Aislamiento semiautomático de la fracción vascular estromal del tejido adiposo blanco murino utilizando un disociador tisular

Estamos interesados en los subtipos marrones y beige de adipocito que disipan la energía en forma de calor, mientras que el adipocito blanco generalmente almacena energía como Nuestro objetivo es desarrollar un nuevo tratamiento para la obesidad y la diabetes basado en la promoción del gasto energético, en lugar de la supresión de la ingesta de energía. Hemos identificado un factor de transcripción, NFI, como un regulador crítico de la diferenciación de adipocitos marrones mediante un análisis de cromatina abierta de todo el genoma. NFI y el regulador transcripcional maestro de la adipogénesis, PPAR-gamma, se co-localizan como los potenciadores específicos de la grasa marrón.

En el proceso de aislamiento de la fracción vascular estromal del tejido adiposo del ratón, la picada manual y la digestión de la colagenasa del tejido adiposo pueden conducir a la variabilidad experimental y la contaminación. Nuestro método utiliza un disociador de tejidos para la digestión de la colagenasa, que facilita el aislamiento de SVF, reduce la variabilidad experimental y la contaminación, y mejora la reproducibilidad. Los experimentos con adipocito individualmente diferenciados son indispensables para la investigación en nuestro campo.

Nuestro protocolo ofrecería un aislamiento de SVF fácil y reproducible para la posterior diferenciación de adipocitos y aceleraría la investigación en nuestra comunidad. Actualmente, estamos investigando el papel de la NFI del metabolismo de todo el cuerpo, como el peso corporal y la glucosa, utilizando modelos de ratón de ganancia y pérdida de función. También exploraremos otras activaciones farmacológicas de NFI para cada vía descendente en un futuro próximo.