá-lo a se acostumar com o contato com a sonda. Para obter imagens de ecocardiograma, obtenha imagens dos planos paraesternais das laterais do carrinho para as axilas direita e esquerda. As imagens de visão apical, modo B e modo M podem ser obtidas sondando através do assoalho do carrinho até a região subxifóide.
Imagens em eixo curto, transversal e modo-M foram obtidas pelos lados da carreta para análise do diâmetro interno do ventrículo esquerdo em sístole e diástole e posterior cálculo do volume de ejeção. A fração de ejeção gerada pelas sessões de eco sedado foi menor do que pelas sessões conscientes. Imagens modo-B em eixo longo paraesternal foram utilizadas para calcular os volumes de ejeção pelo método área/comprimento.
As frações de ejeção nas sessões sedada e consciente foram semelhantes. Uma coisa importante a lembrar é que o carrinho deve ser construído com o tamanho crescente dos animais em mente. A individualização da mistura de alimentos pode ajudar a melhorar a aclimatação.
O carrinho pode facilitar outros procedimentos, incluindo sangue coletado de cateteres de veia auricular implantados, gravação de eletrocardiograma e outros monitoramentos baseados em ultrassom, como ultrassom abdominal. Esta técnica oferece aos pesquisadores a oportunidade de obter dados fisiológicos chave de alta fidelidade de porcos acordados usados para estudos de várias doenças humanas.
